2012 Fiscal Year Annual Research Report
E-カドヘリンのプロセシング抑制による口腔癌の浸潤・転移阻止療法に関する研究
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24390455
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Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
林堂 安貴 広島大学, 大学病院, 講師 (70243251)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡本 哲治 広島大学, 大学院・医歯薬保健学研究院, 教授 (00169153)
新谷 智章 広島大学, 大学病院, 助教 (90403518)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 口腔癌 / カドヘリン / プロセシング / 浸潤・転移 / 細胞間接着 / プラスミン / アンチプラスミン / 細胞遊走 |
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| Research Abstract |
がん治療を行う上での最大の障害は遠隔臓器への転移巣形成である.これまでに申請者らは,プラスミノーゲン/プラスミン系は口腔扁平上皮癌の蛋白分解カスケードの中心的な酵素であるとともに,E-カドヘリンを細胞間接着活性部位で切断することで,細胞間接着を抑制し細胞凝集能を低下させ,扁平上皮癌の細胞遊走を亢進していることをみいだしてきた.本申請課題は,口腔扁平上皮癌にα2-アンチプラスミン遺伝子の導入し,α2-アンチプラスミン蛋白発現を誘導させることでプラスミノーゲン/プラスミン系の機能を抑制し,従来の外科手術や放射線治療にかわる,口腔癌の転移を抑制するための新しい治療法を開発することを目的としている.
ヒト肝臓total RNAからRT-PCR法にて増幅したプラスミン阻害分子であるα2-アンチプラスミンcDNAを哺乳動物発現ベクターpCI-neoに組み込み,pCI-neo/α_2-antiplasminを作製した.pCI-neo/α_2-antiplasminを口腔扁平上皮癌細胞に導入すると,α_2-antiplasmin蛋白が高発現することが確認できた.α_2-antiplasmin遺伝子が導入された扁平上皮癌細胞は,E-カドヘリンのプロセシングが抑制され,遺伝子導入されていない扁平上皮癌細胞に比べ細胞膜上でのE-カドヘリンが高発現していることが示された.また,α_2-antiplasmin遺伝子が導入された扁平上皮癌細胞の凝集能と運動能が低下した.さらに,α_2-antiplasmin遺伝子が導入された扁平上皮癌細胞は,ヌードマウスでのin vivo増殖能が著しく抑制されていることがわかった.
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
α2-アンチプラスミン蛋白発現の誘導ためのα2-antiplasmin遺伝子が組み込まれた哺乳動物発現ベクターを作製し,これを用いて口腔扁平上皮癌細胞にαを-アンチプラスミン蛋白発現誘導を行うことができ,さらにα2-アンチプラスミン蛋白発現誘導が扁平上皮癌細胞のin vivoでの増殖を抑制することが確認できたため.
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| Strategy for Future Research Activity |
in vivoでの造腫瘍性の詳細な解析とともに,増殖に関連すると考えらる遺伝子群(Wnt,カテニン,サイクリンD1等)の探索.
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
購入物品の価格が予定した価格より低くなったため,その分を翌年度の研究費に加えた.翌年度は,α2-アンチプラスミン発現誘導が扁平上皮癌細胞のWnt/β-カテニンシグナル伝達に与える影響とα2-アンチプラスミン発現誘導による扁平上皮癌細胞の転移抑制効果を検討する予定である.
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