2013 Fiscal Year Research-status Report
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24659337
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
石井 晃 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30252175)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
服部 秀樹 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (30107817)
小川 匡之 愛知医科大学, 医学部, 助教 (50559937)
財津 桂 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30700546)
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| Keywords | 質量分析 / タンデム質量分析 / 高速液体クロマトグラフィー / 固相抽出 / 胆汁酸 |
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| Research Abstract |
本年度は、昨年度に確立した方法論を応用し、脳卒中易発症性高血圧自然発症ラットの亜系であるSHRSP5/Dmcr (Dmcr) ラットについて、高脂肪・高コレステロール飼料（HFC）による胆汁酸組成への影響を検討した。10週令のオスのDmcr ラットにHFCないし通常のSP飼料を与え、2、8、14週後の肝臓内の胆汁酸を測定した。HFC投与後2週後では、主要な胆汁酸はコール酸(CA)で、次いで、デオキシコール酸(DCA)、ケノデオキシコール酸(CDCA)であった。その後もCA及びCDCAが主要な胆汁酸であったものの、CAとDCAは、8ないし14週後に急減し、一方でCDCAは増加傾向にあった。CA/CDCA比は、対照群では4から6程度であるのに比べ、8及び14週のHFC群では概ね1程度であった。また、対照群と違い、水溶性の胆汁酸であるウルソデオキシコール酸（UDCA）はHFC群では少なかった。また、HFC群では、胆汁酸のタウリン抱合体が対照群と比して少ないのに反し、グリシン抱合体が大きく上昇していた。HFC投与群の肝障害や線維化と、CDCA類は正の相関があり、総CA/総CDCA比は負の相関があった。これらを総合すると、HFCによる肝障害では、CDCAとグリシン抱合体が重要な影響を果たしている可能性が示唆された。
現在は、胆汁酸分析系のより高精度かつ高再現性を有する分析系の構築を進めている。本分析系では、AB Sciex社の4000QTRAP型質量分析計を使用し、LC条件も、UPLCの場合と比べて緩やかなグラジエント条件を採用して、胆汁酸のより精密な分離を試みる。現時点ではコール酸、ケノデオキシコール酸、デオキシコール酸等の主要胆汁酸の遊離体、タウリンおよびグリシン各抱合体の質量分析条件の最適化（CEおよびDP等の最適化）を完了し、メタノール移動相による分離条件を検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
昨年度に開発したUPLC-MS-MSによる方法は、5分間という短時間で21種類の胆汁酸を検出・定量できる優れた方法であった。この方法により、本年度はSHRSP5/Dmcr ラットにおける高脂肪・高コレステロール食で誘導される肝障害と胆汁酸の組成や量の変化とに相関があることが示された。これは、当該方法の有用性が明らかに示されたといえる。
しかしながら、当該方法では一部の胆汁酸において、イオンサプレッションやイオンエンハンスメントというマトリックス効果が強く観察された。また、この方法ではまだ網羅されていない胆汁酸があるため、これらの問題を改善する必要があり、胆汁酸分析系のより高精度かつ高再現性を有する分析系の構築を進めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
上に述べたように、UPLC-MS-MSを用いた検出法は、ロバストネスとスループットネスという点では非常に有利であるといえる。一方で、一部の胆汁酸ではマトリックスエフェクトが著明に観察されたことから、スループットネスを若干犠牲にしても、より分離を精密にすることが必要であると考えられ、現在さらに精度の高い測定系を構築中である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
本年度に使用する予定であった試薬の納品が遅れたため。
試薬は来年度に納入され、使用される予定である。
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[Journal Article] A Possible Role of Chenodeoxycholic Acid and Glycine-Conjugated Bile Acids in Fibrotic Steatohepatitis in a Dietary Rat Model2014
Author(s)
Xiaofang Jia, Yudai Suzuki, Hisao Naito, Husna Yetti, Kazuya Kitamori, Yumi Hayashi, Rina Kaneko, Mina Nomura, Yukio Yamori, Kei Zaitsu, Masashi Kato, Akira Ishii, Tamie Nakajima
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Journal Title
Digestive Disease Science
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Metabolism of the newly encountered designer drug α-pyrrolidinovalerophenone in humans: identification and quantitation of urinary metabolites2014
Author(s)
oriaki Shima, Munehiro Katagi, Hiroe Kamata, Shuntaro Matsuta, Keiko Sasaki, Tohru Kamata, Hiroshi Nishioka, Akihiro Miki, Michiaki Tatsuno, Kei Zaitsu, Akira Ishii, Takako Sato, Hitoshi Tsuchihashi, Koichi Suzuki.
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Journal Title
Forensic Toxicology
Volume: 32
Pages: 59-67
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Development of a simple one-pot extraction method for various drugs and metabolites of forensic interest in blood by modifying the QuEChERS method2013
Author(s)
Shuntaro Matsuta, Keiko Nakanishi, Akihiro Miki, Kei Zaitsu, Noriaki Shima, Tooru Kamata, Hiroshi Nishioka, Munehiro Katagi, Michiaki Tatsuno, Kento Tsuboi, Hitoshi Tsuchihashi, Koichi Suzuki.
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Journal Title
Forensic Science International
Volume: 232
Pages: 40-45
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Mass spectrometric differentiation of the isomers of mono-methoxyethylamphetamines and mono-methoxydimethylamphetamines by GC-EI-MS-MS.2013
Author(s)
Kei Zaitsu, Haruhiko Miyagawa, Yuki Sakamoto, Shuntaro Matsuta, Kento Tsuboi, Hiroshi Nishioka, Munehiro Katagi, Takako Sato, Michiaki Tatsuno, Hitoshi Tsuchihashi, Koichi Suzuki, Akira Ishii
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Journal Title
forensic Toxicology
Volume: 31
Pages: 292-300
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Urinary excretion and metabolism of the newly encountered designer drug 3,4-dimethylmethcathinone in humans2013
Author(s)
Noriaki Shima, Munehiro Katagi, Hiroe Kamata, Shuntaro Matsuta, Keiko Nakanishi, Kei Zaitsu, Tooru Kamata, Hiroshi Nishioka, Akihiro Miki, Michiaki Tatsuno, Takako Sato, Hitoshi. Tsuchihashi, Koichi Suzuki
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Journal Title
Forensic Toxicology
Volume: 31
Pages: 101-112
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] High-resolution mass spectrometry and accurate mass measurement of synthetic cannabinoids and their metabolites in human biological specimens by LC/Q-TOFMS2013
Author(s)
Kei Zaitsu, Takashi Yoshimoto, Toshimichi Yamamoto, Tadashi Ogawa, Hideki Hattori, Tomohiro Matsumoto, Kazuaki Hisatsune, Munehiro Katagi, Hitoshi Tsuchihashi, Akira Ishii.
Organizer
The 51 st Annual Meeting of the International Association of Forensic Toxicologists
Place of Presentation
Funchal, Portugal
Year and Date
20130830-20130904
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[Presentation] GC-MS/MSを用いたナフトイルインドール系薬物の包括的検出2013
Author(s)
宮川 治彦, 坂本 雄紀, 松田 駿太朗, 鎌田 徹, 西岡 裕, 片木 宗弘, 財津 桂, 石井 晃, 坪井 健人, 土橋 均, 鈴木 廣一
Organizer
日本法中毒学会第３２年会
Place of Presentation
さわやかちば県民プラザ、柏
Year and Date
20130705-20130706
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