2015 Fiscal Year Annual Research Report
ヒトＥＳ／ｉＰＳ細胞由来心筋細胞の腫瘍化克服のための革新的な高純度単離技術の開発
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24591099
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
三井 薫 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 講師 (40324975)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小戝 健一郎 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (90258418)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 再生医学 / ヒトES細胞 / ヒトiPS細胞 / アデノウイルスベクター / 心筋細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
私達は、ヒトES/iPS細胞による再生医療の実現化において、克服すべき最重要課題である「腫瘍化」を克服するための技術開発を行っている。具体的には「腫瘍化原因細胞である分化誘導中の目的細胞内に残存する未分化細胞の除去」と「目的細胞の純単離」という２つのアプローチから、課題解決に向けた研究を進めた。
1)腫瘍化原因細胞の除去方法：未分化細胞等特異的プロモーターを用いて、未分化可視化／殺傷ウイルスベクターの開発を行った。細胞を可視化するための蛍光タンパク質に薬剤感受性自殺遺伝子を組み合わせ、より効果的な除去方法について検討を行った。プロモーターの種類により蛍光強度に違いは見られたが、薬剤投与による自殺遺伝子の働きは確認でき、腫瘍化原因細胞の除去について、in vitro, in vivoともに効果があることを示すことができた。
2)目的分化細胞（心筋系統細胞）の同定単離技術の確立と機能検証：
a)ヒト多能性幹細胞から心筋細胞への分化誘導系の確立：低分子化合物を組み合わせた高効率での心筋分化方法を確立し、複数のCell lineによる分化効率の違いについて検証した。
b)ACT-SC法による心筋細胞単離：発現調節ベクター[組織特異的プロモーター＋Cre遺伝子]とレポーターベクター[CAプロモーター-loxP-neo耐性遺伝子-loxP-蛍光タンパク質]の二種類のウイルスベクターを組み合わせ、経時的に分化心筋細胞の分取を行った。分化方法の改良と分取時の細胞分散法の改良により、心筋分化細胞をこれまでより多く回収することができるようになった。得られた細胞を用いて遺伝子解析を行い、心筋分化誘導に伴い、興味深い遺伝子発現変化が見られ、この遺伝子発現と細胞分化との関連性について、検討を進めている。
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Research Products
(7 results)
