2013 Fiscal Year Research-status Report
炎症性歯周組織におけるＴｈ１７細胞に対するＩＬ－３５の影響
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24593134
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| Research Institution | Aichi Gakuin University |
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Principal Investigator |
三谷 章雄 愛知学院大学, 歯学部, 准教授 (50329611)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
菊池 毅 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (40421242)
相野 誠 愛知学院大学, 歯学部, 助教 (20572811)
石原 裕一 愛知学院大学, 歯学部, 准教授 (50261011)
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| Keywords | IL-35 / Th17 |
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| Research Abstract |
歯周病病態でのTh17関連免疫応答におけるIL-35の役割を明らかにすることを目的として、歯周病患者および健常者サンプルを用いて検討している．
平成25年度は、平成24年度に引き続き、患者および健常者の末梢血を採取し，そこからCD4+T細胞をソーティングし、Th17細胞誘導条件下で培養してきた。その培養上清中のIL-17Aタンパク質産生を調べているが、今後もサンプル数を増やすべく、26年度も継続する必要がある。
また、誘導したTh17細胞に対するリコンビナントIL-35(rIL-35)の影響を調べ、以下のような結果を得ている。
①誘導したTh17細胞にrIL-35を添加すると、48時間後の培養上清中においてIL-17産生量は添加していないコントロールに比べて有意に減少していた。②Th17誘導条件下にrIL-35を添加した場合でも同様にIL-17産生量は添加していないコントロールに比べて有意に減少していた。③上記①および②の条件でRORa, RORC, T-bet, GATA3のmRNA発現を比較したところ、IL-35添加によりRORaの有意な発現抑制を認めた。また、T-betやGATA3にはあまり影響しないという結果を得ている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
購入したrIL-35の生物活性がほとんど無いという結果が得られたため、生物活性を有するrIL-35商品を検索する必要性が出た。このことに実際かなりの時間を有した。この点は想定外であったが、弱いながらも活性を認めたリコンビナント蛋白製品を見つける事が出来たため、今後も研究を継続する事は可能であると考える。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き平成26年度では、①患者末梢血由来Th17細胞におけるIL-17発現量および産生能の解析（MACSによるTh17細胞分離後，IL-17 secretion assayおよびreal-time PCR解析を行う）(継続)、②患者および健常者の末梢血由来CD4+T細胞から誘導できたTh17細胞のIL-17産生能の解析（MACSによるCD4+T細胞分離後，Th17誘導環境下で４日間培養後、Th17細胞として回収．その後，IL-17 secretion assayを行う）(継続)、③患者末梢血由来Th17細胞に対するrIL-35の影響の解析（MACSによるTh17細胞分離後またはTh17細胞誘導時，rIL-35を添加して培養しcytokine FACSおよびIL-17 ELISAを行う）、④歯周病原性細菌によるIL-17産生T細胞ポピュレーションに及ぼすIL-35の役割の検討（MACSによるCD4+T細胞分離後，Th17誘導環境下で４日間培養後、Th17細胞として回収．その後，抗原提示細胞とPorphyromonas gingivalisあるいはAggregatibacter actinomycetemcomitansと共に培養する．rIL-35を添加し，細胞増殖活性やreal-time PCR解析（IL-17、IL-10、IL-5、IFNγ、RORγt、Foxp3、T-bet、GATA3等）、cytokine FACSを行う）、を出来るだけ急いで行い、その結果を解析し、総合的に評価・考察する計画である．
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Research Products
(16 results)
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[Journal Article] Inflammatory bone loss in experimental periodontitis induced by Aggregatibacter actinomycetemcomitans in IL-1Ra knockout mice.2014
Author(s)
Izawa A, Ishihara Y, Mizutani H, Kobayashi S, Goto H, Okabe E, Takeda H, Ozawa Y, Kamiya Y, Sugita Y, Kubo K, Kamei H, Kikuchi T, Mitani A, Hayashi J, Nishihara T, Maeda H, Noguchi T.
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Journal Title
Infect Immun
Volume: 82
Pages: 1904-1913
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Five-year clinical results for treatment of intrabony defects with EMD, guided tissue regeneration and open-flap debridement: a case series2014
Author(s)
Mitani A,Takasu H,Horibe T, Furuta H, Nagasaka T, Aino M, Fukuda M, Fujimura T, Mogi M, Noguchi T.
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Journal Title
J Periodont Res
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Antimicrobial photodynamic therapy using a diode laser with a potential new photosensitizer, indocyanine green-loaded nanospheres, may be effective for the clearance of Porphyromonas Gingivalis2013
Author(s)
Nagahara A, Mitani A, Fukuda M, Yamamoto H, Tahara K, Morita I, Ting C-C, Watanabe T, Fujimura T, Osawa K, Sato S, Takahashi S, Iwamura Y, Kuroyanagi T, Kawashima Y, Noguchi T.
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Journal Title
J Periodont Res
Volume: 48
Pages: 591-599
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Lipopolysaccharide of Aggregatibacter actinomycetemcomitans up-regulates inflammatory cytokines, prostaglandin E2 synthesis and osteoclast formation in interleukin-1 receptor antagonist-deficient mice2013
Author(s)
Mizutani H, Ishihara Y, Izawa A, Fujihara Y, Kobayashi S, Gotou H, Okabe E, Takeda H, Ozawa Y, Kamiya Y, Kamei H, Kikuchi T, Yamamoto G, Mitani A, Nishihara T, Noguchi T.
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Journal Title
J Periodont Res
Volume: 48
Pages: 748-756
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Aggregatibacter actinomycetemcomitans lipopolysaccharide stimulated epithelial cells produce interleukin-15 that regulates T cell activation2013
Author(s)
Suga T, Mitani A, Mogi M, Kikuchi T, Fujimura T, Takeda H, Hishikawa T, Yamamoto G, Hayashi J, Ishihara Y, Noguchi T.
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Journal Title
Arch Oral Biol
Volume: 58
Pages: 1541-1548
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Follicular dendritic cell-secreted protein expression is reduced in experimental periodontitis concurrently with the up-regulation of IL-17 mRNA and an increase in the RANKL/OPG mRNA ratio2013
Author(s)
Takahashi S, Fukuda M, Mitani A, Fujimura T, Iwamura Y, Sato S, Kubo T, Sugita Y, Maeda H, Shinomura T, Noguchi T.
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Journal Title
J Periodont Res
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Nd:YAG laser irradiation of the tooth root surface inhibits demineralization and root surface softening caused by minocycline application2013
Author(s)
Watanabe T, Fukuda M, Mitani A, Ting CC, Osawa K, Nagahara A, Sato S, Fujimura T, Takahashi S, Iwamura Y, Murakami T, Noguchi T.
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Journal Title
Photomed Laser Surg
Volume: 31
Pages: 571-577
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Irradiation with a low-level diode laser induces the developmental endothelial locus-1 gene and reduces pro-inflammatory cytokines in epithelial cells2013
Author(s)
Fujimura T, Mitani A, Fukuda M, Mogi M, Osawa K, Takahashi S, Aino M, Iwamura Y, Miyajima S, Yamamoto H, Noguchi T.
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Journal Title
Lasers Med Sci
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
Peer Reviewed
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[Presentation] ポケット外照射を想定したインドシアニングリーン封入ナノ粒子が半導体レーザー照射によるエネルギー吸収・温度変化に与える影響2013
Author(s)
岩村侑樹, 福田光男, 三谷章雄, 山本浩充, 西田英作, 佐藤聡太, 高橋伸行, 藤村岳樹, 岡田康佑, 河合達志, 野口俊英.
Organizer
愛知学院大学歯学会
Place of Presentation
名古屋
Year and Date
20131201-20131201
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[Presentation] ICGナノ粒子による軟組織透過エネルギー吸収の基礎的検討2013
Author(s)
岡田康佑, 福田光男, 三谷章雄, 山本浩充, 西田英作, 佐藤聡太, 高橋伸行, 藤村岳樹, 岩村侑樹, 須賀貴行, 渡辺智久, 佐々公太, 大澤数洋, 永原絢子, 河合達志, 野口俊英.
Organizer
レーザー歯学会
Place of Presentation
東京
Year and Date
20130929-20130929
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[Presentation] 垂直性骨欠損に対し GTR 法とエナメルマトリックスタンパク質を用いた歯周組織再生療法を行った症例の 5 年経過時における臨床的比較2013
Author(s)
相野誠, 三谷章雄, 高須英成, 古田英豊, 永坂太郎, 三輪晃資, 菊池毅, 川瀬仁史, 伊藤正満, 林潤一郎, 黒須康成,石原裕一, 稲垣幸司, 福田光男, 野口俊英.
Organizer
日本歯科保存学会春期学術大会
Place of Presentation
福岡
Year and Date
20130627-20130627
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