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2011 Fiscal Year Research-status Report

小胞輸送を介したフラボノイドの細胞外分泌システムの立証

Research Project

Project/Area Number 23657028
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

中山 亨  東北大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (80268523)

Project Period (FY) 2011-04-28 – 2013-03-31
Keywords国際情報交流
Research Abstract

イソフラボン-DPBA複合体の分光特性についての申請者らのこれまでの実験データをベースにして,種々のイソフラボン及びその配糖体の蛍光スペクトルなどについて詳細に解析し,in vivoにおけるイソフラボンイメージング条件を検討した.また,イソフラボン骨格の生合成酵素である2-ヒドロキシイソフラバノン合成酵素(IFS)および液胞移行のための配糖化を触媒するイソフラボン7-O-グルコシルトランスフェラーゼ(GmIF7GT)を過剰発現させるコンストラクトを作製している.この際,グルココルチコイド受容体とグルココルチコイド誘導体(デキサメタゾン,DEX)を利用した特異的遺伝子発現誘導系による発現系を適用している.作製したコンストラクトについて,Agrobacterium rhizogenesを用いた毛状根の形質転換系による導入を試みている.また代謝物の蓄積量の変動を分析するための高速液体クロマトグラフィー(HPLC)条件を確立した.液胞に由来するイソフラボンの局在を明確に解析するため,液胞(膜)に局在するタンパク質を蛍光タンパク質に融合させ,そのダイズ根で発現を試みている.液胞の水チャンネルであるtonoplast intrinsic protein (TIP)の複数のサブタイプを局在マーカータンパク質の候補として用い,また膜小胞のリアルタイムイメージングを行なう必要があるため,融合させる蛍光タンパク質はKikume Green-Redを用いている.

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

フラボノイドイメージングのため,蛍光ラベルの特異性と感度をさらに上げる必要がある.また植物の形質転換に時間を要しており,引き続き条件検討を行う.

Strategy for Future Research Activity

フラボノイドイメージングの特異性と感度をさらに上げため,検出原理の異なる他の方法についても検討したい.また植物の形質転換の条件検討を引き続き実施する.

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

前年度は,当初目標とされたフラボノイドイメージングの特異性と感度が十分に得られず,次の研究タスクに移行できなかったため,残額が発生した.次年度は,フラボノイドイメージングの特異性と感度をさらに上げため,検出原理の異なる他の方法についても検討したい.そのための実験の遂行に必要な化学試薬・遺伝子工学試薬・理化学消耗品等の物品費,および情報収集(学会参加)のための旅費を計上する.

  • Research Products

    (7 results)

All 2012 2011

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (1 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Gene cloning and biochemical ...2012

    • Author(s)
      Yamaguchi, H. et al.
    • Journal Title

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      Volume: 111 Pages: 522-527

    • DOI

      doi:10.1016/j.jbiosci.2010.12.021

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Quantitative analyses of the behavior of ...2012

    • Author(s)
      Suematsu, T. et al.
    • Journal Title

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      Volume: 印刷中 Pages: 頁未定

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Catalytic removal of acetaldehyde in saliva ...2012

    • Author(s)
      Yamaguchi, H. et al.
    • Journal Title

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      Volume: 印刷中 Pages: 頁未定

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 平行進化する基質特異性2012

    • Author(s)
      小埜栄一郎,堀川 学,中山 亨
    • Journal Title

      化学と生物

      Volume: 50 Pages: 16-22

  • [Journal Article] 植物フラボノイドグリコシルトランスフェラーゼ:分子系統学と特異性発現機構2012

    • Author(s)
      中山 亨,堀川 学,小埜栄一郎
    • Journal Title

      酵素工学ニュース

      Volume: 印刷中 Pages: 頁未定

  • [Presentation] ダイズのイソフラボングルコシルトランスフェラーゼの触媒機能とタンパク質間相互作用2012

    • Author(s)
      中山 亨
    • Organizer
      日本農芸化学会大会2012(招待講演)
    • Place of Presentation
      京都女子大学
    • Year and Date
      2012年3月25日
  • [Book] 植物の分子育種学2011

    • Author(s)
      鈴木正彦 編著 中山 亨他22名 共著
    • Total Pages
      p. 22 - p. 32
    • Publisher
      講談社

URL: 

Published: 2013-07-10  

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