• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2012 Fiscal Year Research-status Report

アミノ酸飢餓応答因子GCN1L1を介したNrf2活性化機構の解析

Research Project

Project/Area Number 24659122
Research InstitutionHirosaki University

Principal Investigator

伊東 健  弘前大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10323289)

Project Period (FY) 2012-04-01 – 2013-03-31
Keywordsアミノ酸飢餓 / 酸化ストレス / Nrf2
Research Abstract

私たちはこれまでに、アミノ酸飢餓応答因子GCN1L1がNrf2と直接相互作用すること、グリオーマU373MGにおけるGCN1L1ノックダウンはNrf2の核内蓄積と標的遺伝子の発現を低下することを見出していた。そこで引き続き膀胱がん細胞T-24においても解析したところ、GCN1L1ノックダウンはジエチルマレイン酸およびt-BHQによるNrf2の細胞内蓄積を低下させた。GCN1L1は細胞種を問わずNrf2の細胞内蓄積を低下することが考えられた。さらにU373MGにおいてGCN1L1のステーブルノックダウン細胞を作成した。独立した2株のGCN1L1のステーブルノックダウン細胞においても酸化ストレスによるNrf2の細胞内蓄積が減少していることが明らかになった。
GCN1L1のNrf2活性化における役割をさらに解析するために、GCN1L1にハロタグを結合して、その細胞内局在をHeLa細胞において解析した。その結果、GCN1L1は核周囲の細胞質に強く局在していた。リボソームとの局在と一致していることが考えられた。さらに、HeLa細胞においてGCN1L1を過剰発現したところ内因性Nrf2の蓄積が増加した。また、Nrf2結合配列を有するレポーター遺伝子の解析においてもGCN1L1の過剰発現は外来性および内因性のNrf2の転写活性化能を増強した。
以上の解析から、GCN1L1はNrf2の機能を増強する働きがあることが明らかになった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

GCN1L1ノックダウンおよび過剰発現実験により、GCN1L1がNrf2活性化に果たす役割は明らかになった。そのメカニズムは不明であるものの、研究は順調に進んでいると考えられる。

Strategy for Future Research Activity

GCN1L1がNrf2活性化に果たす役割が明らかになったので、今後は、そのメカニズムに関して詳細に解析する必要がある。また、個体レベルでの解析が重要であり、ノックアウトマウスの解析を重点的に推進する。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

平成24年度に種々のがん細胞およびヒト正常アストロサイトにおいて、酸化ストレス誘導性のNrf2活性化におけるGCN1L1ノックダウンの影響を解析するはずであったが、グリオーマ細胞での酸化ストレス誘導剤を用いた解析でのGCN1L1ノックダウンの効果が小さく、実験条件の最適化、定量化に多くの時間をとられた。このため、種々のがん細胞およびヒト正常アストロサイトにおける解析は次年度に行うこととし、未使用額は主にその経費に充てることとしたい。

  • Research Products

    (8 results)

All 2013 2012

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Nrf2 activation is associated with Z-DNA formation in the human HO-1 promoter.2013

    • Author(s)
      Atsushi Maruyama
    • Journal Title

      Nucleic Acid Res

      Volume: 未定 Pages: 未定

    • DOI

      10.1093/nar/gkt243

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Carnosic acid suppresses the production of amyloid-β 1-42 by inducing the metalloprotease gene TACE/ADAM17 in SH-SY5Y human neuroblastoma cells.2013

    • Author(s)
      Pengfei Meng
    • Journal Title

      Neurosci Res

      Volume: 75 Pages: 94-102

    • DOI

      10.1016/j.neures.2012.11.007.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Keap1 is localized in neuronal and glial cytoplasmic inclusions in various neurodegenerative diseases.2013

    • Author(s)
      Kunikazu Tanji
    • Journal Title

      J Neuropathol Exp Neurol.

      Volume: 72 Pages: 18-28

    • DOI

      10.1097/NEN.0b013e31827b5713.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Nrf2 in bone marrow-derived cells positively contributes to the e advanced stage of atherosclerotic plaque formation.2013

    • Author(s)
      Nobuhiko Harada
    • Journal Title

      Free Radic Biol Med.

      Volume: 53 Pages: 2256-2262

    • DOI

      10.1016/j.freeradbiomed.2012.10.001.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Nrf2 inhibits hepatic iron accumulation and counteracts oxidative stress-induced liver injury in nutritional steatohepatitis.2013

    • Author(s)
      Kosuke Okada
    • Journal Title

      J Gastroenterol.

      Volume: 47 Pages: 924-935

    • DOI

      10.1007/s00535-012-0552-9.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] The role of ribosome interacting protein GCN1L1 in oxidative stress -mediated Nrf2 activation2012

    • Author(s)
      Ken Itoh
    • Organizer
      International symposium 2012 on Signaling Function of Reactive Oxygen Species
    • Place of Presentation
      Kyushu University Station-I for Collaboration Research (Fukuoka)
    • Year and Date
      20121217-20121217
  • [Presentation] アミノ酸飢餓応答因子GCN1L1によるNrf2活性制御機構の解析2012

    • Author(s)
      伊東健、 他
    • Organizer
      第82回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場 (福岡)
    • Year and Date
      20121214-16
  • [Presentation] Nrf2 in the bone marrow-derived cells is essential for the high-fat diet induced atherosclerotic plaque formation2012

    • Author(s)
      Ken Itoh
    • Organizer
      37th FEBS meeting
    • Place of Presentation
      Seville Conference and Exhibition Center (Seville)
    • Year and Date
      20120903-20120909

URL: 

Published: 2014-07-24  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi