2013 Fiscal Year Annual Research Report
膠芽腫の分子標的治療耐性関連遺伝子群の機能解析とそれに基づく新規治療法の創出
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23390343
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
武笠 晃丈 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (90463869)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
齊藤 邦昭 杏林大学, 医学部, 助教 (50446564)
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| Project Period (FY) |
2011-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 膠芽腫 / 分子標的治療 / 治療耐性 / EGFR / 脳腫瘍幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度までに引き続き、分子標的治療耐性に関連する遺伝子群(SDeltaEs)の発現を調べる対象であるヒト悪性神経膠腫臨床材料の収集を行い、これを分類するためのゲノム異常の解析を行った。これには、IDH１遺伝子変異、染色体1p19qヘテロ接合性の消失、TERT遺伝子プロモーター変異、MGMTプロモーターメチル化（MSP法による）などに加え、ヒストンH3.3をコードする遺伝子である H3F3AK27Mの変異解析を含む。これにより、およそ50才以下の視床の悪性神経膠腫患者では、高率にH3F3A K27Mの変異が認められるのに対し、50才以上の患者では、ほとんど認めないことが明らかとなった。
以上のような検体を利用して、SDeltaE遺伝子の発現を定量的PCR法によって確認した。さらに、特に対象とするSDeltaE遺伝子の発現が高い細胞においては、その働きを阻害をshRNA遺伝子導入により行い、また発現が低いものに対しては、ウィスルを用いた遺伝子導入にて活性化させることで、腫瘍の増殖が抑制または促進がされるかを、in vitroではMTTアッセイ、in vivoでは、ヌードマウスにおける腫瘍形成能などを主な指標として解析した。
また、膠芽腫のEGFRによる増殖の促進は、in vitro の通常の培養条件下での実験では、判定困難なことが、これまでの予備実験にて予測されていた。そのため、in vivo での検証実験に供しうる新たな assay系の確立に取り組んだ。具体的には、キトサンを初めとする基質を用いた3次元培養法によるEGFR遺伝子発現の有無による増殖速度の差の測定や、様々な腫瘍幹細胞培養条件下での、増殖におけるEGFR発現の影響の評価などを行った。この、結果、特定の条件下において、EGFR発現の影響を in vitro においても良好に評価しうるという結果を得ることができた。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] H3F3A K27M mutations in thalamic gliomas from young adult patients2014
Author(s)
Aihara K, Mukasa A, Gotoh K, Saito K, Nagae G, Tsuji S, Tatsuno K, Yamamoto S, Takayanagi S, Narita Y, Shibui S, Aburatani H, Saito N
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Journal Title
Neuro Oncol
Volume: 16
Pages: 140-146
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Mutational analysis reveals the origin and therapy-driven evolution of recurrent glioma2014
Author(s)
Johnson BE, Mazor T, Hong C, Barnes M, Aihara K, McLean CY, Fouse SD, Yamamoto S, Ueda H, Tatsuno K, Asthana, Jalbert, Nelson, Bollen, Gustafson, Charron, Weiss, Smirnov, Song, Olshen, Cha, Zhao, Moore, Mungall, Jones SJ, Hirst M, Marra MA, Saito N, Aburatani H, Mukasa A, Berger S, Chang SM, Taylor BS, Costello JF
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Journal Title
Science
Volume: 343
Pages: 189-193
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] PCDH10 is required for the tumorigenicity of glioblastoma cells2014
Author(s)
Echizen K, Nakada M, Hayashi T, Sabit H, Furuta T, Nakai M, Koyama-Nasu R, Nishimura Y, Taniue K, Morishita Y, Hirano S, Terai K, Todo T, Ino Y, Mukasa A, Takayanagi S, Ohtani R, Saito N, Akiyama T
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun
Volume: 444
Pages: 13-18
DOI
Peer Reviewed
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