2011 Fiscal Year Research-status Report
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23792135
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| Research Institution | Matsumoto Dental University |
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Principal Investigator |
中道 裕子 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 講師 (20350829)
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| Project Period (FY) |
2011-04-28 – 2013-03-31
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| Keywords | 破骨細胞 / 破骨細胞前駆細胞 / Ryk / Wnt |
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| Research Abstract |
全身的Ryk KOマウスにおいて、破骨細胞数の減少が認められた。in vitroにて破骨細胞系列の細胞はRykを高レベルに発現することを見出した。さらに、Ryk KOマウス由来造血細胞は破骨細胞分化能が低下していた。これらの結果から、Rykシグナルは破骨細胞分化を直接促進していることが示唆された。これを、in vivoで証明するため、Cre-loxPシステムによる破骨細胞系列特異的Ryk cKOマウスの解析を行った。（i）破骨細胞前駆細胞(Ocp)および破骨細胞特異的にCreを発現するRANK-Cre KI (Knock inとRyk floxマウスの交配より得られたRANK-Cre, Rykflox/-（Ocp-Ryk cKO）マウス、および(ii) 破骨細胞 (Oc)特異的にCreを発現するCathepsine K-Cre KＩマウスとRyk floxマウスの交配より得られたCathepsine K-Cre, Rykflox/-（Oc-Ryk cKO）マウスを用いて解析した。小林（研究協力者）らが解析したOcp-Ror2 cKOマウスおよびOc-Ror2 cKOマウス（Ror2 floxマウスは神戸大 南康博教授からご供与（研究協力者））の結果を比較した。Ocp-Ryk cKOマウスおよびOc-Ryk cKOマウスについては、現時点で多数得られ、genotyping PCRにてRyk遺伝子の欠失を確認し、さらにRT-PCR法によりRyk遺伝子の転写がOcpおよびOc特異的に抑制されていることが確認された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Ocp-Ryk cKOとOc-Ryk cKOマウスの解析が順調に進んでいる。即ち、両マウスを用いたgenotyping PCRとRT-PCR解析の双方において、Ryk遺伝子の欠失および転写抑制がOcpおよびOc特異的に行われているることが確認された。マウスも順調に成長し、充分なN数が得られ、結果の再現性も得られている。
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| Strategy for Future Research Activity |
骨芽細胞(Ob)系列特異的Ryk cKO（Ob-Ryk cKO）マウスの解析を行う。Ocp-Ryk cKO、Oc-Ryk cKO、およびOb-Ryk cKOマウスの解析より、骨代謝に重要なWnt3aおよびWnt5aシグナルの下流でRykが担う部分を明確にする。さらに、in vitroにてリガンド刺激下でのRykシグナル調節機構を解析し、Ryk自身のリン酸化の有無を調べ、次にRyk相互作用因子を探索する。併行して、リン酸化アレイ解析を行い、Ryk下流のシグナルカスケードを明らかにする。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
マウスの床敷および餌に10万円、分子生物学関連試薬および器具に100万円、細胞培養関連試薬および器具に20万円使用し、合計130万円で当初の予定通りに実験を行う予定である。本申請研究の成果を第30回日本骨代謝学会（東京, 7月19～21日）にて行い、このための旅費に10万円使用予定である。
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[Journal Article] Lineage-committed osteoclast precursors circulate in blood and settle down into bone.2011
Author(s)
Muto A, Mizoguchi T, Udagawa N, Ito S, Kawahara I, Abiko Y, Arai A, Harada S, Kobayashi Y, Nakamichi Y, Penninger JM, Noguchi T, Takahashi N
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Journal Title
J Bone Miner Res
Volume: 26
Pages: 2978-2990
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Hypergravity suppresses bone resorption in ovariectomized rats.2011
Author(s)
Ikawa T, Kawaguchi A, Okabe T, Ninomiya T, Nakamichi Y, Nakamura M, Uehara S, Nakamura H, Udagawa N, Takahashi N, Nakamura H, Wakitani S
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Journal Title
Adv Space Res
Volume: 47
Pages: 1214-1224
DOI
Peer Reviewed
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