2011 Fiscal Year Research-status Report
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23659712
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
今井 祐記 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 特任講師 (10423873)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2013-03-31
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| Keywords | 骨細胞 / エピゲノム |
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| Research Abstract |
複数の骨芽細胞系細胞株をアスコルビン酸およびβグリセロリン酸含有骨芽細胞分化培地にて培養し、経時的に細胞を回収。マーカー遺伝子の発現にて、後期骨芽細胞分化が進んでいるものの骨細胞特異的遺伝子の発現が認められない事を確認した。このように後期骨芽細胞分化させた状態で、骨細胞特異的遺伝子の転写開始点（Transcriptional Start Site:TSS）領域における転写活性化および抑制化の指標であるヒストン修飾（H3K4me3およびH3K27me3）のクロマチン免疫沈降反応（ChIP）を行い、骨細胞特異的遺伝子であるSost (Sclerostin)のTSSにおけるヒストンメチル化修飾を評価したところ、転写活性化および抑制化の両方の修飾が認められ、Bivalentな修飾状態であることを確認した。この結果から、後期骨芽細胞から骨細胞への分化には、抑制的ヒストン修飾であるH3K27の脱メチル化が重要である事が考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
骨芽細胞系細胞株を分化培地で培養し分化させた状態で、骨細胞特異的遺伝子の転写開始点領域におけるヒストン修飾（H3K4me3およびH3K27me3）のChIPを行い、Bivalentな修飾状態であることを確認した。
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| Strategy for Future Research Activity |
骨細胞マーカー遺伝子の発現が転写開始点においてBivalentな修飾状態で抑制されていることから、発現抑制の指標であるH3K27me3修飾が問題となる。H3K27me3の脱メチル化酵素であるJMJD3およびUTXの強制発現系により脱メチル化を確認し、骨細胞分化が進むか否かを評価する。その上で、各脱メチル化酵素の遺伝子欠損マウスを作出し、生体内における骨細胞分化を評価する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
上記の推進方策に則り、培養細胞レベルおよびマウスを用いた解析を遂行する目的で、主に試薬やマウスなどの物品購入費に使用する予定である。
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[Journal Article] JMJD5, a JmjC-domain-containing protein, negatively regulates osteoclastogenesis through facilitating NFATc1 protein degradation.2012
Author(s)
Youn MY, Yokoyama A, Fujiyama-Nakamura S, Ohtake F, Minehata KI, Yasuda H, Suzuki T, Kato S, Imai Y.
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Journal Title
J Biol Chem.
Volume: Epub
Pages: Epub
Peer Reviewed
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[Journal Article] GlcNAcylation of histone H2B facilitates its monoubiquitination2011
Author(s)
Fujiki R, Hashiba W, Sekine H, Yokoyama A, Chikanishi T, Ito S, Imai Y, Kim JH, He HH, Igarashi K, Kanno J, Ohtake F, Kitagawa H, Roeder R, Brown M, Kato S
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Journal Title
Nature
Volume: 480
Pages: 557-60
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Signal-sensing activation of a histone lysine demethylase complex2011
Author(s)
Baba A, Ohtake F, Okuno Y, Yokota K, Okada M, Imai Y, Ni M, Meyer CA, Igarashi K, Kanno J, Brown M, Kato S.
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Journal Title
Nat Cell Biol
Volume: 13
Pages: 669-76
Peer Reviewed
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