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2014 Fiscal Year Annual Research Report

ゼブラフィッシュ胚における細胞膜透過性シグナル分子の時空間的発現と制御

Research Project

Project/Area Number 24580308
Research InstitutionNihon University

Principal Investigator

花澤 重正  日本大学, 生物資源科学部, 教授 (60060258)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 舛廣 善和  日本大学, 生物資源科学部, 講師 (00336083)
藪 健史  日本大学, 生物資源科学部, 研究員 (00551756)
今村 伸太朗  独立行政法人水産総合研究センター, その他部局等, 研究員 (80510007)
Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywordsゼブラフィッシュ / 細胞膜透過性シグナル分子 / p53 / 転写能 / 機能発現
Outline of Annual Research Achievements

ゼブラフィッシュの胚における細胞膜透過性シグナル分子の時空間的発現と制御を解析する事を目的とするため、細胞透過性タグMTM(membrane translocating motif)融合p53を構築した。腫瘍抑制遺伝子p53は様々な標的遺伝子を転写活性化させ、細胞停止・アポトーシスなど多様な生物学的活性を誘導する事が広く知られていることから、MTM-p53を実験モデルとして本研究を展開した。MTM融合p53の機能発現についてはその標的分子であるp21の転写活性誘導能から調べた。すなわち、ゼブラフィッシュ胚由来のZE細胞におけるp21の転写量をルシフェラーゼアッセイで調べたところ、MTM融合p53はp21の転写活性を誘導した。そこで、その機能がin vivoにおいても維持されているかを調べるため、p21-GFPトランスジェニックゼブラフィッシュを作成した。p21-GFPトランスジェニックゼブラフィッシュにおけるGFPの発現誘導は野生型ゼブラフィッシュ胚における内因性p21の発現誘導と一致した。この結果はp21-GFPのzp21-promoterが内因性p53に応答することを示す事から、MTM-53蛋白質p21-GFPを胚に実際に導入し、その機能発現を介してGFPが誘導されるかについて共焦点レーザー顕微鏡並びにWestern blot法を用いて検討した。GFPの発現が頭部および眼などで観察できた。この事から野生型ブラフィッシュ胚の内因性p21も同様の箇所で発現するかをWhole-mount in site hybridization法で調べた。その結果、p21の発現が頭部及び眼で観察できた。
以上、ゼブラフィッシュの胚における細胞膜透過性シグナル分子の時空間的発現と制御を解析する実験モデルを作成することができた。

  • Research Products

    (5 results)

All 2015 2014

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] Stress-induced ceramide generation and apoptosis via the phosphorylation and activation of nSMase1 by JNK signaling.2015

    • Author(s)
      Yabu T, Shiba H, Shibasaki Y, Nakanishi T, Imamura S, Touhata K, Yamashita M.
    • Journal Title

      Cell Death Differ.

      Volume: 22 Pages: 258-273

    • DOI

      10.1038/cdd.2014.128. Epub 2014 Aug 29.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Peculiarmonomericinterferongammas,IFNγrel1andIFNγrel2,inginbunacruciancarp.2014

    • Author(s)
      Y.Shibasaki,T.Yabu,K.Araki,N.Mano,H,Shiba,T.Moritomo,T. Nakanishi.
    • Journal Title

      FEBSJ.

      Volume: 281 Pages: 1046-1056

    • DOI

      10.1111/febs.12666. Epub 2013 Dec 23.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Identification of a novel fish granzyme involved in cell-mediated immunity.2014

    • Author(s)
      Matsuura Y, Yabu T, Shiba H, Moritomo T, Nakanishi T.
    • Journal Title

      Dev Comp Immunol.

      Volume: 150 Pages: 499-507

    • DOI

      0.1016/j.dci.2014.06.006. Epub 2014 Jun 23.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 膜貫通性リコンビナントGemininタンパク質は、造血幹細胞の自己複製と細胞分化を制御する新たなストラテジーを提供するだろう2014

    • Author(s)
      黒木利知、大野芳典、安永晋一郎、竹立恭子、山藤幹茂子、舛廣善和、花澤重正、大坪素秋、瀧原義宏
    • Organizer
      第37回日本分子生物学会
    • Place of Presentation
      神奈川県横浜市パシフィコ横浜
    • Year and Date
      2014-11-24 – 2014-11-27
  • [Presentation] TIPE2はTAK1を介するH.pylori CagAシグナルを負に制御する2014

    • Author(s)
      中野利沙、櫻井渉、大穗満隆、松本翔太、宮本梓、舛廣善和、花澤重正
    • Organizer
      第37回日本分子生物学会
    • Place of Presentation
      神奈川県横浜市パシフィコ横浜
    • Year and Date
      2014-11-24 – 2014-11-27

URL: 

Published: 2016-06-01  

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