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2015 Fiscal Year Annual Research Report

生体顕微マルチスケールマッピング:高圧凍結技法の高度化と広域超微形態解析法の開発

Research Project

Project/Area Number 24687007
Research InstitutionInstitute of Physical and Chemical Research

Principal Investigator

豊岡 公徳  国立研究開発法人理化学研究所, 環境資源科学研究センター, 上級研究員 (10360596)

Project Period (FY) 2012-04-01 – 2016-03-31
Keywords電子顕微鏡 / オルガネラ / マッピング / 電子地図 / 高圧凍結技法
Outline of Annual Research Achievements

バイオイメージングの発展により、組織や細胞におけるオルガネラの動態を容易に観察できるようになった。その一方で、透過電子顕微鏡(TEM)観察がほとんど行われなくなったため、オルガネラの超微形態は不明瞭な状態である。本研究では、モデル植物を用いて、1、試料を瞬時に固定する高圧凍結技法を改良・高度化し、動的オルガネラを含む高解像度で広域のTEM像を撮影し電算機上に再構築する基盤技術と、2、マルチスケール性を維持した高解像度TEM像上の細胞内構造物に位置情報を自動記録する基盤技術を開発し、組織・細胞におけるオルガネラの超微形態と分布、関連情報を閲覧可能なTEM像のマッピングシステムを構築する。そして、これら基盤技術を用いて、3、発生過程と環境刺激前後の細胞とオルガネラの超微形態を明らかにし、分化発生機構を解明する。今年度は3を中心に技術開発を行った。構築した広域TEM像の自動撮影システムを用いて、シロイヌナズナの根端など様々な器官及び植物培養細胞のギガピクセルクラスの広域TEM像を取得した。この広域TEMデータを用いて情報工学の専門家とともに自動認識ソフトウェアの開発し、論文にまとめ国際雑誌に発表した。さらに、タバコ培養細胞の増殖期・定常状態期の広域TEM像を用いて、定常状態期にはミトコンドリアとペルオキシソームの数は減少するがプラスチドの数は減少しないことがわかり、学会発表を行うとともに論文にまとめ国際雑誌に掲載された。また、シロイヌナズナ根端における小胞体から発生するER bodyに焦点をあて解析し、学会発表を行った。さらに、様々な植物組織の広域TEM像を拡大縮小してWebブラウザ上に標示できるウェブサイト”電顕アトラス”を構築し、共同研究者に公開した。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

27年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (20 results)

All 2016 2015 Other

All Journal Article (11 results) (of which Peer Reviewed: 9 results,  Open Access: 4 results) Presentation (8 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results,  Invited: 2 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Cell wall accumulation of fluorescent proteins derived from a trans-Golgi cisternal membrane marker and paramural bodies in interdigitated Arabidopsis leaf epidermal cells2016

    • Author(s)
      Akita K, Kobayashi M, Sato M, Kutsuna N, Ueda T, Toyooka K, Nagata N, Hasezawa S, Higaki T
    • Journal Title

      Protoplasma

      Volume: - Pages: -

    • DOI

      10.1007/s00709-016-0955-1

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Haustorial Hairs Are Specialized Root Hairs That Support Parasitism in the Facultative Parasitic Plant Phtheirospermum japonicum2016

    • Author(s)
      Cui S, Wakatake T, Hashimoto K, Saucet SB, Toyooka K, Yoshida S, Shirasu K
    • Journal Title

      Plant Physiol.

      Volume: 170 Pages: 1492-1503

    • DOI

      10.1104/pp.15.01786

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Deficiency of Starch Synthase IIIa and IVb Alters Starch Granule Morphology from Polyhedral to Spherical in Rice Endosperm2016

    • Author(s)
      Toyosawa Y, Kawagoe Y, Matsushima R, Crofts N, Ogawa M, Fukuda M, Kumamaru T, Okazaki Y, Kusano M, Saito K, Toyooka K, Sato M, Ai Y, Jane JL, Nakamura Y, Fujita N
    • Journal Title

      Plant Physiol.

      Volume: 170 Pages: 1255-1270

    • DOI

      10.1104/pp.15.01232

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Morphological and quantitative changes in mitochondria, plastids, and peroxisomes during the log-to-stationary transition of the growth phase in cultured tobacco BY-2 cells2016

    • Author(s)
      K. Toyooka, M. Sato, M. Wakazaki, K. Matsuoka
    • Journal Title

      Plant Signaling & Behavior

      Volume: 11 Pages: e1149669

    • DOI

      10.1080/15592324.2016.1149669

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] 光-電子相関顕微鏡法: 蛍光タンパク質標識した細胞小器官を走査電子顕微鏡で捉える2016

    • Author(s)
      豊岡 公徳
    • Journal Title

      日本植物形態学会誌 Plant Morphology

      Volume: - Pages: -

  • [Journal Article] SNAC-As, stress-responsive NAC transcription factors, mediate ABA-inducible leaf senescence2015

    • Author(s)
      Takasaki H, Maruyama K, Takahashi F, Fujita M, Yoshida T, Nakashima K, Myouga F, Toyooka K, Yamaguchi-Shinozaki K, Shinozaki K
    • Journal Title

      Plant J.

      Volume: 84 Pages: 1114-1123

    • DOI

      10.1111/tpj.13067

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Th17 Cell Induction by Adhesion of Microbes to Intestinal Epithelial Cells2015

    • Author(s)
      Atarashi K, Tanoue T, Ando M, Kamada N, Nagano Y, Narushima S, Suda W, Imaoka A, Setoyama H, Nagamori T, Ishikawa E, Shima T, Hara T, Kado S, Jinnohara T, Ohno H, Kondo T, Toyooka K, (11 authors), Umesaki Y, Honda K
    • Journal Title

      Cell

      Volume: 163 Pages: 367-380

    • DOI

      10.1016/j.cell.2015.08.058

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Determination of growth stages and metabolic profiles in Brachypodium distachyon for comparison of developmental context with Triticeae crops2015

    • Author(s)
      Onda,Y. Hashimoto,K. Yoshida,T. Sakurai,T. Sawada,Y. Hirai,Y.M. Toyooka,K. Mochida,K. and Shinozaki,K
    • Journal Title

      Proceedings of the Royal Society B

      Volume: 282 Pages: 20150964

    • DOI

      10.1098/rspb.2015.0964

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Semi-automatic organelle detection on transmission electroln microscopic images2015

    • Author(s)
      T. Higaki, N. Kutsuna, K. Akita, M. Sato, F. Sawaki, M. Kobayashi, N. Nagata, K. Toyooka, S. Hasezawa
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 5 Pages: 7794

    • DOI

      10.1038/srep07794

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] RECG Maintains Plastid and Mitochondrial Genome Stability by Suppressing Extensive Recombination between Short Dispersed Repeats2015

    • Author(s)
      Odahara, M., Masuda, Y., Sato,M., Wakazaki, M., Harada,C., Toyooka,K., Sekine,Y
    • Journal Title

      PLOS Genetics

      Volume: 11 Pages: e1005080

    • DOI

      10.1371/journal.pgen.1005080

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] 高圧凍結技法を用いた細胞内小胞輸送経路の解明2015

    • Author(s)
      豊岡 公徳
    • Journal Title

      医生電顕技術誌

      Volume: 28 Pages: 62-63

  • [Presentation] 小胞体から液胞への KDELタンパク 質の大量輸送に ER ボディが関与する ~ギガピクセル TEM 像を用いて~2016

    • Author(s)
      橋本恵,成川苗子,若崎眞由美,佐藤 繭子,永田典子,岡本龍史,豊岡公徳
    • Organizer
      第 57 回 日本植物生理学会年会
    • Place of Presentation
      岩手大学
    • Year and Date
      2016-03-18 – 2016-03-20
  • [Presentation] 光顕と電顕で植物の成長を担うタンパク質の輸送・分解機構を明らかにする2015

    • Author(s)
      豊岡公徳
    • Organizer
      日本女子大バイオイメージングセンターシンポジウム2015
    • Place of Presentation
      日本女子大目白キャンパス
    • Year and Date
      2015-12-05
    • Invited
  • [Presentation] The ER body in the lateral root cap is involved in mass transport of (K/H)DEL proteins to the vacuole: Using Gigapixel TEM images2015

    • Author(s)
      Kiminori Toyooka, Kei Hashimoto, Naeko Narikawa, Mayumi Wakazaki, Mayuko Sato, Noriko Nagata, Takashi Okamoto
    • Organizer
      The 2nd EastAsia Microscopy Conference (EAMC2)
    • Place of Presentation
      Himeji
    • Year and Date
      2015-11-24 – 2015-11-27
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Ultrastructural analysis of the ER bodies in the Arabidopsis root tip cells: Using Gigapixel images2015

    • Author(s)
      Kiminori Toyooka, Kei Hashimoto, Naeko Narikawa, Mayumi Wakazaki, Mayuko Sato, Noriko Nagata, Takashi Okamoto
    • Organizer
      International microscopy workshop on plant sciences 2015
    • Place of Presentation
      Himeji
    • Year and Date
      2015-11-24
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 光-電子相関顕微鏡法:蛍光タンパク質標識した細胞小器官を走査電子顕微鏡で捉える2015

    • Author(s)
      豊岡公徳
    • Organizer
      日本植物学会 第 79回大会
    • Place of Presentation
      新潟朱鷺メッセ
    • Year and Date
      2015-09-05 – 2015-09-07
  • [Presentation] 電顕アトラスの構築と活用2015

    • Author(s)
      豊岡公徳,佐藤繭子,若崎眞由美, 橋本恵, 小林恵, 澤木史江, 朽名夏麿,永田典子
    • Organizer
      日本植物形態学会第 27 回総会・大会
    • Place of Presentation
      新潟
    • Year and Date
      2015-09-05
  • [Presentation] Construction of an Arabidopsis electron microscopy atlas2015

    • Author(s)
      TOYOOKA Kiminori, SATO Mayuko, WAKAZAKI Mayumi, HASHIMOTO Kei, KOBAYASHI Megumi, SAWAKI Fumie, KUTSUNA Natsumaro, NAGATA Noriko
    • Organizer
      The 26th InternatIonal Conference on Arabidopsis Research
    • Place of Presentation
      Paris
    • Year and Date
      2015-07-05 – 2015-07-09
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 理研CSRSにおける電子顕微鏡施設の管理と運営2015

    • Author(s)
      豊岡公徳
    • Organizer
      日本顕微鏡学会第71回学術講演会
    • Place of Presentation
      京都国際会館
    • Year and Date
      2015-05-12 – 2015-05-15
  • [Remarks] 理化学研究所 環境資源科学研究センター 技術基盤部門 質量分析・顕微鏡解析ユニット 顕微鏡解析室

    • URL

      http://bioem.riken.jp

URL: 

Published: 2017-01-06  

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