イヌ口腔内悪性メラノーマに対するｍｉｃｒｏ－ＲＮＡの治療応用

2012 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24580459
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 森 崇 岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (40402218)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 酒井 洋樹 岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (40283288)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: miRNA / イヌ口腔内メラノーマ

Research Abstract

本研究の目的は、microRNA(miRNA)を用いたイヌ口腔内悪性メラノーマの新規治療法の研究基盤を確立することである。具体的な研究項目としては、1)生体に投与可能なRNase耐性人工miRNAの作成、および 2)作成した人工miRNAのin vivoにおける抗腫瘍効果の確認の2つである。平成24年度は、RNase耐性人工miR-205の作成とin-vitroにおける効果の検証、およびマウス移植腫瘍における人工miR-205の投与プロトコールの検討を計画していた。
そこで、我々はまず、ベンゼン・ピリジン（BP）を3′末端に化学修飾し、さらにパッセンジャー鎖の塩基配列を一部改変した人工miR-205を8種類合成した。これらをそれぞれヒトメラノーマ細胞に導入した結果、miR-205BP/S3が最も強い増殖抑制効果を示した。miR-205BP/S3はmiR-205-5pの標的遺伝子であるE2F1を標的としたことから、miR-205-5pの機能を有していることが示唆された。また、miR-205BP/S3はPre-miR-205-5p（Ambion）と比較してより高いRNase耐性を示し、血清中30分残存率は40-50%であった。ヒトメラノーママウス移植腫瘍内においてもmiR-205BP/S3はより安定であることが示唆された。さらに、miR-205BP/S3のマウス移植腫瘍に対する局所投与での抗腫瘍効果はPre-miR-205-5pと比較して有意に強いことが示された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成24年度の計画については、ほぼ全てについて達成しており、現在結果を投稿中である。

Strategy for Future Research Activity

今後については、当初の研究計画どおり、in vivoの効果について、主に投与経路および投与量、投与方法の至適条件について検討していく予定である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

残額はほとんど残っていないため、消耗品に対して充当する予定である。