2012 Fiscal Year Annual Research Report
分子進化工学手法を駆使した毒素中和型アルブミンによるハイブリッド血液浄化法の開発
| Project/Area Number |
23659088
|
|---|
| Research Institution | Sojo University |
|---|
Principal Investigator |
小田切 優樹 崇城大学, 薬学部, 教授 (80120145)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
丸山 徹 熊本大学, 薬学部, 教授 (90423657)
渡邊 博志 熊本大学, 薬学部, 准教授 (70398220)
|
|---|
| Keywords | アルブミン / 血液浄化法 / 分子進化工学 / 毒性中和 / ハイブリッド |
|---|
| Research Abstract |
本研究は、我々がヒト血清アルブミン(HSA)用に改良したファージ表面提示方法を駆使して、病原毒素に対して優れた結合能を有するHSA変異体を創製するとともに、低分子毒素中和（不活性）型HSAはアルブミン透析へ、アミロイド中和型HSAの場合はカラム吸着療法へと応用することで、毒素の体外除去を促進することが可能な革新的血液浄化法の開発を目的として実施した。
平成24年度は平成23年度の成果に基づき検討して以下の知見を得た。
<1)HSA変異体と標的毒素の結合性評価> HSA変異体と各種標的毒素との結合性を表面プラズモン共鳴法（Biacore）、等温滴定型熱量計（ITC）により評価し、結合パラメータ（結合サイト数、結合定数）を算出した。さらに、両者の結合を我々と研究支援者であるCurry博士が開発したドッキングシミュレーションにより確認した。なお、各種毒素に対して5～10倍以上の親和性を有するHSA変異体を見出すことができた。
<2)アルブミン透析による低分子毒素の除去効率の評価> 低分子毒素の場合、in vitro 透析装置の血漿側と透析液側に、野生型HSA と 1)で選別されたHSA変異体をそれぞれ存在させ、標的毒素を単独あるいは複数組み合わせて血漿側に添加し、閉鎖系のアルブミン透析を施行した後、毒素の除去効率を見積もり、両HSAの結果を比較して有用性を評価した。
<3)小動物を対象としたアルブミン透析による低分子毒素の除去能評価> 肝疾患毒素に対しては高ビリルビン血症ラットを用いてin vivoアルブミン透析を行い、野生型 HAS と毒素中和型HASの除去効率を算出し、両者を比較検討することで有効性を評価した。
|
-
[Journal Article] S-nitrosated α-1-acid glycoprotein kills drug-resistant bacteria and aids survival in sepsis.2013
Author(s)
Watanabe K, Ishima Y, Akaike T, Sawa T, Kuroda T, Ogaw a W, Watanabe H, Suenaga A, Kai T, Otagiri M, Maruyama T.
-
Journal Title
FASEB J.
Volume: 27
Pages: 391-8
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
[Journal Article] A human serum albumin–thioredoxin fusion protein prevents experimental contrast-induced nephropathy.2013
Author(s)
Kodama A, Watanabe H, Tanaka R, Tanaka H, Chuang VT, Miyamoto Y, Wu Q, Endo M, Hamasaki K, Ishima Y, Fukagawa M, Otagiri M, and Maruyama T.
-
Journal Title
Kidney Int.
Volume: 83
Pages: 446-54
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] A uremic toxin, 3-carboxy-4-methyl-5-propyl-2-furanpropionate induces cell damage to proximal tubular cells via the generation of a radical intermediate.2012
Author(s)
Miyamoto Y, Iwao Y, Mera K, Watanabe H, Kadowaki D, Ishima Y, Chuang VT, Sato K, Otagiri M, Maruyama T.
-
Journal Title
Biochem Pharmacol.
Volume: 84
Pages: 1207-14
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] S-guanylation of human serum albumin is a unique posttranslational modification and results in a novel class of antibacterial agents.2012
Author(s)
Ishima Y, Hoshino H, Shinagawa T, Watanabe K, Akaike T, Sawa T, Kragh -Hansen U, Kai T, Watanabe H, Maruyama T, Otagiri M.
-
Journal Title
J Pharm Sci.
Volume: 101
Pages: 3222-9
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Characterization of the hepatic cellular uptake of α(1) -acid glycoprotein (AGP), part 1: a peptide moiety of human AGP is recognized by the hemoglobin β-chain on mouse liver parenchymal cells.2012
Author(s)
Nishi K, Komori H, Kikuchi M, Uehara N, Fukunaga N, Matsumoto K, Watanabe H, Nakajou K, Misumi S, Suenaga A, Maruyama T, Otagiri M.
-
Journal Title
J Pharm Sci.
Volume: 101
Pages: 1599-606
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
[Journal Article] Interaction between two sulfate-conjugated uremic toxins, p-cresyl sulfate and indoxyl sulfate, during binding with human serum albumin.2012
Author(s)
Watanabe H, Noguchi T, Miyamoto Y, Kadowaki D, Kotani S, Nakajima M, Miyamura S, Ishima Y, Otagiri M, Maruyama T
-
Journal Title
Drug Metab Dispos.
Volume: 40
Pages: 1423-8
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
[Journal Article] Liposome-encapsulated hemoglobin (hemoglobin-vesicle) is not transferred from mother to fetus at the late stage of pregnancy in the rat model.2012
Author(s)
Kaga M, Li H, Ohta H, Taguchi K, Ogaki S, Izumi H, Inagaki M, Tsuchiya S, Okamura K, Otagiri M, Sakai H, and Yaegashi N.
-
Journal Title
Life Sci.
Volume: 91
Pages: 420-8
DOI
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] Effect of acetaminophen on the progression of renal damage in adenine induced renal failure model rats.2012
Author(s)
Kadowaki D, Sumikawa S, Arimizu K, Taguchi K, Kitamura K, Ishitsuka Y, Narita Y, Irie T, Chuang VT, Maruyama T, Otagiri M, and Hirata S.
-
Journal Title
Life Sci.
Volume: 91
Pages: 1304-8
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
