子宮頸癌の放射線治療効果予測における病理医の早期介入：治療早期の上皮間葉移行評価

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24590406
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 谷野 美智枝 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (90360908)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 渡利 英道 北海道大学, 大学病院, 講師 (10344508) ; 田中 伸哉 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (70261287) ; 木下 留美子 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任助教 (70507582)
• Keywords: 子宮頸癌 / 放射線 / 上皮間葉移行

Research Abstract

個々の腫瘍の性質に応じた個別化診断、それに基づく分子標的治療が施行され、肺腺癌や大腸癌などに対する分子標的治療は、その高い奏功率と副作用が少ない薬剤として、患者さんのQOL及び延命に多大な役割を果たしている。一方、放射線治療においては個々の腫瘍の性質を考慮せず一律な照射が行われており多くの子宮頚癌に有効であるが、一部の癌では、治療後の耐性獲得や悪性形質への変化により早い時期での転移巣の形成などが起きること、実験レベルでは放射線照射後の上皮間葉移行(epithelial-mesenchymal transition: EMT)を介した悪性形質への転換も報告されている。
今回我々は、子宮頚癌を対象に患者検体を用いた免疫染色、細胞株を用いた遺伝子変異の解析などによる腫瘍性質の評価放射線治療効果予測、治療への積極的な貢献を目指すことを目的に昨年度に続き以下の検討を行った。４種類の子宮頸癌細胞株(Caski, C33A, SiHa, Hela)を用いて放射線照射(10Gyx1, 2Gyx10)を行いその早期（48時間後）及び再増殖期（21日後）のEMT関連蛋白の発現をreal time PCR法やwestern blotting法を用いて調べた。C33AとCaskiは照射に反応しいずれの放射線照射法においても50%以上の細胞が死に至ったが、SiHaとHelaは放射線照射抵抗性で同じ線量では50%以上の細胞が生き残った。また、C33AとCaskiの放射線照射後再増殖期の細胞ではMMP-2, 9の発現や酵素活性、運動能の亢進を認めた。また、cDNA マイクロアレイ解析結果から、C33Aでは照射早期と細胞増殖期でいずれも照射前に比較して2倍以上の遺伝子発現を認めるものが9個同定された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

細胞株を用いたin vitroの実験系では放射線感受性の細胞株と耐性の細胞株が存在し、感受性細胞でも再増殖期にはEMT関連蛋白の発現やその運動能が亢進していることがわかった。現在、EMT関連転写因子のひとつをノックダウンすることによってそれらの表現型への影響を解析中である。
免疫染色学的解析では、子宮頸癌の診断時と再発して多発転移から死亡された剖検検体が6症例集まり初診時及び再発転移時それぞれの検体に関してEMT関連蛋白の発現を中心とした蛋白発現プロファイルを検討中である。
in vivoの系での検討が未着手であり、早急に検討を進める。

Strategy for Future Research Activity

in vitroの検討と並行してin vivoの転移実験を行う。 in vitroの検討で確認されたC33Aの放射線治療後の悪性表現型を示した細胞と放射線照射を行っていないC33Aを用いて、ヌードマウスの尾静脈投与を行い肺転移の個数を評価する。免疫染色を行う対象症例を10症例程度に増やすため関連病院などへの協力を仰ぐ予定である。

Research Products

• [Journal Article] Sustained elevation of Snail promotes Glial-Mesenchymal Transition (GMT) after irradiation in malignant glioma. (2014)
  • Author(s): Mahabir R, Tanino M, Elimansuri, Wang L, Kimura T, Itoh T, Ohba Y, Nishihara H, Shirato H, Tsuda M, Tanaka S
  • Journal Title: Neuro-Oncology Volume: 16 Pages: 671-685
  • DOI: 10.1093/neuonc/not239
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] IDH1 mutation as a potential novel biomarker for distinguishing pseudoprogression from true progression in patients with glioblastoma treated with temozolomide and radiotherapy. (2013)
  • Author(s): Motegi H, Kamoshima Y, Terasaka S, Kobayashi H, Yamaguchi S, Tanino M, Murata J, Houkin K
  • Journal Title: Brain Tumor Pathol Volume: 30 Pages: 67-72
  • DOI: 10.1007/s10014-012-0109-x.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Involvement of EphA2-mediated tyrosine phosphorylation of Shp2 in Shp2-regulated activation of extracellular signal-regulated kinase. (2013)
  • Author(s): Miura K, Wakayama Y, Tanino M, Orba Y, Sawa H, Hatakeyama M, Tanaka S, Sabe H, Mochizuki N
  • Journal Title: Oncogene Volume: 32 Pages: 5292-301
  • DOI: 10.1038/onc.2012.571.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] NS1-binding protein abrogates the elevation of cell viability by the influenza A virus NS1 protein in association with CRKL. (2013)
  • Author(s): Miyazaki M, Nishihara H, Hasegawa H, Tashiro M, Wang L, Kimura T, Tanino M, Tsuda M, Tanaka S.
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun Volume: 441 Pages: 953-7
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.11.011
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Co-Overexpression of GEP100 and AMAP1 Proteins Correlates with Rapid Local Recurrence after Breast Conservative Therapy. (2013)
  • Author(s): Kinoshita R, Nam JM, Ito YM, Hatanaka KC, Hashimoto A, Handa H, Otsuka Y, Hashimoto S, Onodera Y, Hosoda M, Onodera S, Shimizu S, Tanaka S, Shirato H, Tanino M, Sabe H.
  • Journal Title: PLoS One Volume: 8 Pages: e76791
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0076791
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The Fas/FasL pathway impairs the alveolar fluid clearance in mouse lungs. (2013)
  • Author(s): Herrero R, Tanino M, Smith LS, Kajikawa O, Wong VA, Mongovin S, Matute-Bello G, Martin TR
  • Journal Title: Am J Physiol Lung Cell Mol Physio Volume: 305 Pages: L377-88
  • DOI: 10.1152/ajplung.00271.2012
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Downregulation of miRNA-31 induces taxane resistance in ovarian cancer cells through increase of receptor tyrosine kinase MET. (2013)
  • Author(s): Mitamura T, Watari H, Wang L, Kanno H, Hassan MK, Miyazaki M, Katoh Y, Kimura T, Tanino M, Nishihara H, Tanaka S, Sakuragi N
  • Journal Title: Oncogenesis Volume: 2 Pages: e40
  • DOI: 10.1038/oncsis.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Expression of CD163 prevents apoptosis through the production of granulocyte colony-stimulating factor in meningioma (2013)
  • Author(s): Kanno H, Nishihara H, Wang L, Yuzawa S, Kobayashi H, Tsuda M, Kimura T, Tanino M, Terasaka S, Tanaka S
  • Journal Title: Neuro-Oncology Volume: 15 Pages: 853-64
  • DOI: 10.1093/neuonc/not028
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Relationship between Methyl CpG binding protein 2 and JC viral proteins (2013)
  • Author(s): Takahashi K, Orba y, Kimura T, Wang L, Kohsaka S, Tsuada M, Tanino M, Nishiha H, Nagashima K, Sawa H, Tanaka S
  • Journal Title: Jpn J Infect Dis Volume: 66 Pages: 126-132
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Intracranial mass-forming lesion associated with dural thickening and hypophysitis. (2013)
  • Author(s): Kanno H, Tanino M, Watanabe K, Ozaki Y, Itoh T, Kimura T, Nishihara H, Itoh T, Narita T, Nagashima K, Tanaka S.
  • Journal Title: Neuropathology Volume: 33 Pages: 213-6
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Broad and heterogeneous vasculopathy in pulmonary fibrosis and emphysema with pulmonary hypertension (2013)
  • Author(s): Sato T, Tsujino I, Tanino M, Ohira H and Nishimura M
  • Journal Title: Respirology Case Reports Volume: 1 Pages: 10-13
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Large solid-pseudopapillary neoplasm of the pancreas with aberrant protein expression and mutation of β-catenin: a case report and literature review of the distribution of β-catenin mutation. (2013)
  • Author(s): Kobayashi T, Ozasa M, Miyashita K, Saga A, Miwa K, Saito M, Morioka M, Takeuchi M, Takenouchi N, Yabiku T, Kanno H, Yuzawa S, Tanino M, Tanaka S, Kawakami H, Asaka M, Sakamoto N
  • Journal Title: Intern Med Volume: 52 Pages: 2051-6
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Inhibition of GSH synthesis potentiates temozolomide-induced bystander effect in glioblastoma. (2013)
  • Author(s): Kohsaka S, Takahashi K, Wang L, Tanino M, Kimura T, Nishihara H, Tanaka S
  • Journal Title: Cancer Lett Volume: 331 Pages: 68-75
  • DOI: 10.1016/j.canlet.2012.12.005
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Let 7a regulates IL-6 expression in malignant mesothelioma (2013)
  • Author(s): Mishie Tanino, Shinji Kohasa, Kazuhiro Yachi, Estuji Marukawa, Masumi Tsuda, Taichi Kimura, Hiroshi Nishihara, Shinya Tanaka
  • Organizer: 第72回日本癌学会総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（横浜）
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] Let7a regulates IL-6 expression in malignant mesothelioma (2013)
  • Author(s): Tanino M, Kohasaka S, Yachi K, Tsuda M, Kimura T, Nishihara H, Tanaka S.
  • Organizer: AACR-NCI-EORTC International Conference
  • Place of Presentation: Hynes convention center (Boston, USA)
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] 術中迅速脳腫瘍診断における電解非接触撹拌技術を搭載した迅速免疫染色装置使用の有用性 (2013)
  • Author(s): 谷野美智枝、明坂詩織、石田雄介、木村太一、西原広史、田中伸哉
  • Organizer: 第102回日本病理学会総会
  • Place of Presentation: 札幌ロイトンホテル（札幌）
  • Year and Date: 20130606-20130608
• [Presentation] 術中迅速脳腫瘍診断における電解非接触撹拌技術を搭載した迅速免疫染色装置使用の有用性 (2013)
  • Author(s): 谷野美智枝、明坂詩織、石田雄介、木村太一、西原広史、田中伸哉
  • Organizer: 第31回日本脳腫瘍病理学会
  • Place of Presentation: KFC Hall （東京）
  • Year and Date: 20130524-20130525
• [Remarks] 北海道大学医学研究科 腫瘍病理学分野
  • URL: http://patho2sv.med.hokudai.ac.jp/