2013 Fiscal Year Annual Research Report
臨床応用を念頭に置いた羊膜を基質とした培養歯髄由来細胞シートの開発
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23592934
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
山本 俊郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (40347472)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
雨宮 傑 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90398389)
喜多 正和 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (60153087)
金村 成智 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (70204542)
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| Keywords | 羊膜上培養歯髄由来細胞シート / 羊膜 / 歯髄由来細胞 / 免疫組織化学 / 移植・再生医療 / 再生医学 / 歯学 / 細胞・組織 |
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| Research Abstract |
本研究では、これまでに羊膜上で歯髄由来細胞を培養することで、羊膜を基質とした培養歯髄由来細胞シート（歯髄細胞シート）の作成に成功した（平成23年度）。この歯髄細胞シートは、骨分化誘導培地で培養することで、アリザリンレッドS染色への高い染色性と間葉系幹細胞マーカーの発現がみられた（平成24年度）。そこで平成25年度は、歯髄細胞シートの臨床応用を目指して以下のように、さらなるシートの最適化を行った。
実際には、抜去された智歯より歯髄組織を採取。10％FBS/DMEM培養液にて3～4代継代培養後、羊膜上にこれら歯髄由来細胞を播種し、2週間培養、HE染色ならびにvimentin、Ki-67、Zo-1、desmoplakin、colagenIV、CD44、CD105、CD146について免疫組織化学で評価を加えた。また、歯髄細胞シートを10％FBS/DMEM（control群）あるいは骨分化誘導培地（骨分化群）にて4週間培養後、アリザリンレッドS染色にて骨分化能を検討した。
その結果、歯髄由来細胞は羊膜上でvimentin、Ki-67、Zo-1、desmoplakin、colagenIV陽性を示し、シート状の培養が可能であった。また、間葉系幹細胞マーカーであるCD44、CD105、CD146陽性細胞の局在を認めた。アリザリンレッドS染色では、骨分化群がcontrol群と比べ高い染色性を示した。
本研究から、作成した羊膜を基質とした培養歯髄由来細胞シートは、シート上の歯髄幹細胞による歯周組織再生の可能性が示唆された。
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