2013 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子ノックアウトによりファンコニ症候群様所見を示す膜蛋白の発見とその意義の解明
Project/Area Number |
24390217
|
Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
金井 好克 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60204533)
|
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
永森 收志 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90467572)
大垣 隆一 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20467525)
|
Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
|
Keywords | 腎臓学 / 腎生理 / トランスポーター |
Research Abstract |
バイオインフォマティクスによる解析から、多数の近位尿細管管腔側輸送体と共発現変動する遺伝子を見いだし、そのノックアウトマウスを作製したところ、Fanconi症候群類似の糖、アミノ酸、尿酸の尿中排泄の顕著な上昇を示した。そのコードする蛋白TRAPは、新規膜蛋白であり、腎特異的な発現を示し、近位尿細管管腔側膜に局在していた。本研究は、網羅的解析を適用してTRAPノックアウトマウスの表現型解析を行い、TRAPにより局在が制御される管腔側輸送体群の全体像と、それらの局在をTRAPが維持する機構を明らかにすることを目的とした。野生型マウスとTRAPノックアウトマウスの近位尿細管管腔側膜を用いた網羅的比較定量プロテオミクスによって、TRAPにより発現量の影響を受ける管腔側膜輸送体と受けない輸送体の分類が完了した。TRAPの影響を受ける輸送体の一つである尿酸輸送体は、TRAPノックアウトマウスにおいて刷子縁膜上ではなく細胞内にその局在を移すことを明らかにした。一方で、他の輸送体はTRAPノックアウトマウスにおいて、膜上で分解を受けていることがわかった。これらのことから、TRAPが輸送体を安定的に近位尿細管管腔側膜上に留めている役割を持つ蛋白であることが強く示唆された。
|
Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ノックアウトマウスと野生型マウスを用いた網羅的比較定量プロテオミクスにおいて、網羅性及び定量性の高い解析データを取得することが出来た。また、TRAPの影響を受ける輸送体間においてTRAPノックアウトマウスにおける挙動の違いが明らかになることで、TRAPの生理的機能が見えてきた。ヒトにおけるTRAP変異の探索は遅れているが、TRAPと他の因子の結合様式も明らかになりつつあり、全体として研究目的の達成に着実に近付いている。
|
Strategy for Future Research Activity |
免疫沈降実験と比較定量プロテオミクスを用いて、TRAPと輸送体の結合様式の詳細を解析し、さらにTRAPの影響を受ける輸送体と受けない輸送体について網羅的定量プロテオミクスの結果から分類し、それらの輸送体の構造や性質を比較することで、TRAPの影響を受けるための要因を明らかにする。これらに加え、TRAPの機能に必要なTRAP構造を決定することで、TRAPの生理的役割の全体像を明らかにする。
|
Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
TRAPがどのように他の輸送体と物理的相互作用するかを解析するための実験を進めているが完了しなかったため、その実験に必要な物品費が多少余り、次年度使用額が生じた。 次年度使用額はTRAPと輸送体の結合様式の詳細を解析するため、前年度に引き続き、網羅的比較定量プロテオミクスや免疫沈降実験に必要な物品の購入に使用する予定である。
|
Research Products
(63 results)
-
[Journal Article] Prognostic significance of amino-acid transporter expression (LAT1, ASCT2, and xCT) in surgically resected tongue cancer2014
Author(s)
Toyoda M, Kaira K, Ohshima Y, Ishioka NS, Shino M, Sakakura K, Takayasu Y, Takahashi K, Tominaga H, Oriuchi N, Nagamori S, Kanai Y, Oyama T, Chikamatsu K
-
Journal Title
Br J Cancer
Volume: in press
Pages: in press
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] Biological significance of fluorine-18-α-methyltyrosine (FAMT) uptake on PET in patients with oesophageal cancer.2014
Author(s)
Suzuki S, Kaira K, Ohshima Y, Ishioka NS, Sohda M, Yokobori T, Miyazaki T, Oriuchi N, Tominaga H, Kanai Y, Tsukamoto N, Asao T, Tsushima Y, Higuchi T, Oyama T, Kuwano H.
-
Journal Title
Br J Cancer
Volume: Epub
Pages: Epub
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] ASC amino-acid transporter 2 (ASCT2) as a novel prognostic marker in non-small cell lung cancer2014
Author(s)
Shimizu K, Kaira K, Tomizawa Y, Sunaga N, Kawashima O, Oriuchi N, Tominaga H, Nagamori S, Kanai Y, Yamada M, Oyama T, Takeyoshi I
-
Journal Title
Br J Cancer
Volume: Epub
Pages: Epub
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] JPH203, an L-Type Amino Acid Transporter 1-Selective Compound, Induces Apoptosis of YD-38 Human Oral Cancer Cells2014
Author(s)
Yun DW, Lee SA, Park MG, Kim JS, Yu SK, Park MR, Kim SG, Oh JS, Kim CS, Kim HJ, Kim JS, Chun HS, Kanai Y, Endou H, Wempe MF, Kim do K
-
Journal Title
J Pharmacol Sci
Volume: 124
Pages: 208-217
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Cyclosporin A and its analogs inhibit hepatitis B virus entry into cultured hepatocytes through targeting a membrane transporter NTCP2014
Author(s)
Watashi K, Sluder A, Daito T, Matsunaga S, Ryo A, Nagamori S, Iwamoto M, Nakajima S, Tsukuda S, Borroto-Esoda K, Sugiyama M, Tanaka Y, Kanai Y, Kusuhara H, Mizokami M, Wakita T
-
Journal Title
Hepatology
Volume: Epub
Pages: Epub
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Down-regulation of placental mTOR, insulin/IGF-I signaling, and nutrient transporters in response to maternal nutrient restriction in the baboon2014
Author(s)
Kavitha JV, Rosario FJ, Nijland MJ, McDonald TJ, Wu G, Kanai Y, Powell TL, Nathanielsz PW, Jansson T
-
Journal Title
FASEB J
Volume: 28
Pages: 1294-1305
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] A common variant of leucine-rich repeat-containing 16A (LRRC16A) gene is associated with gout susceptibility2014
Author(s)
Sakiyama M, Matsuo H, Shimizu S, Chiba T, Nakayama A, Takada Y, Nakamura T, Takada T, Morita E, Naito M, Wakai K, Inoue H, Tatsukawa S, Sato J, Shimono K, Makino T, Satoh T, Suzuki H, Kanai Y, Hamajima N, Sakurai Y, Ichida K, Shimizu T, Shinomiya N
-
Journal Title
Hum Cell
Volume: 27
Pages: 1-4
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Annexin A4-conferred platinum resistance is mediated by the copper transporter ATP7A2014
Author(s)
Matsuzaki S, Enomoto T, Serada S, Yoshino K, Nagamori S, Morimoto A, Yokoyama T, Kim A, Kimura T, Ueda Y, Fujita M, Fujimoto M, Kanai Y, Kimura T, Naka T
-
Journal Title
Int J Cancer
Volume: 134
Pages: 1796-1809
DOI
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] Glucocorticoid mediates the transcription of OAT-PG, a kidney-specific prostaglandin transporter2014
Author(s)
Hatano R, Mukouchi H, Matsumoto Y, Kawaguchi K, Kazama I, Endo Y, Toyama H, Ejima Y, Kurosawa S, Kanai Y, Matsubara M, Asano S
-
Journal Title
Pflugers Arch
Volume: Epub
Pages: Epub
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] Clinical significance of L-type amino acid transporter 1 expression as a prognostic marker and potential of new targeting therapy in biliary tract cancer2013
Author(s)
Kaira K, Sunose Y, Ohshima Y, Ishioka NS, Arakawa K, Ogawa T, Sunaga N, Shimizu K, Tominaga H, Oriuchi N, Itoh H, Nagamori S, Kanai Y, Yamaguchi A, Segawa A, Ide M, Mori M, Oyama T, Takeyoshi I
-
Journal Title
BMC Cancer
Volume: 16
Pages: 482
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Decreased expression of a novel prostaglandin transporter, OAT-PG, facilitates renocortical PGE2 accumulation during rat pregnancy2013
Author(s)
Kazama I, Matsubara M, Kanai Y, Hatano R, Asano S, Endo Y, Toyama H, Ejima Y, Kurosawa S, Maruyama Y
-
Journal Title
Gynecol Obstet Invest
Volume: 76
Pages: 163-170
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Diagnostic usefulness of ¹⁸F-FAMT PET and L-type amino acid transporter 1 (LAT1) expression in oral squamous cell carcinoma2013
Author(s)
Nobusawa A, Kim M, Kaira K, Miyashita G, Negishi A, Oriuchi N, Higuchi T, Tsushima Y, Kanai Y, Yokoo S, Oyama T
-
Journal Title
Eur J Nucl Med Mol Imaging
Volume: 40
Pages: 1692-1700
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Common dysfunctional variants in ABCG2 are a major cause of early-onset gout2013
Author(s)
Matsuo H, Ichida K, Takada T, Nakayama A, Nakashima H, Nakamura T, Kawamura Y, Takada Y, Yamamoto K, Inoue H, Oikawa Y, Naito M, Hishida A, Wakai K, Okada C, Shimizu S, Sakiyama M, Chiba T, Ogata H, Niwa K, Hosoyamada M, Mori A, Hamajima N, Suzuki H, Kanai Y, Sakurai Y, Hosoya T, Shimizu T, Shinomiya N
-
Journal Title
Sci Rep
Volume: 3
Pages: 2014
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
[Journal Article] Biological evaluation of 3-[(18)F]fluoro-α-methyl-D-tyrosine (D-[(18)F]FAMT) as a novel amino acid tracer for positron emission tomography2013
Author(s)
Ohshima Y, Hanaoka H, Tominaga H, Kanai Y, Kaira K, Yamaguchi A, Nagamori S, Oriuchi N, Tsushima Y, Endo K, Ishioka NS
-
Journal Title
Ann Nucl Med
Volume: 27
Pages: 314-324
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] A novel cystine transporter in S3 segment of the renal proximal tubule is an “unknown-partner” of Slc3a1 (rBAT)2013
Author(s)
○Shushi Nagamori, Pattama Wiriyasermkul, Meritxell Espino Guarch, Kazuhisa Okuyama, Saya Nakagomi, Kenijiro Tadagaki, Kazuaki Takafuji, Ryuichi Ohgaki, Manuel Palacin, Yoshikatsu Kanai
Organizer
2nd HDP international symposium on Multi-Level Systems Biology
Place of Presentation
Tokyo, Japan
Year and Date
20130628-20130629
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] Transport of 4-borono-L-phenylalanine, a 10B carrier of boron neutron capture therapy, by system L amino acid transporters
Author(s)
○Printip Wongthai, Kohei Hagiwara, Yurika Miyoshi, Pattama Wiriyasermkul, Ryuichi Ohgaki, Kenjiro Tadagaki, Kenji Hamase, Shushi Nagamori, Yoshikatsu Kanai
Organizer
第124回日本薬理学会近畿部会
Place of Presentation
京都
-
-
-
[Presentation] Mechanisms of tumor cell uptake of 4-borono-phenylalanine, a 10B carrier of boron neutron capture therapy, mediated by system L amino acid transporters
Author(s)
○Printip Wongthai, Kohei Hagiwara, Yurika Miyoshi, Pattama Wiriyasermkul, Pornparn Kongpracha, Isozumi Noriyoshi, Ryuichi Ohgaki, Kenjiro Tadagaki, Kenji Hamase, Shushi Nagamori, Yoshikatsu Kanai
Organizer
第87回日本薬理学会年会
Place of Presentation
仙台
-
-