エピジェネティクスリセットによる革新的ヒト肝発癌メカニズム解析

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24659593
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 関根 圭輔 横浜市立大学, 医学部, 助教 (00323569)
• Keywords: エピジェネティクス / 癌 / リプログラミング

Research Abstract

日本における最新のがん統計によると、がん罹患者は３５年前の４倍になっており、その中で、肝臓がんは2012年のがんによる死亡数が多い部位の第５位となっている。
肝細胞癌(HCC)原因遺伝子が多様であり、HCCを体系的に理解し治療へ結びつけるためには、エピジェネティック修飾に基づく発癌の理解が重要である。昨年度の解析で樹立した細胞についてリプログラミングが充分に確認できなかったことから、既存のヒト肝癌細胞株には数多くの染色体異常が報告されており、リプログラミング因子を導入後のリプログラミングに必要な因子を欠損しているか、未分化状態を維持する遺伝子が欠損している可能性が考えられた。そこで、ヒト肝癌細胞株と共に正常細胞としてヒト線維芽細胞および臍帯由来内皮細胞を用いてiPS細胞の作成を平行して実施した。昨年度より多くの肝癌細胞株を用い、HNF4の発現低下や未分化マーカーの発現上昇が観察された。しかし、線維芽細胞や臍帯由来内皮細胞を用いて作成したiPS細胞と較べると発現が低く、完全なリプログラミングは観察されなかった。一方、線維芽細胞や臍帯由来内皮細胞より樹立したiPS細胞についてはこれら細胞を用いて肝臓系列細胞へ分化誘導し、肝分化マーカー遺伝子の発現解析およびアルブミン分泌をタンパク質レベルで検出し、実験系に問題が無いことが確認された。以上の事から、より多くの肝細胞癌を対象とした研究を実施することが必要であると考えられる。また、肝癌だけでなく、遺伝子変異が明らかとなっている、膵癌や肺癌を対象とすることで、癌化にかかわるエピジェネティック修飾を明らかにする事が可能となると考えられた。

Research Products

• [Journal Article] Tropism of cancer stem cells to a specific distant organ (2014)
  • Author(s): Okuda R, Sekine K, Hisamatsu D, Ueno Y, Takebe T, Zheng YW, Taniguchi H.
  • Journal Title: In Vivo Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The CD133+CD44+ Precancerous Subpopulation of Oval Cells is a Therapeutic Target for Hepatocellular Carcinoma (2014)
  • Author(s): Zheng YW, Tsuchida T, Shimao T, Li B, Takebe T, Zhang RR, Sakurai Y, Ueno Y, Sekine K, Ishibashi N, Imajima M, Tanaka T, Taniguchi H.
  • Journal Title: Stem Cells Dev. Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Fluorescent labeling and visualization of human induced pluripotent stem cells with the use of transcription activatore like effector nucleases (2014)
  • Author(s): Sekine K, Takebe T, Taniguchi H.
  • Journal Title: Transplant Proc. Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Ring1B promotes hepatic stem/ progenitor cell expansion via simultaneous suppression of Cdkn1a and Cdkn2a. (2014)
  • Author(s): Koike H, Ueno Y, Naito T, Shiina T, Nakata S, Ouchi R, Obana Y, Sekine K, Zheng YW,Takebe T, Isono KI, Koseki H, Taniguchi H.
  • Journal Title: Hepatology Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Engineering of human hepatic tissue with functional vascular networks. (2014)
  • Author(s): Takebe T, Koike N, Sekine K, Fujiwara R, Amiya T, Zheng YW, Taniguchi H.
  • Journal Title: Organogenesis. Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Generation of a vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant. (2014)
  • Author(s): Takebe T, Zhang RR, Koike H, Kimura M, Yoshizawa E, Enomura M, Koike N, Sekine K, Taniguchi H
  • Journal Title: Nature Protocols Volume: 9 Pages: 396-409
  • DOI: doi: 10.1038/nprot.2014.020.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Vascularized and functional human liver tissue from an induced pluripotent stem cell-derived organ bud transplant. (2013)
  • Author(s): Takebe T, Sekine K, Enomura M, Koike H, Kimura M, Ogaeri T, Zhang RR, Ueno Y, Zheng YW, Koike N, Aoyama S, Adachi Y, Taniguchi H
  • Journal Title: Nature Volume: 499 Pages: 481-484
  • DOI: doi: 10.1038/nature12271.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The generation of pancreatic β-cell spheroids in a simulated microgravity culture system. (2013)
  • Author(s): Tanaka H†, Tanaka S†, Sekine K†, Kita S, Okamura A, Takebe T, Zheng YW, Ueno Y, Tanaka J and Taniguchi H. †equal contribution.
  • Journal Title: Biomaterials Volume: 34 Pages: 5785-5791
  • DOI: doi: 10.1016/j.biomaterials.2013.04.003
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Vitamin D Receptor in osteoblasts Is a negative regulator of bone mass control. (2013)
  • Author(s): Yamamoto Y, Yoshizawa T, Fukuda T, Shirode-Fukuda Y, Yu T, Sekine K, Sato T, Kawano H, Aihara KI, Nakamichi Y, Watanabe T, Shindo M, Inoue K, Inoue E, Tsuji N, Hoshino M, Karsenty G, Metzger D, Chambon P, Kato S, Imai Y.
  • Journal Title: Endocrinology. Volume: 154 Pages: 1008-1020
  • DOI: doi: 10.1210/en.2012-1542.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 膵癌幹細胞の系譜解析に向けたin vitroアッセイ系の構築 (2014)
  • Author(s): 久松大介、奥田 諒、関根圭輔、上野康晴、谷口英樹
  • Organizer: 第13回日本再生医療学会総会
  • Place of Presentation: 国立京都国際会館(京都府)
  • Year and Date: 20140304-20140306
• [Presentation] Pdx1陽性細胞は高い腫瘍形成能とスフィア形成能を有する癌幹細胞である (2013)
  • Author(s): 奥田諒、関根圭輔、孫略、坪井康次、谷口英樹
  • Organizer: 第72回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(神奈川)
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] 膵幹/前駆細胞の膵癌幹細胞への形質転換プロセスの解析 (2013)
  • Author(s): 関根圭輔、孫略、奥田諒、谷口英樹
  • Organizer: 第72回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(神奈川)
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] ヒト膵癌幹細胞における治療抵抗性機構の解析 (2013)
  • Author(s): 星野小百合、関根圭輔、孫略、中田晋、寺崎哲也、森永総一郎、宮城洋平、遠藤格、横瀬智之、倉田昌直、上野康晴、谷口英樹
  • Organizer: 第72回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(神奈川)
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] Targeted proteomic absolute quantification on transporters of human pancreatic cancer cells with gemcitabine-resistance. (2013)
  • Author(s): Ueno Y, Hoshino S, Tsuchida N, Nakata S, Uchida Y, Sekine K, Zheng YW, Kurata M, Morinaga S, Miyagi Y, Yokose T, Endo I, Terasaki T, Hirano H, Taniguchi H
  • Organizer: HUPO 12th annual world congress.
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(神奈川)
  • Year and Date: 20130914-20130918