2014 Fiscal Year Annual Research Report
ミトコンドリア―活性酸素系の蝸牛内ライブイメージング
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23592475
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
吉川 弥生 東京大学, 医学部附属病院, 病院診療医 (00452350)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂本 幸士 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (50323548)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 耳科学 / 抗加齢医学 / 内耳 / 有毛細胞 / 難聴 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【概要】本研究では、モルモット蝸牛での騒音下in vivo 活性酸素イメージング法の確立および抗酸化剤の聴力保護能測定を行った。【内容】(1) 蝸牛における live ROS イメージング (a) 高速コンフォーカル顕微鏡を用いた、ex vivo 系での内耳活性酸素発生量可視化システムの確立 (障害薬剤、最適蛍光色素の選定)：高速コンフォーカル顕微鏡 Nikon A1Rを用いたリアルタイム断層撮影・３次元再構築により、有毛細胞・支持細胞のどの部分で活性酸素が発生しているのかを測定した。活性酸素発生剤としてミトコンドリア電子伝達系酵素複合体IIIの特異的阻害剤である Antimycin A を使用し、活性酸素指示薬としてはAminophenyl fluorescein (APF)およびhydroxyphenyl fluorescein (HPF)を用いた。(b) 音響曝露下でのin vivo、live ROSイメージング(最適音源、周波数の設定)：騒音難聴モデルとして、蝸牛を露出したモルモットを顕微鏡で観察しながら、外耳道に挿入した高出力イヤホンから騒音曝露を行い、これを上記のシステムを用いて検出した。(2) ミトコンドリア機能障害マウスでのミトコンドリア分布、活性酸素発生の観察：mtGFP-Tg マウスの内耳を摘出し蝸牛を whole mount 処理し、共焦点顕微鏡で観察した。(3) 種々の内耳保護剤の内耳での抗酸化メカニズムの検証・遺伝子異常マウスの内耳脆弱性の解析：水素飽和水を一定期間投与したマウス内耳を用い、障害曝露時の蝸牛内酸化ストレスの増減を定量した。障害にはシスプラチンなどの抗悪性腫瘍剤を使用した。
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[Journal Article] Favorable prognostic factors for long-term postoperative hearing results after canal tympanoplasty for congenital aural stenosis2014
Author(s)
Sakamoto T, Kikkawa YS, Kikuta S, Kinoshita M, Ueha R, Suzukawa K, Kashio A, Kakigi A, Ito K, Suzuki M, Yamasoba T
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Journal Title
Otology & Neurotology
Volume: 35
Pages: 966-71
DOI
Peer Reviewed
