2014 Fiscal Year Annual Research Report
クラスリン依存性小胞輸送の制御機構解明―ノックアウトマウスの利用―
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24570159
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| Research Institution | Nara Women's University |
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Principal Investigator |
渡邊 利雄 奈良女子大学, 自然科学系, 教授 (60201208)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 小胞輸送 / Arf1 / CALM / SMAP1 / SMAP2 / CALM-AF10 / 核外排出配列NES / アルツハイマー症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
自作したノックアウトマウスを用いてArf1, CALM, SMAPの詳しい解析を行い、『真のクラスリン依存性の細胞内小胞輸送の姿』を提示することを目指し、当該年度は以下の研究を実施した。
＜ノックアウトマウスの解析＞ Arf1 KOの E3.5胚の培養での異常の有無を検討した結果を原著論文として公表した。Arf1conditional マウスの樹立を確認し、全身性に誘導した欠損胚がArf1 KO胚と同様に胎生致死であることを確認した。CALM KOマウスを用いて、CALM欠損胚と誕生直後の個体の解析から目の色の薄さを発見し、メラニンの蓄積にCALMが関与している可能性を見出した。SMAP1,SMAP2二重が胚性致死である原因を探り、E7.5日胚でアポトーシスが起きていることを発見した。
＜細胞レベルでの解析＞ Arf1conditional 欠損E12.5日胚からMEF細胞株を樹立した。CALM欠損MEF細胞を用いて、CALMが関与するエンドソームとTGN間でのCALM欠損の効果の解析を行い、取り込まれたチロシンキナーゼ型受容体の分解が阻害されていることを明らかにし原著論文として公表した。SMAP1(-/-)：SMAP2(-/-)MEF細胞では、KD実験から予想されたトレンスフェリンの取り込み低下が全く見られないことを発見した。
＜白血病キメラ遺伝子CALM-AF10の解析＞ CALM KO MEF細胞を用いて、遺伝子導入実験を行い、野生型のCALMにはレスキュー能が見られるのに、CALM-AF10, CALM-deltaNESとにはレスキュー能が見られないことを発見した。
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Research Products
(10 results)
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[Journal Article] Abrogation of protein phosphatase 6 promotes skin carcinogenesis induced by DMBA2015
Author(s)
Hayashi K, Momoi Y , Tanuma N, Kishimoto A, Ogoh H, Kato H, Suzuki M, Sakamoto Y, Inoue Y, Nomura M, Kiyonari H, Sakayori M, Fukamachi K, Kakugawa Y, Yamashita Y, Ito S, Sato I, Suzuki A, Nishio M, Suganuma M, Watanabe T, and Shima H
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Journal Title
Oncogene
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Clathrin assembly protein CALM Plays a Critical Role in KIT Signaling by Regulating Its Cellular Transport from Early to Late Endosomes in Hematopoietic Cells.2014
Author(s)
Shinya Rai, Hirokazu Tanaka*, Mai Suzuki , Honami Ogoh, Yasuhiro Taniguchi, Yasuyoshi Morita, Takahiro Shimada, Akira Tanimura, Keiko Matsui, Takafumi Yokota, Kenji Oritani, Kenji Tanabe, Toshio Watanabe, Yuzuru Kanakura, and Itaru Matsumura
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 該当しない
Pages: 0109441
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] クラスリン集合タンパク質CALM欠損が及ぼすメラニン産生への影響。2015
Author(s)
大野絹代, 増田成美, 小河穂波,住吉麻実,早川夏姫, 稲垣綾華, 大塚瑞希, 中尾知美, 鈴木麻衣, 田中宏和, 森田詠子, 酒井良明, 渡邊利雄
Organizer
第62回 日本生化学会近畿支部例会
Place of Presentation
草津、滋賀県
Year and Date
2015-05-16
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