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2012 Fiscal Year Research-status Report

歯周病原性バイオフイルム構成細菌の生活環を制御する分子基盤の解明

Research Project

Project/Area Number 24593150
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

久保庭 雅恵  大阪大学, 歯学部附属病院, 講師 (00303983)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 小島 美樹  大阪大学, 歯学研究科(研究院), 助教 (20263303)
古田 信道  大阪大学, 歯学研究科(研究院), 助教 (50452446)
Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywords国際情報交換 / アメリカ合衆国 / バイオフイルム / Porphyromonas gingivalis / 歯周病 / 口腔細菌 / メタボロミクス
Research Abstract

口腔常在菌Streptococcus gordonii が有するコリスミ酸結合性酵素Cbeは、基質としてコリスミ酸を結合し、pABA(パラアミノ安息香酸)を産生する。我々はこれまでに、S. gordonii Cbe変異株において、歯周病原性菌Porphyromonas gingivalisとの混合バイオフイルム形成能が著しく低下していることを見いだした。
平成24年度は、まず、S. gordonii Cbe変異株とP. gingivalisとの混合バイオフイルム形成時に培地へpABAを添加することで、混合バイオフイルム形成能が回復することを確認した。
次に、pABAを取り込んだP. gingivalis菌体にどのような変化が生じているのかを観察するため、病原遺伝子群の発現状態を定量RT-PCRで測定し、さらにプロテオミクスおよびメタボロミクスの手法を用いてタンパク質および代謝産物の網羅的解析を実施した。その結果,1)pABA濃度依存的に線毛遺伝子fimA、mfa1の発現が亢進し、タンパク質レベルでもFimA線毛、Mfa線毛の発現量が有意に増加しているとこと、2)異種細菌間シグナル伝達物質であるオートインデューサー2の産生に関与する葉酸誘導体経路およびメチオニン代謝経路が活性化すること、3)バイオフイルムのマトリックス形成に必要な核酸糖やアミノ糖の産生量が増加していること、4)リジン、スレオニン、グルタミン以外の全てのアミノ酸が減少していること、5)スペルミジン、N8-アセチルスペルミジンなどのポリアミン類は、コントロール群では検出されるものの、pABA処理群では検出出来ないレベルまで減少していること、などが明らかとなった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究計画調書に記載した、平成24年度実施予定である、1)pABA添加によるS. gordonii Cbe変異株とP. gingivalisとの混合バイオフイルム形成回復実験、2)pABA添加によってバイオフイルムへと変化するP. gingivalis菌体のメタボローム解析、3)pABA添加によってバイオフイルムへと変化するP. gingivalis菌体のプロテオーム解析は全て完了した。

Strategy for Future Research Activity

研究計画調書に記載したとおり、平成25年度はスペルミジンに代表されるポリアミン類に焦点をあて、P. gingivalisバイオフイルムからの菌体乖離とプランクトニック化の分子メカニズムについて研究を推進する予定である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

研究を進めていく上で必要に応じて研究費を執行したため当初の見込み額と執行額は異なったが、研究計画に変更はなく、前年度の研究費も含め、当初予定通りの計画を進めていく。

  • Research Products

    (21 results)

All 2013 2012 Other

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (10 results) (of which Invited: 1 results) Book (4 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] The sinR ortholog PGN_0088 encodes a transcriptional regulator that inhibits polysaccharide synthesis in Porphyromonas gingivalis ATCC 33277 biofilms2013

    • Author(s)
      Yamamoto, R.
    • Journal Title

      PloS one

      Volume: 8 Pages: e56017

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0056017

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Identification and characterization of Porphyromonas gingivalis client proteins that bind to Streptococcus oralis glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase2013

    • Author(s)
      Maeda, K.
    • Journal Title

      Infection and immunity

      Volume: 81 Pages: 753-63

    • DOI

      10.1128/IAI.00875-12

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Involvement of a periodontal pathogen, Porphyromonas gingivalis on the pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease2012

    • Author(s)
      Yoneda, M.
    • Journal Title

      BMC gastroenterology

      Volume: 12 Pages: 該当なし

    • DOI

      10.1186/1471-230X-12-16

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Distribution and molecular characterization of Porphyromonas gulae carrying a new fimA genotype2012

    • Author(s)
      Yamasaki, Y.
    • Journal Title

      Veterinary microbiology

      Volume: 161 Pages: 196-205

    • DOI

      10.1016/j.vetmic.2012.07.026

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Insights into the virulence of oral biofilms: discoveries from proteomics2012

    • Author(s)
      Kuboniwa, M.
    • Journal Title

      Expert review of proteomics

      Volume: 9 Pages: 311-23

    • DOI

      10.1586/epr.12.16

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Identification of signaling pathways mediating cell cycle arrest and apoptosis induced by Porphyromonas gingivalis in human trophoblasts2012

    • Author(s)
      Inaba, H.
    • Journal Title

      Infection and immunity

      Volume: 80 Pages: 2847-57

    • DOI

      10.1128/IAI.00258-12

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Oral biofilm dispersion triggered by exogenous polyamines.2013

    • Author(s)
      Kuboniwa M
    • Organizer
      91st General Session & Exhibition of the International Association for Dental Research
    • Place of Presentation
      Seattle, WA, USA
    • Year and Date
      20130320-20130323
  • [Presentation] Cycle between planktonic and sessile cells: Phenotypic changes during subgingival biofilm development and disassembly2013

    • Author(s)
      Kuboniwa M
    • Organizer
      The International Symposium "Advanced Clinical Approach for the Prevention of Dental Caries and Implicated Diseases"
    • Place of Presentation
      Yogyakarta, INDONESIA
    • Year and Date
      20130117-20130118
    • Invited
  • [Presentation] Multiple pathways regulate apoptosis induced by periodontal pathogen in trophoblast.2012

    • Author(s)
      Inaba H
    • Organizer
      60th Annual Meeting of Japanese Association for Dental Research
    • Place of Presentation
      Niigata, Japan
    • Year and Date
      20121214-20121215
  • [Presentation] Porphyromonas gingivalis biofilm dispersion triggered by exogenous polyamines.2012

    • Author(s)
      Kuboniwa M
    • Organizer
      Biofilms 5
    • Place of Presentation
      Paris, France
    • Year and Date
      20121210-20121212
  • [Presentation] Evaluation of effects of polyamines on biofilm formation in Porphyromonas gingivalis by metabolomics.2012

    • Author(s)
      冨尾紋子
    • Organizer
      第64回生物工学会大会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場(神戸市)
    • Year and Date
      20121023-20121026
  • [Presentation] Porphyromonas gingivalisのAbfDはバイオフィルム形成に関与する2012

    • Author(s)
      前田和彦
    • Organizer
      第61回口腔衛生学会
    • Place of Presentation
      神奈川歯科大学(横須賀)
    • Year and Date
      20120525-20120527
  • [Presentation] テルペノイド骨格生合成阻害剤が口腔バイオフィルムに及ぼす影響

    • Author(s)
      Alghamdi AS
    • Organizer
      第23回口腔衛生学会近畿地方会
    • Place of Presentation
      滋賀県立県民交流センター ピアザ淡海(大津市)
  • [Presentation] Alteration of Streptococcus gordonii metabolomic profiles under sorbitol stress.

    • Author(s)
      Hashino E
    • Organizer
      10th International Conference of Asian Academy of Preventive Dentistry
    • Place of Presentation
      Ulaanbaatar, Mongolia
  • [Presentation] ヒト胎盤栄養膜細胞におけるP. gingivalis感染がDNA損傷シグナルに及ぼす影響

    • Author(s)
      稲葉裕明
    • Organizer
      第54回歯科基礎医学会学術大会
    • Place of Presentation
      奥羽大学(郡山市)
  • [Presentation] Effects of polyamines on single species biofilms of Porphyromonas gingivalis and Streptococcus gordonii.

    • Author(s)
      Alghamdi AS
    • Organizer
      第54回歯科基礎医学会学術大会
    • Place of Presentation
      奥羽大学(郡山市)
  • [Book] 天野敦雄,村上伸也,岡 賢二(編)歯周病を科学する Chapter3. 歯周病病因論・感染因子 1. バイオフイルムに生息する歯周病菌2012

    • Author(s)
      久保庭雅恵
    • Total Pages
      20
    • Publisher
      クインテッセンス出版
  • [Book] Chapter 10. Genotyping of periodontal anaerobic bacteria in relationship to pathogenesis. In de Filipis I, McKee ML (ed.), Molecular typing in bacterial infections.2012

    • Author(s)
      Kuboniwa M
    • Total Pages
      17
    • Publisher
      Springer, NY, U.S.A.
  • [Book] Chapter 13. Proteomics of Porphyromonas gingivalis. In Santos DM (ed.), Recent advances in Microbiology.2012

    • Author(s)
      Kuboniwa M
    • Total Pages
      14
    • Publisher
      Apple academic press, NJ, U.S.A
  • [Book] Confocal laser scanning microscopy of P. gingivalis-F. nucleatum-S. gordonii community. Image ID: 63445. In Biology image library.2012

    • Author(s)
      Kuboniwa M
    • Total Pages
      1
    • Publisher
      BioMed Central, London, U.K.
  • [Remarks] 大阪大学大学院歯学研究科 予防歯科学教室 研究活動 歯周病菌の生活環を制御する分子機構の解明

    • URL

      http://web.dent.osaka-u.ac.jp/~prevent/research03.html

URL: 

Published: 2014-07-24  

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