2023 Fiscal Year Research-status Report
がん組織環境中の細胞外小胞を介した相互作用の時空間的解析
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22K20805
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| Research Institution | Waseda University |
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Principal Investigator |
西田 奈央 早稲田大学, 高等研究所, 講師(任期付) (80737114)
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| Project Period (FY) |
2022-08-31 – 2025-03-31
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| Keywords | 細胞外小胞 / エクソソーム / がん微小環境 / 3D組織モデル / 乳がん / がん転移 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究はがん組織という構造の中で、がん細胞から正常細胞への細胞外小胞の受け渡しを定量的・時空間的に理解することを目標としている。本年度は、前半は産休・育休を取得させていただいた。後半では、前年度に最適化した高感度な細胞外小胞ラベルを他の複数の高転移ながん細胞株にも導入して安定発現株を作製するとともに、脳組織スライスの体外培養維持方法の最適化を行い、乳がん細胞を脳組織上に播種することで、実験室での乳がん脳転移モデルを作製した。さらに、この乳がん脳転移モデル上で、がん細胞が細胞外小胞を周囲の環境に分泌する様子を、生きたまま経時的に観察することに成功した。この観察の実現のためには、培養条件や細胞外小胞のラベル方法のさらなる最適化などが必要であった。また、がん組織内で、がん由来の細胞外小胞を取り込んだ細胞の種類を特定するため、フローサイトメトリー実験を進めており、実験条件を最適化し、現在実施・解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
がん由来細胞外小胞を高感度にラベルし、検出するための条件検討を実施し、さらに組織スライスを活用した脳転移モデル上でのライブでの細胞外小胞の観察に成功したため。さらに、取り込み先の細胞種類の特定の実験を進められているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
がん由来の細胞外小胞を取り込んだ細胞を特定するため、フローサイトメトリーでの解析を進め、組織スライス上でも染色、特定する。さらに、現在２光子顕微鏡で実施している経時観察についても、さらに肺転移モデルなど他のスライスでも観察を行うとともに、実際に組織スライス上での細胞外小胞の挙動を、軌道解析で解析したり、到達先の細胞の分布や距離などの解析を進める。悪性度が異なる乳がんや他のがん細胞でも同様な観察を行い、細胞外小胞の受け渡しの違いによるによるがんの悪性化を理解する。
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| Causes of Carryover |
産休・育休を取得し、半期は実験を停止していたため。
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Research Products
(6 results)
