2022 Fiscal Year Annual Research Report
線維芽細胞の形質維持不全と老化が個体の生理機能と病態に与える影響の解明
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22H02848
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
榎本 篤 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (20432255)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 線維芽細胞 / 膵がん / 線維化疾患 / 老化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究代表者はこれまでに、Meflin陽性正常線維芽細胞は加齢とともに減少すること、また同細胞が疾患抑制性の形質を維持するためにビタミンAの取り込みとその核内受容体の活性が重要であることを明らかにしてきた。本研究の目的は線維芽細胞特異的にビタミンA取り込み能を欠失させた際（目的1）、あるいは老化を誘導した際（目的2）に個体に現れる病理学的変化を検証し、正常線維芽細胞の生理的意義と病態における意義を明確に示すことである。本年度は下記の実験を行い、下記の結果を得た。
1) ビタミンA輸送体Stra6遺伝子のexon 12をはさむintron領域にLoxP配列を挿入したマウスをゲノム編集の技術で作成し、これとActin-CreあるいはMeflin-CreERT2マウスと掛け合わせ、ジェノタイピングにより計画どおり上記exon12が欠失していることを確認した。膵がん細胞を移植したMeflin-CreERT2; Stra6 floxマウスにタモキシフェンを投与すると、Meflin陽性細胞でStra6が欠損することをin situ hybridization（ISH）で確認した。
2）ヒト膵がんの手術病理検体（パラフィン包埋標本）を用いた免疫組織化学によりStra6タンパク質の検出を試みた。複数の抗体を購入し、様々な条件で染色を実施したが特異的なシグナルを得られなかった。一方、RNAscopeを用いたISH法ではStra6の発現の検出が可能であり、以降の研究ではISH法を用いることに決定した。
3）Meflin-Creマウスと共同研究者から供与を受けたSOD2 floxマウスの掛け合わせを終えた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
遺伝子改変マウス（Stra6 floxマウス）の作出と現有するCre発現マウス（Actin-CreマウスおよびMeflin-CreERT2マウス）の掛け合わせは概ね順調に実施されている。これらを膵がんモデルに供する実験も開始されている。ヒト病理検体において免疫染色を用いた研究対象分子の検出条件の最適化に難渋し、これを断念したが、ISH法を用いることで解決した。
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| Strategy for Future Research Activity |
当初の研究目的と計画に沿って実施する予定である。膵がんモデルを用いた検証の結果を得てから、線維化疾患モデルの実験に移行する。
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Research Products
(10 results)
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[Journal Article] Peritoneal restoration by repurposing vitamin D inhibits ovarian cancer dissemination via blockade of the TGF-β1/thrombospondin-1 axis.2022
Author(s)
Kitami K, Yoshihara M, Tamauchi S, Sugiyama M, Koya Y, Yamakita Y, Fujimoto H, Iyoshi S, Uno K, Mogi K, Ikeda Y, Yokoi A, Yoshikawa N, Nishino K, Niimi K, Nawa A, Enomoto A, Kajiyama H.
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Journal Title
Matrix Biol.
Volume: 109
Pages: 70-90
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Pharmacologic conversion of cancer-associated fibroblasts from a protumor phenotype to an antitumor phenotype improves the sensitivity of pancreatic cancer to chemotherapeutics.2022
Author(s)
Iida T, Mizutani Y, Esaki N, Ponik SM, Burkel BM, Weng L, Kuwata K, Masamune A, Ishihara S, Haga H, Kataoka K, Mii S, Shiraki Y, Ishikawa T, Ohno E, Kawashima H, Hirooka Y, Fujishiro M, Takahashi M, Enomoto A.
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Journal Title
Oncogene
Volume: 41
Pages: 2764-2777
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Girdin Promotes Tumorigenesis and Chemoresistance in Lung Adenocarcinoma by Interacting with PKM2.2022
Author(s)
Cao F, Yang D, Tang F, Lu C, He X, Chen S, Yang Z, Gong S, Sun L, Enomoto A, Takahashi M, Weng L.
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Journal Title
Cancers
Volume: 14
Pages: 5688
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Presentation] 骨肉腫におけるMeflin陽性細胞を標的とした抗体薬物複合体の研究開発2022
Author(s)
迫田朋佳, 江崎寛季, 安藤良太, 宮井雄基, 飯田忠, 松山誠, 白木之浩, 三井伸二, 西田佳弘, 高橋雅英, 榎本篤
Organizer
第81回日本癌学会学術総会
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