2011 Fiscal Year Research-status Report
表面プラズモン共鳴を応用したデング出血熱重症化予測バイオマーカーの測定法の開発
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23659508
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
安波 道郎 長崎大学, 熱帯医学研究所, 教授 (80244127)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2013-03-31
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| Keywords | 感染症 / 重症化予測 / バイオマーカー / デング出血熱 / 免疫測定 |
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| Research Abstract |
本研究課題では、適切な治療を施さなければ致死的な転帰をもとりうるデング出血熱の発症を事前に予測する方法を確立することを目的とし、病態形成への関与が想定されるいくつかの血漿中生体物質を重症化事前予測バイオマーカーの候補として、ポータブル表面プラズモン共鳴(SPR)測定装置を用いた免疫測定による迅速かつ定量的測定法の検討を計画した。以下交付申請書の研究実施計画に沿って研究実績を報告する。「[1]バイオマーカーの選択・[2]SPRによる測定系の確立」まず、市販ポータブルSPR測定機の基本性能を比較した。オプトクエスト社製SPR01は価格・操作性・測定感度において適切と考えられ、これを選定して購入した。機器性能評価を兼ねて、重症デング出血熱の早期バイオマーカーの候補として、炎症時に誘導されるたんぱく質IP10を選定し、二種類の異なる抗体(抗ヒトIP10マウスモノクローナル抗体4D5および6D4)を用いたサンドウィッチ法による測定系を設計し、リコンビナントヒトIP10を用いて検出感度を測定した。測定に要する時間は検体あたり数分であり、ベッドサイドで重症度診断の"point-of-care"試験に適用可能と考えられた。「[3]臨床検体の収集」ベトナム社会主義共和国ホーチミン市で小児例の収集を計画した。国外共同研究者、ホーチミン市パスツール研究所、Vu TQ Huong博士、Nguyen TP Lan博士の協力のもとに現地の医療機関の選定を行なった。検体採取については準備に時間と綿密な打ち合わせを要し、現地へ赴く予定にしている次年度に開始することとした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
「[1]バイオマーカーの選択」は、先行研究および文献検索により選定済みであり、検出抗体の選定も一部を除き完了している。「[2]SPRによる測定系の確立」は、バイオマーカーの候補の一つ(IP10)について基本的な測定技術を確立でき、すでに選定済みのその他のバイオマーカーについても、検出抗体を調達でき次第、測定可能な状況とした。「[3]臨床検体の収集」は、十分に質の高い試料を採取するには準備段階で相当綿密な打ち合わせを要しており、年度内の開始はできなかったが、次年度の早期に現地に赴き進めることとした。
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| Strategy for Future Research Activity |
2年度目の早期に、予定しているバイオマーカー候補のすべてについて測定系を確立し（上記[1] [2]）、感染流行地現地での検体収集を行なう（[3]）とともに、当初の計画に沿って現地の共同研究者の研究施設・臨床現場のスタッフを対象として測定技術を移転して（研究実施計画「[4]測定技術の移転」）、実際の収集検体の測定を進め（同「[5] 臨床検体の測定」）、バイオマーカーの診断的有用性を検証する。本研究の成果は、学術的には疾患成立機序理解の一助となるだけでなく、医療への応用面では稀少な医療資源を高リスク患者に重点的に配分する治療プログラムを策定することで熱帯地域における疾病の社会的負荷の軽減に貢献する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
次年度は当初の計画通りに、測定系確立のための消耗品購入、ベトナムへ赴いて共同研究を実施するための旅費、および臨床検体収集・臨床データ収集に要する諸経費を支出する計画である。
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[Journal Article] Association of mast cell-derived VEGF and proteases in Dengue shock syndrome.2012
Author(s)
Furuta T, Murao LA, Lan NT, Huy NT, Huong VT, Thuy TT, Tham VD, Nga CT, Ha TT, Ohmoto Y, Kikuchi M, Morita K, Yasunami M, Hirayama K, Watanabe N.
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Journal Title
PLoS Negl Trop Dis.
Volume: 6
Pages: e1505
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Elevated levels of cell-free circulating DNA in patients with acute dengue virus infection.2011
Author(s)
Ha TT, Huy NT, Murao LA, Lan NT, Thuy TT, Tuan HM, Nga CT, Tuong VV, Dat TV, Kikuchi M, Yasunami M, Morita K, Huong VT, Hirayama K.
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Journal Title
PLoS One
Volume: 6
Pages: e25969
DOI
Peer Reviewed
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