2011 Fiscal Year Research-status Report
種々の癌細胞における細胞増殖因子刺激によるマイクロＲＮＡ発現調節
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23590455
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| Research Institution | University of Fukui |
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Principal Investigator |
伊藤 浩史 福井大学, 医学部, 教授 (80253847)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2014-03-31
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| Keywords | マイクロRNA / 細胞増殖因子 / 転写翻訳調節 / HGF / 癌細胞 / 頭頸部癌 / 前立腺癌 / アンドロゲン |
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| Research Abstract |
本研究は、種々の臓器の癌細胞において、肝細胞増殖因子Hepatocyte Growth Factor (HGF)をはじめとする細胞増殖因子の刺激により、細胞内のマイクロＲＮＡ（以下miRNA）発現がどのように変化し、ターゲットとなる下流の機能遺伝子の発現にどのような変化を来たし、さらに癌細胞全体の機能発現にどのような影響を与えているかを検討することを目的としている。昨年度我々は、頭頚部扁平上皮癌培養細胞株において、HGF刺激前後で発現が変化する複数のmiRNAをマイクロアレイ解析で同定し、今年度はその中からHGF刺激により作動する重要な機能を担っている遺伝子を制御していると考えられるmiRNAとして、特に癌細胞の上皮間葉系移行に関与するZEB1をターゲットとするmiR-200cと、癌細胞の浸潤や増殖因子の活性化に関わるST-14/matriptaseをターゲットとするmiR-27bを同定し論文として報告した。さらに前立腺癌でも同様な変化がおきていないか範囲を広げて研究を進め、HGF以外の増殖因子刺激としてアンドロゲン刺激の有無によっても同様のmiRNA発現の変化が起きて、ターゲットとなる下流の機能遺伝子の翻訳制御に関わっているかどうか現在検討中である。また過年度、頭頚部扁平上皮癌で発現しているmiRNA全般についてマイクロアレイを用いて解析し、扁平上皮で特異的に発現しているmiRNAを複数同定したが、今年度は前立腺癌でも同様に発現が変化しているmiRNAを検索し、Gleson score別に癌細胞を分取することによって、より詳細な予後診断や治療マーカーになりうるmiRNAを複数同定し、現在検証作業を行なっている。これらの成果は国際学会（米国癌学会）で発表した他、論文にまとめた（投稿中）。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
昨年度頭頸部癌培養癌細胞株でHGF刺激前後で発現が変化するmiRNAを、マイクロアレイ解析によって明らかにしたが、今年度はその中からHGF刺激により作動する重要な機能を担っている遺伝子を制御していると考えられるmiRNAとして、特に癌細胞の上皮間葉系移行に関与するZEB1をターゲットとするmiR-200cと、癌細胞の浸潤や増殖因子の活性化に関わるST-14/matriptaseをターゲットとするmiR-27bを同定し論文として報告することができた。さらに前立腺癌でも同様な変化がおきていないか研究を進め、HGF以外の増殖因子刺激としてアンドロゲン刺激の有無によっても同様のmiRNA発現の変化が起きて、ターゲットとなる下流の機能遺伝子の翻訳制御に関わっているかどうか現在検討している。また前立腺癌で発現が変化しているmiRNAを検索し、Gleson score別に癌細胞を分取することによって、より詳細な予後診断や治療マーカーになりうるmiRNAを複数同定し、現在検証作業を行なっている。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は引き続き今年度のようなin vitroの研究および病理組織学的な検討（検証）を進めていくとともに、HGF以外の増殖因子刺激、特に頭頸部癌においてはEGF、前立腺癌においてはアンドロゲン刺激前後に変動するmiRNAの発現変化についてmiRNAマイクロアレイを用いて比較検討を行い、前立腺癌についてはGleason pattern別に発現の差異がないかどうかも検討する。変動したmiRNAについてはターゲット遺伝子を検索し、そのmRNA発現や蛋白発現に変化がないか調べ、逆にmiRNAを強制発現させたり、ノックダウンさせて、確かにその遺伝子がターゲットであるかどうか検証するとともに、実際に病理組織標本を用いて検証作業を行う。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
すべて消耗品費として以下のような物品に使用予定である。１）試薬類 ２）プラスティック器具類 ３）抗体、カラム類 ４）培養液、培養器具類
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[Journal Article] A NOTCH3-mediated squamous cell differentiation program limits expansion of EMT-competent cells that express the ZEB transcription factors.2011
Author(s)
Ohashi S, Natsuizaka M, Naganuma S, Kagawa S, Kimura S, Itoh H, Kaiman RA, Nakagawa M, Darling DS, Basu D, Gimotty PA, Klein-Szanto AJ, Diehl JA, Herlyn M, Nakagawa H
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Journal Title
Cancer Res
Volume: 71
Pages: 6836-6847
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