2013 Fiscal Year Research-status Report
卵巣明細胞腺癌に対するｍＴＯＲ阻害剤によるＥＭＴ現象の制御とその応用
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24592536
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
恒遠 啓示 大阪医科大学, 医学部, 助教 (70388255)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 良道 大阪医科大学, 医学部, 助教 (10625502)
林 正美 大阪医科大学, 医学部, 助教 (00551748)
金村 昌徳 大阪医科大学, 医学部, 講師 (40298782)
田辺 晃子 大阪医科大学, 医学部, 講師 (70454543)
寺井 義人 大阪医科大学, 医学部, 准教授 (90278531)
山田 隆司 大阪医科大学, 医学部, 講師 (10182536)
朝日 通雄 大阪医科大学, 医学部, 教授 (10397614)
大道 正英 大阪医科大学, 医学部, 教授 (10283764)
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| Keywords | CD24 / MET / Met |
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| Research Abstract |
類内膜細胞株であるECC、Hec-1A、Hec-108を用いた。表現マーカーCD24によりフローサイトメトリーで、CD24陽性細胞とCD24陰性細胞とに分離した。シスプラチンを添加し、CD24陽性細胞cell viabilityをMTS assayで確認した。結果はCD24陽性細胞はCD24陰性細胞に比しcell viabilityは抑制が認められた。またAktの活性化を、Western blotting法で検討をした。結果はCD24陽性細胞がAktの活性化がみられた。アポトーシスが起こっているかをPRAPの発現をWestern blotting法で確認し、CD24陽性細胞はCD24陰性細胞に比しアポトーシスが少ないことがわかった。
次にMET-HGFR(hepatocyte growth factor)signalの検討をした。類内膜細胞株であるECC、Hec-1A、Hec-108を用いCD24陽性細胞とCD24陰性細胞とに分離、Met、Akt、ERK、MDR、MRPの活性をcontrol、Foretinib（Met inhivitor)、MAP inhibitor、AKT inhibiorを添加しWestern blotting法で比較し確認した。結果はCD24陽性細胞はCD24陰性細胞に比しMetが多く発現しており、ABC transporterであるMDRやMRPが多く発現していることが確認された。CD24陽性が耐性を持つ原因がMDRやMRPの発現の量にある可能性が示唆される。
efflux assayにて毒素の排出を確認したところCD24陽性細胞が多く排出をしていることも確認された。
同様にして卵巣癌株においてもCD24を介したEMT現象が認められ、治療標的となり得ることを確認している
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
卵巣癌においてもCD24発現は、EMTを引き起こし、抗癌剤耐性であることが証明され、次は既存のmTOR阻害剤による影響を確かめる段階にすすんでいるため、おおむね順調に進展していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度の実験をふまえ、明細胞卵巣癌細胞株RMG-1を用い、mTOR阻害剤によるEMT化抑制を、マウスを用いたin vivoで証明していく予定である。
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