ＲＮＡヘリケースＭＯＶ１０によるＮＦｋａｐｐａＢの負の制御の解析

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 23591383
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 小林 正行 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90513820)
• Keywords: NF kappaB / TCR

Research Abstract

MOV10に対してはNFkappaBの活性を抑える効果があることを確認するも、その機序に関しては残念ながら解明できませんでした。研究実施計画書でうまくいかなかった場合として、cDNAライブラリーを用いた実験によるスクリーニングの結果、新たにCKIP-1という分子が候補にあがり、この分子におけるNFkappaB抑制機序の研究を行った。CKIP-1はCARMA1と結合し、PKCthetaとCARMA1との相互作用を阻害することでPKCtheta-CBM-NF-kappaB signalingを抑制することが認められた。CKIP-1のPleckstrin homology (PH) domainが、CARMA1との結合においても、またNF-B抑制効果においても必要であった。CKIP-1は、TNFalfaにより誘導されるNF-kappaB活性は抑制せず、CD3単独やPMA、PMA/CD28により誘導されるNF-kappaB活性を抑制する一方、CD3/CD28共刺激により誘導されるNF-kappaB活性を抑制しなかった。その機序としてCD3/CD28共刺激の際は、CKIP-1の細胞内局在が変化しCARMA1と結合できなくなり、NF-B活性への抑制効果を示せないことが明らかとなった。CKIP-1は、NF-B活性を定常状態に維持したり、不適切なシグナルによってT細胞が活性化することを防いだりすることで、適切なCD3/CD28シグナル伝達のためのgatekeeperのような役割を果たしていると予想された。以上の知見は第75回日本血液学会学術集会で報告したとともにPLOS One 2014 Jan 17;9(1):e85762に論文が掲載された。

Research Products

• [Journal Article] CKIP-1 is an intrinsic negative regulator of T-cell activation through an interaction with CARMA1 (2014)
  • Author(s): Takashi Sakamoto, Masayuki Kobayashi, Kohei Tada, Masanobu Shinohara, Katsuhiro Io, Kayoko Nagata, Fumie Iwai, Yoko Takiuchi, Yasuyuki Arai, Kouhei Yamashita, Keisuke Shindo, Norimitsu Kadowaki, Yoshio Koyanagi and Akifumi Takaori-Kondo
  • Journal Title: PLOS ONE Volume: 9 Pages: e85762
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0085762
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Defining HIV-1 Vif residues that interact with CBF-beta by site-directed mutagenesis. (2014)
  • Author(s): Matsui M, Shindo K, Nagata K, Io K, Tada K, Iwai F, Kobayashi M, Kadowaki N, Harris RS, Takaori-Kondo A.
  • Journal Title: Virology Volume: 449 Pages: 82-87
  • DOI: 10.1016/j.virol.2013.11.004
  • Peer Reviewed
• [Presentation] CKIP-1 is an intrinsic negative regulator for T cell activation through interacting with CARMA1 (2013)
  • Author(s): Takashi Sakamoto, Masayuki Kobayashi, Kohei Tada, Masanobu Shinohara, Katsuhiro Io, Yasuyuki Arai, Kouhei Yamashita, Keisuke Shindo, Norimitsu Kadowaki, Yoshio Koyanagi, Akifumi Takaori-Kondo
  • Organizer: 第75回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 札幌
  • Year and Date: 20131011-13