治療効果予測困難な現行のＥＧＦＲ抗体治療における新規予測検査法の開発

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24590674
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 畑中 豊 北海道大学, 大学病院, 特任講師 (30589924)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 分子標的治療 / コンパニオン診断 / 大腸癌

Outline of Annual Research Achievements

本研究は，大腸癌の抗EGFR抗体治療において未だ規定できない効果予測因子を明らかにするために，[1]抗体治療薬によって検出される標的分子の組織発現解析法を構築し，治療薬の組織結合部位の特定を行うと共に，[2]治療効果との関係性を明らかにし，[3]さらに新規の効果予測検査法を確立することを目的としており，H24～27年度では，まずセツキシマブを直接用いたEGFR検出法，そしてこれと同等の結果が得られる代替IHC法（surroCTX-EGFR検出法）の確立，さらには抗EGFR抗体薬既治療のRAS/BRAF野生型EGFR陽性大腸癌症例を用いた前向き観察研究を行い，この代替IHC法の治療効果予測性を検証した．これに加え，RAS/BRAF野生型大腸癌細胞株（SW48細胞）およびこれにKRAS（G12D）変異導入細胞株（SW48/KRAS細胞）を用いた基礎検討を行った．
本年度はこれら２細胞株を用いた網羅的遺伝子発現解析を実施し，KRAS変異により発現変動する遺伝子の探索を行った．両細胞からそれぞれトータルRNAを抽出後，サンプル作製を行い，その後アレイ解析を行った（SensationPlusおよび GeneChip Human Transcriptome Array 2.0；Affimetrix）.解析の結果，20倍以上の発現差が認められた遺伝子が12種抽出された．このうち核酸代謝関連膜結合型タンパクに着目し，フローサイトメトリー法およびIHC法によりタンパク発現を確認したところ，SW48/KRAS細胞で顕著な発現上昇が認められた．さらに三次元培養下においても高い細胞移動能を有するSW48/KRAS細胞では高発現していた．以上の検討よりKRAS変異の有無に関連したバイオマーカー候補タンパクが得られ，今後，セツキシマブの治療効果予測に有用であることが示唆された．

Research Products

• [Journal Article] Stromal Palladin Expression Is an Independent Prognostic Factor in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma (2016)
  • Author(s): Sato D, Tsuchikawa T, Mitsuhashi T, Hatanaka Y, Marukawa K, Morooka A, Nakamura T, Shichinohe T, Matsuno Y, Hirano S
  • Journal Title: PLoS One Volume: 11 Pages: -
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0152523
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Comparative genetic analysis of a rare synchronous collision tumor composed of malignant pleural mesothelioma and primary pulmonary adenocarcinoma. (2016)
  • Author(s): Naka T, Hatanaka Y, Marukawa M, Okada H, Hatanaka KC, Sakakibara-Konishi J, Oizumi S, Hida Y, Kaga K, Mitsuhashi T, Matsuno Y.
  • Journal Title: Diagn Pathol Volume: 11 Pages: -
  • DOI: 10.1186/s13000-016-0488-0
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Clinical significance of tumor-infiltrating immune cells focusing on BTLA and Cbl-b in patients with gallbladder cancer. (2015)
  • Author(s): Oguro S, Ino Y, Shimada K, Hatanaka Y, Matsuno Y, Esaki M, Nara S, Kishi Y, Kosuge T, Hiraoka N.
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: 106 Pages: 1750-1760
  • DOI: 10.1111/cas.12825
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] ZEB1 expression is associated with prognosis of intrahepatic cholangiocarcinoma. (2015)
  • Author(s): Terashita K, Chuma M, Hatanaka Y, Hatanaka K, Mitsuhashi T, Yokoo H, Ohmura T, Ishizu H, Muraoka S, Nagasaka A, Tsuji T, Yamamoto Y, Kurauchi N, Shimoyama N, Toyoda H, Kumada T, Kaneoka Y, Maeda A, Ogawa K, Natsuizaka M, Kamachi H, Kakisaka T, Kamiyama T, Taketomi A, Matsuno Y, Sakamoto N.
  • Journal Title: J Clin Pathol Volume: Epub ahead of print Pages: -
  • DOI: 10.1136/jclinpath-2015-203115
  • Peer Reviewed
• [Presentation] ドライバー遺伝子変異検査法の現状と課題：コンパニオン診断薬の開発と臨床応用 (2015)
  • Author(s): 畑中 豊，松野 吉宏
  • Organizer: 第56回 日本肺癌学会学術集会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • Year and Date: 2015-11-26 – 2015-11-28
  • Invited
• [Presentation] コンパニオン診断（CoDx）の規制と質保証 (2015)
  • Author(s): 畑中 豊，松野 吉宏
  • Organizer: 第61回 日本病理学会秋期特別総会
  • Place of Presentation: 東京大学安田講堂（東京都文京区）
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-06
  • Invited
• [Presentation] 希少症例のFFPE組織検体から出発した悪性中皮腫の新規分子診断マーカーの探索 (2015)
  • Author(s): 中 智昭，畑中 豊，菅野 宏美，畑中 佳奈子，武島 幸男，井内 康輝，三橋 智子，松野 吉宏．
  • Organizer: 第74回 日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場(愛知県名古屋市)
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [Presentation] 原発不明癌の分子標的治療の開発を目指したドライバー遺伝子変異解析． (2015)
  • Author(s): 木下 一郎，畑中 豊，本間 理央，辻 靖，坂井 和子，西尾 和人，田中 里枝，鈴木 優介，松野 吉宏，秋田 弘俊．
  • Organizer: 第13回 日本臨床腫瘍学会学術集会
  • Place of Presentation: ロイトン札幌（北海道札幌市）
  • Year and Date: 2015-07-16 – 2015-07-18