2013 Fiscal Year Annual Research Report

大腸癌進展に関与する新規遺伝子の機能解析および臨床応用への試み

Research Project

Project/Area Number	23501276
Research Institution	Japanese Foundation for Cancer Research
Principal Investigator	長山聡公益財団法人がん研究会, 有明病院消化器外科, 医長 (70362499)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	坂井義治京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60273455) 戸口田淳也京都大学, 再生医科学研究所, 教授 (40273502)
Keywords	大腸癌 / 浸潤
Research Abstract	【背景・目的】本研究は、AFAP1L1が上皮癌である大腸癌進展にも関与しているか検討すること、大腸癌進展における機能を解析すること、また分子標的治療ターゲットとしての可能性を探ることを目的とした。【方法】1) 大腸癌切除標本におけるAFAP1L1発現を定量的RT-PCR、免疫組織化学的染色で検討し、臨床病理学的因子との関連を統計解析した。2) 大腸癌細胞株RKO, SW480に対して強制発現安定株、同LoVoの発現抑制安定株を樹立し、in vitroでの表現型変化を評価した。マウス皮下異種移植、および形成した腫瘍に対してsiRNA局所投与による発現抑制実験を行った。【結果】1) mRNA、タンパク両レベルで癌部でのAFAP1L1発現亢進を認め、隣接正常粘膜ではほとんど発現がなかった。多変量解析で、AFAP1L1強発現は直腸癌治癒切除術後の再発リスクに関する独立して有意な因子であった。2) マウス皮下異種移植では細胞株3種すべてでAFAP1L1発現と腫瘍増殖能に正の相関を認めた。AFAP1L1導入RKOで形成した皮下腫瘍にsiRNA局所投与してAFAP1L1発現を抑制すると、腫瘍増殖速度が抑制された。In vitroでは、AFAP1L1導入RKO細胞は平坦あるいは紡錘形から円形に形態変化をきたした。Time-lapse観察で、円形細胞は培養皿上の遊走能が亢進していた。円形のAFAP1L1導入細胞に対してsiRNAでAFAP1L1発現を抑制すると平坦・紡錘形に戻り、AFAP1L1が細胞形態を制御することが示された。【結論】AFAP1L1は治癒切除術後の再発リスク予測に有効であり、また分子標的治療ターゲットの候補となる可能性がある。これらの解析結果をCancer Medicineに報告した(Takahashi et al. Cancer Medicine, 2014）