2013 Fiscal Year Research-status Report
オートファジー異常に着目した原発性胆汁性肝硬変の新たな解析
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24590409
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
佐々木 素子 金沢大学, 医学系, 准教授 (70225895)
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| Keywords | 病理学 / オートファジー / 細胞老化 / 生体分子 |
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| Research Abstract |
本研究では、原発性胆汁性肝硬変(PBC) における胆管細胞のオートファジー異常の発生要因と役割を明らかにして、オートファジー異常の制御による新たなPBC 治療法の分子基盤の確立をめざしている。
本年度は、肝臓病肝組織を用い、免疫組織化学的手法で、PBCと対照肝の胆管細胞におけるオートファジー異常とミトコンドリア抗原の発現の関連について、オートファジーマーカーLC3, オートファジー異常マーカー p62/SQSTM1、ミトコンドリア抗原：PDC-E2, cytochrome C oxidase (CCO)を指標に検出した。培養胆管細胞に飢餓状態などの細胞ストレスを加えてオートファジーを誘導し、さらに各種薬剤によるオートファジー機構の阻害を試み、オートファジーとミトコンドリア抗原発現の関連を検討した。また、小胞体ストレスとオートファジー異常の関連についても検討した。
その結果、PBCの胆管病変部胆管では、オートファジー異常を示すp62/SQSTMの蓄積とミトコンドリア抗原の顆粒状発現が疾患特異的に見られた。２重免疫蛍光染色では、ミトコンドリア抗原の顆粒状発現は、異常蓄積したオートファゴソーム内のミトコンドリアによることが示唆された。PBCの胆管病変では、オートファジー異常によるミトコンドリア抗原の異常発現が生じており、抗ミトコンドリア抗体(AMA)などのミトコンドリア抗原に対する自己免疫反応野発生に関与する可能性が示唆された。さらに、PBCでは、単球系細胞や形質細胞にもオートファジー異常とミトコンドリア抗原の異常発現が生じており、免疫病態形成に関与する可能性が示唆された。
また、培養細胞に胆汁酸GCDCや飽和脂肪酸を加えると小胞体ストレスが亢進すること、オートファジー、細胞老化が亢進すること、TUDCA前処理によって, 小胞体ストレスの有意な抑制が見られることが明らかとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
当初の計画通り、免疫組織化学的手法で、PBCの胆管病変部の胆管ではオートファジー異常が生じていることを明らかにした。また、当初の予定に先んじて、オートファジー異常に関連する因子として、胆汁酸GCDCや飽和脂肪酸によって生じる小胞体ストレスが関与する可能性が示唆された。
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| Strategy for Future Research Activity |
小胞体ストレスのオートファジー異常、ミトコンドリア抗原発現異常における役割を明らかにする。免疫組織化学的手法で、PBCの胆管病変部の胆管における小胞体ストレスとオートファジー異常の関連を検討する。また、胆管細胞などの培養細胞を用いた実験も行う。
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Research Products
(9 results)
