2013 Fiscal Year Annual Research Report
Ｃｄｋ６転写ファクトリーの網羅的解析による骨代謝機構の解明
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24390450
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
小笠原 徹 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (20359623)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
筑田 博隆 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (30345219)
緒方 直史 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (10361495)
阿部 雅修 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (10392333)
藤原 夕子 東京大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任助教 (50466744)
茂呂 徹 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (20302698)
川口 浩 東京大学, 医学部附属病院, 届出診療医 (40282660)
安部 貴大 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (20383250)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 骨代謝 / 細胞周期 / ノックアウトマウス / クロマチン免疫沈降法 / 再生医学 |
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| Research Abstract |
本研究ではCdk6転写ファクトリーを網羅的に解析して骨代謝制御メカニズムを解明するために、①骨系統細胞の分化過程でCdk6転写ファクトリーを構成する転写因子・転写共役因子群（以下、Cdk6結合転写因子群）を網羅的に探索し、②骨系統細胞のゲノム上においてCdk6結合転写因子群が結合する部位を網羅的に探索し、③Cdk6結合転写因子群の細胞レベル・生体レベルでの機能を検討し、④それらの結果を利用した新規骨再生治療法開発のための基礎的検討を行う。平成25年度は前年度に引き続き、Cdk6ノックアウトマウス由来および同胞野生型マウス由来の骨芽細胞を用いて、Cdk6遺伝子欠損により変動する遺伝子の網羅的解析に着手した。現在マイクロアレイの結果を解析中であり、文献検索と合わせて選択した遺伝子(S100A4やId4など)の細胞内機能解析を進めている。また、Cdk6結合転写因子群の網羅的探索を目的に、マウス由来骨芽細胞様細胞MC3T3-E1細胞を分化誘導する系を用いて、骨芽細胞内でCdk6と結合する分子を網羅的に探索している。具体的にはコントロール群と分化誘導群の細胞からタンパクを抽出して免疫沈降を行い、コントロール群と分化刺激群との間でCdk6と結合しているタンパクの違いを比較検討した。現在までに、骨芽細胞分化において重要な機能を有することが報告されている転写因子の結合パターンが変化することが明らかとなっている。今後は、これらの因子について詳細な解析を加える予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
次世代シークエンサーを用いた網羅的解析に関して、サンプル調整段階でのミス(免疫沈降時のキャリア選択ミス)によって解析が遅れているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
網羅的解析が遅れているため、スピードアップを意識しながら当初の計画通りに研究を進めるべく努力する。今後の実験進捗状況によっては研究期間の延長も考慮する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
次世代シークエンサーを用いた網羅的解析に関して、サンプル調整段階でのミス(免疫沈降時のキャリア選択ミス)によって解析が遅れている。そのため、主に当該実験に充当する予定であった研究費が次年度使用額となった。
遅れている網羅的解析に充当する。今後の実験進捗状況によっては研究期間の延長も考慮する。
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