核内環境を忠実に模倣したクロマチン再構成ビーズによる転写制御因子同定法の確立

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24659121
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 高橋 秀尚 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (30423544)
• Keywords: 転写因子 / 転写制御因子 / HNF4 alpha

Research Abstract

ES細胞の多能性を規定する因子として発見された4つの因子が、全て転写因子であったことから、転写因子による遺伝子発現制御の重要性が再認識されている。本研究では転写因子による遺伝子発現制御の解明を目的に、さまざまな転写因子によって転写調節領域に特異的にリクルートされる転写コアクチベーターやクロマチン制御因子を、マイクロビーズに固定化したヌクレオソーム付きの転写調節領域を用いて、網羅的に同定する。肝細胞の分化に必須の転写因子HNF4alphaによって特異的にリクルートされる転写制御因子を同定するために、HNF4alpha結合配列を有する転写調節領域DNA、HNF4alphaのリコンビナントタンパク質を作製した。また、肝がん細胞株HepG2細胞の大量培養を行い、その核抽出液を精製した。転写調節領域DNAをヌクレオソームによってクロマチン化した後、マイクロビーズに固定化し、クロマチン化転写調節領域マイクロビーズを作製した。ビーズを作製後に、HNF4alphaリコンビナントタンパク質と核抽出液を用いて、HNF4alphaによって転写調節領域にリクルートされる転写制御因子の精製を行った。

Research Products

• [Journal Article] Identification of anti-Sez6l2 antibody in a patient with cerebellar ataxia and retinopathy (2014)
  • Author(s): Yaguchi H, Yabe I, Takahashi H, Okumura F, Takeuchi A, Horiuchi K, Kano T, Kanda A, Saito W, Matsumoto M, Nakayama KI, Hatakeyama S, Sasaki H
  • Journal Title: Journal of Neurology Volume: 261(1) Pages: 224-226
  • DOI: 10.1007/s00415-013-7134-5
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The TRIM-FLMN protein TRIM45 directly interacts with RACK1 and negatively regulates PKC-mediated signaling pathway. (2014)
  • Author(s): Sato T., Takahashi H., Hatakeyama S., Iguchi A. and Ariga T
  • Journal Title: Oncogene Volume: In press Pages: In press
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Med26はLittle elongation complexをリクルートすることでsmall nuclear RNA遺伝子の発現を制御する (2013)
  • Author(s): 高橋秀尚, 瀧川一学, Delnur Anwar, 柴田美音, 佐藤チエリ, 佐藤滋生, Ranjan Amol, Chris W. Seidel, 築山忠維, 渡部昌, 林正康, 大川恭行, Joan W. Conaway, Ronald C. Conaway, 畠山鎮次
  • Organizer: 第36回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 神戸ポートピアアイランド（神戸市）
  • Year and Date: 20131203-20131205
• [Presentation] Human Mediator subunit Med26 regulates the transcription of small nuclear RNA genes through the recruitment of little elongation complex. (2013)
  • Author(s): Hidehisa Takahashi, Chieri Tomomori-Sato, Shigeo Sato, Amol Ranjan, Masayasu Hayashi, Yasuyuki Ohkawa, Joan W. Conaway, Ronald C. Conaway, Shigetsugu Hatakeyama
  • Organizer: Mechanism of eukaryotic transcription, Cold spring harbor meeting
  • Place of Presentation: Cold spring harbor laboratory (USA)
  • Year and Date: 20130827-20130830
• [Remarks] 新規転写伸長制御因子Med26の機能解析
  • URL: http://www.hucc.hokudai.ac.jp/~d20505/takahashi/index.html