2011 Fiscal Year Research-status Report

口腔粘膜のびらん潰瘍病変におけるＴｈ１７分化誘導機構とオ－トファジ－の関与

Research Project

Project/Area Number	23592758
Research Institution	Tohoku University
Principal Investigator	菅原由美子東北大学, 大学病院, 助教 (30235866)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	酒井梓東北大学, 大学病院, 医員 (90463778) 佐藤恭子東北大学, 大学病院, 医員 (80547266) 菅原俊二東北大学, 歯学研究科(研究院), 教授 (10241639) 笹野高嗣東北大学, 歯学研究科(研究院), 教授 (10125560)
Project Period (FY)	2011-04-28 – 2014-03-31
Keywords	ヒト唾液腺上皮細胞株 / ATP / P2X7受容体 / MHC classII / オートファジー
Research Abstract	【結果】ヒト唾液腺上皮細胞株をATPで刺激すると、細胞膜表面にMHC class IIの発現が認められた。細胞質内の解析では、無刺激の状態でも細胞質内に恒常的にMHC class IIが発現していることが確認されたが、ATP刺激による発現量に変化はなかった。また、MHC class II転写調節因子CIITAの発現量についてもATP刺激による増加は認められなかった。HSGではP2X7受容体が存在しており、P2X7受容体アゴニストであるBzATP刺激により、細胞膜表面でのMHC class IIの発現が誘導され、アンタゴニストであるoATP刺激により、ATPによるMHC class IIの発現が抑制された。さらに、ATP刺激により、細胞内でのオートファゴソームの形成の促進がみられ、MHC class II分子を内包したexosomeの放出が認められた。このexosomeはオートファジーのマーカーであるLC3-IIを発現していた。【結論】以上の結果から、ヒト唾液腺上皮細胞株は細胞内にMHC class II分子を恒常的に発現しており、細胞外ATP刺激によりP2X7受容体を介して、MHC class II分子を細胞膜表面へ表出させると同時に、オートファゴソームに関連したexosomeに内包された形で細胞外に放出する可能性が示された。これより、細胞外ATPは末梢性トレランスの破綻を誘導し、シェーグレン症候群発症に関与するという新たな可能性が示唆された。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 4: Progress in research has been delayed. Reason 口腔粘膜のびらん・潰瘍病変の組織試料を用いて、オートファジーおよびIL-17の解析を行う予定であったが、震災により対象試料全てが損失したため、本年度は培養細胞を対象とした検索のみであった。したがって、研究目的の達成度として当初目的の50％と考えている。
Strategy for Future Research Activity	現在、口腔粘膜のびらん・潰瘍病変の組織試料を集めている途上である。この組織試料を用いてオートファジーおよびIL-17の解析を進めていく。
Expenditure Plans for the Next FY Research Funding	次年度使用額は、当初計画していた口腔粘膜のびらん・潰瘍病変の組織試料を用いて、オートファジーおよびIL-17の解析を次年度に延期することにより生じたものであり、延期したオートファジーおよびIL-17の解析に必要な経費として平成24年度請求額とあわせて使用する予定である。