2013 Fiscal Year Annual Research Report
卵巣がん人工多能性癌幹細胞（ｉＰＣ）の樹立と機能解析－薬剤抵抗性の観点から
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24659723
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| Research Institution | Yamagata University |
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Principal Investigator |
倉智 博久 山形大学, 医学部, 教授 (40153366)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
太田 剛 山形大学, 医学部, 助教 (50375341)
澤田 健二郎 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (00452392)
高橋 一広 山形大学, 医学部, 准教授 (20292427)
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| Keywords | 卵巣がん / 低酸素 / microRNA / ハニカム膜 / 細胞接着 / 細胞増殖 / 卵巣癌幹細胞 / 卵巣明細胞腺癌 |
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| Research Abstract |
細胞間の新たな情報伝達ツールとして、細胞放出型のエクソソームの存在に着目し、卵巣がん細胞から放出されるエクソソームが、がん細胞が腹膜に接着する際の最初の接触細胞となる腹膜中皮細胞に与える影響を解析した。卵巣癌細胞株 HeyA-8 を 150 ミリ培養皿20枚に培養し、上清約 300ml を回収、その上清を超遠心（100000xg、70分）することで高純度のエクソソームの分画を回収することができた。続いて、腹膜中皮細胞を大網の一部より初代培養し、その細胞に上述の方法で回収したエクソソームを蛍光マーカーPKH26 （Sigma）でラベルして添加したところ、蛍光の取り込みが中皮細胞でみられることが確認でき、エクソソームの伝達を確認した。さらにHeyA-8 と腹膜中皮細胞の共培養実験を行い、共培養により中皮細胞のCD44 やファイロブネクチンの発現が増強していることを確認した。CD44 はWestern Blot でエクソソームに豊富に含まれていることを確認しており、すなわち癌細胞から腹膜中皮細胞にエクソソームを介してCD44の伝達が行われている可能性があることが判明した。
ハニカム膜 (honey-comb film)とは、3D porous scaffoldとも言われ、細胞が接着、増殖していく上での足場となる。この膜を用いて、卵巣癌細胞の接着、増殖が抑制されるか否かを検討した。臨床的に応用可能で伸縮性に優れた polyurethane (PU)素材を用いてハニカム膜を作成し、3種類の卵巣癌細胞株(SKOV3, Caov3, TOV21G)をハニカム膜上で培養したところ、コントロール膜に比較して粘液性腺癌由来であるCaov3細胞と明細胞腺癌由来であるTOV21G細胞で細胞増殖抑制効果を認めた。接着に関する抑制効果はハニカム膜で認めなかった。今後は増殖が抑制された細胞からどのようなエクソソームが分泌されるか検討予定である。
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[Journal Article] MiR-92a inhibits peritoneal dissemination of ovarian cancer cells by inhibiting integrin α5 expression.2013
Author(s)
Ohyagi-Hara C, Sawada K, Kamiura S, Tomita Y, Isobe A, Hashimoto K, Kinose Y, Mabuchi S, Hisamatsu T, Takahashi T, Kumasawa K, Nagata S, Morishige K-I, Lengyel E, Kurachi H, Kimura T.
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Journal Title
Am J Pathol
Volume: 182
Pages: 1876-1889
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Potential role of mTORC2 as a therapeutic target in clear cell carcinoma of the ovary.2013
Author(s)
Hisamatsu T, Mabuchi S, Matsumoto Y, Kawano M, Sasano T, Takahashi R, Sawada K, Ito K, Kurachi H, Schilder RJ, Testa JR, Kimura T.
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Journal Title
Mol Cancer Ther
Volume: 12
Pages: 1367-1377
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Investigation of the clinicopathological features of fallopian tube malignancy.2013
Author(s)
Yokoyama Y, Futagami M, Fujimoto T, Terada Y, Takatori E, Sugiyama T, Otsuki T, Yaegashi N, Kojimahara T, Kurachi H, Nishiyama H, Fujimori K, Tase T, Mizunuma H.
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Journal Title
Oncol Rep
Volume: 30
Pages: 79-84
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Yolk sac tumor of the ovary: a retrospective multicenter study of 33 japanese women by tohoku gynecologic cancer unit (TGCU).2013
Author(s)
Kojimahara T, Nakahara K, Takano T, Yaegashi N, Nishiyama H, Fujimori K, Sato N, Terada Y, Tase T, Yokoyama Y, Mizunuma H, Shoji T, Sugiyama T, Kurachi H.
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Journal Title
Tohoku J Exp Med.
Volume: 230
Pages: 211-217
DOI
Peer Reviewed
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