2014 Fiscal Year Annual Research Report
神経堤由来細胞を含む間葉－上皮－間葉三層サンドイッチ培養による歯胚再生技術の構築
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24592815
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
須澤 徹夫 昭和大学, 歯学部, 講師 (60271285)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上條 竜太郎 昭和大学, 歯学部, 教授 (70233939)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 再生医学 / 神経堤由来細胞 / 組織幹細胞 / 発生・分化 / 歯胚再生 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
低侵襲にアクセス可能な「成体の神経堤由来細胞」による、歯胚再生の可能性を検討するため、神経堤に由来する細胞でGFPが恒常的に発現するP0-Cre/CAG-CAT-EGFPマウスを用い解析した。
口腔粘膜組織から単離した細胞をフローサイトメーターでGFP陽性細胞とGFP陰性細胞を分離して、それぞれの細胞の増殖能と多分化能について解析した。低付着性プレートを用いbFGFを含む無血清培地で３次元培養すると、GFP陽性細胞は培養経過と共にスフェロイド径が増大したのに対し、GFP陰性細胞ではスフェロイドの形成が認められなかった。昨年度実施したDNAマイクロアレイの結果から注目したEndothelin receptor type B (Ednrb)のリガンドであるEdn3をGFP陽性細胞のスフェロイド培養系に加えるとスフェロイド数が著しく増加したことから、細胞増殖を制御することが示唆された。多分化能を検討するため種々の培養条件で誘導すると、GFP陽性細胞はBMP-2含有の骨芽細胞分化誘導培地で強いALP活性染色とAlizarin red染色陽性を示す骨芽細胞様細胞へと分化した。一方、GFP陰性細胞はBMP-2を添加しても、ALP活性染色とAlizarin red染色共に陰性を示した。Insulin含有の脂肪細胞誘導培地で培養すると、細胞質にOil Red O染色陽性の脂肪滴を含む脂肪細胞様細胞へと誘導された。
成体口腔粘膜の神経堤由来細胞は、立体的に増殖することが可能であり、骨芽細胞様細胞や脂肪細胞様細胞など誘導できる多分化能を有していた。上皮細胞と共存培養で、歯に特有の遺伝子が神経堤由来細胞で上昇することなど更に解析する必要があるが、口腔粘膜は低侵襲に神経堤由来細胞を採取できる組織として、歯を含む硬組織再生へ応用可能なことが示唆された。
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[Journal Article] Cdc42 is critical for cartilage development during endochondral ossification.2015
Author(s)
Suzuki W, Yamada A, Aizawa R, Suzuki D, Kassai H, Harada T, Nakayama M, Nagahama R, Maki K, Takeda S, Yamamoto M, Aiba A, Baba K, Kamijo R.
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Journal Title
Endocrinology
Volume: 156
Pages: 314-322
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Porphyromonas gingivalis-derived Lysine Gingipain Enhances Osteoclast Differentiation Induced by Tumor Necrosis Factor-α and Interleukin-1β but Suppresses That by Interleukin-17A: Importance of proteolytic degradation by lysine gingipain.2014
Author(s)
Akiyama T, Miyamoto Y, Yoshimura K, Yamada A, Takami M, Suzawa T, Hoshino M, Imamura T, Akiyama C, Yasuhara R, Mishima K, Maruyama T, Kohda C, Tanaka K, Potempa J, Yasuda H, Baba K, Kamijo R.
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Journal Title
J Biol Chem.
Volume: 289
Pages: 15621-15630
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Effects of antibody to receptor activator of nuclear factor κ-B ligand on inflammation and cartilage degradation in collagen antibody-induced arthritis in mice.2014
Author(s)
Funato S, Matsunaga A, Oh K, Miyamoto Y, Yoshimura K, Tanaka J, Suzuki D, Uyama R, Suzuki H, Mishima K, Nakamura M, Namiki O, Baba K, Inagaki K, Kamijo R.
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Journal Title
J Negat Results Biomed.
Volume: 13
Pages: 18
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] 8-Nitro-guanosine 3’,5’-cyclic monophosphate mediates elongation of the growth plate cartilage in mice.2014
Author(s)
Hoshino M, Miyamoto Y, Kameko K, Yoshimura K, Suzuki D, Akaike T, Baba K, Kamijo R
Organizer
The 2014 ASCB/IFCB Meeting
Place of Presentation
Philadelphia, PE, U.S.A.
Year and Date
2014-12-06 – 2014-12-11
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