2011 Fiscal Year Research-status Report
血小板由来増殖因子の神経細胞死抑制およびシナプス形成促進作用に対する役割の検討
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23590444
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
石井 陽子 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 准教授 (00361949)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
笹原 正清 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 教授 (20154015)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| Keywords | 血小板由来増殖因子 / 神経細胞 / synaptogenesis / 細胞死 |
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| Research Abstract |
血小板由来増殖因子受容体 beta (PDGFR-b) conditional knockout mouseおよびコントロールマウスより分離した海馬初代培養細胞を用いて、Time Laps imaging systemにて軸索伸長、dendritic filopodiaおよびdendritic spineの運動性について定量した。Axonの伸長が著しい培養後2-5日目、dendritic filopodiaの運動性が著しい培養後7-10日目につき検討した。シナプスが成熟する培養21日目にPhalloidin染色にてspineの形態と数を比較し、免疫組織化学的にシナプス前部をsynapsin抗体、シナプス後部をPSD-95抗体にて染色し、評価した。PDGFR-b conditional knockout 神経細胞は、コントロールの神経細胞と比較して、dendritic filopodiaの運動性が有意に低下し、培養21日目ではspineの数が有意に低下してする結果を得た。PCR array、RT-PCRを用いてRho familyを含めた84種類の細胞骨格関連因子の増減をPDGFR-b conditional knockout 神経細胞とコントロールの神経細胞において比較検討し、RhoA, VASP, PAL1, ARPC3が有意差をもって減少するという結果を得た。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の申請計画では、１）Synaptogenesisに対する検討と、２）神経細胞死に対する検討 の２種類の検討を同時並行する内容であったが、１）Synaptogenesisに対する検討の方が進み、平成２４年度に予定していた内容も半ば終了した。２）神経細胞死に対する検討には遅延が生じているが、総合すると区分（２）と判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究計画に基づき、以下の実験を推進する予定である。１）Synaptogenesisに対する検討：PDGFR-α conditional knockout mouse、PDGFR-α/b double conditional knockout mouse、control mouseより採取した神経細胞を用いてPDGFR-b conditional knockout mouseと同様な検討を行い、遺伝子削除が軸索伸長やSynaptogenesisに与える影響を、形態学的に解析し、比較検討する。２）神経細胞死に対する検討：PDGFR-α conditional knockout mouse、PDGFR-b conditional knockout mouse、PDGFR-α/b double conditional knockout mouse、control mouseより採取したdoperminergic neuronを用い、6-hydroxydopamine誘導性神経細胞死（高濃度下）および神経突起変性の影響（低濃度下）をMTT assay、TUNEL法、LDH定量法、PI染色による定量、Time Lapse imaging systemを用いた形態学的解析、免疫組織化学的検討により比較し、PDGFR-α, PDGFR-b signalingのdoperminergic neuron保護に与える影響を調べる。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
当初の研究計画調書のとおり、主として細胞培養試薬等の消耗品に使用する。
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[Journal Article] Roles of PDGF receptor-beta in the structure and function of postnatal kidney glomerulus.2011
Author(s)
Suzuki H., Usui I., Kato I., Oya T., Kanatani Y., Yamazaki Y., Fujisaka S., Senda S., Ishii Y., Urakaze M., Mahmood A., Takasawa S., Okamoto H., Kobayashi M., Tobe K. and Sasahara M.
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Journal Title
Diabetologia
Volume: 54
Pages: 2953-2962
Peer Reviewed
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[Journal Article] Roles of PDGF receptor-beta in the structure and function of postnatal kidney glomerulus.2011
Author(s)
Nakagawa T., Izumino K., Ishii Y., Oya T., Hamashima T., Jie S., Ishizawa S., Tomoda F., Fujimori T., Nabeshima YI., Inoue H. and Sasahara M.
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Journal Title
Nephrol. Dial. Transplant.
Volume: 26
Pages: 458-468
Peer Reviewed
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[Journal Article] Cognitive and socio-emotional deficits in platelet-derived growth factor receptor-β gene knockout mice.2011
Author(s)
Nguyen PT., Nakamura T., Hori E., Urakawa S., Uwano T., Zhao J., Li R., Bac ND., Hamashima T., Ishii Y., Matsushima T., Ono T., Sasahara M. and Nishijo H.
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Journal Title
PLoS One
Volume: 6
Pages: e18004
Peer Reviewed
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[Journal Article] Reduced expression of the ATRX gene, a chromatin-remodeling factor, causes hippocampal dysfunction in mice.2011
Author(s)
Nogami T., Beppu H., Tokoro T., Moriguchi S., Shioda N., Fukunaga K., Ohtsuka T., Ishii Y., Sasahara M., Shimada Y., Nishijo H., Li E. and Kitajima I.
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Journal Title
Hippocampus
Volume: 21
Pages: 678-687
Peer Reviewed
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[Presentation] PDGFR-β is essential recruitment but not for survival of pericyte in adult mouse brain.2011
Author(s)
Shen J., Ishii Y., Xu G., Dang CT., Hamashima T., Matsushima T., Yamamoto S., Hattori Y., Takatsuru Y., Nabekura J., and Sasahara M.
Organizer
The 6th International conference of Neurons and Brain Diseases in Toyama
Place of Presentation
Toyama
Year and Date
2011, 8, 3-5
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