2012 Fiscal Year Research-status Report
腎臓病によって増悪する動脈硬化病変におけるＨＤＬとマクロファージの機能と治療
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24790837
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Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
山本 卓 新潟大学, 医歯(薬)学総合研究科, 特任助教 (70444156)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| Keywords | HDL / マクロファージ / CKD |
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| Research Abstract |
(1) 慢性腎臓病(CKD)患者あるいは非CKD患者でAST-120またはアンギオテンシンII受容体拮抗薬の使用を開始した前後の血漿を採取した。採取した血漿からHDLを密度勾配遠心法にて精製した。精製はQuickGel; Lipoprotein Electrophoresis Systemを用いて確認した。
(2) THP-1マクロファージとHDLを反応させ、細胞から脂質を取り込む反応 (cholesterol efflux)や炎症反応を観察する実験系を確立した。THP-1マクロファージにCKD患者あるいは非CKD患者各8例から精製したHDLを反応させた。CKD患者由来のHDLは非CKD患者由来HDLと比較してアセチル化LDLで泡沫細胞化させたTHP-1マクロファージ内の脂質の取り込みを減少させた。またCKD患者由来のHDLは非CKD患者由来HDLと比較して、リポポリサッカライドで刺激したTHP-1マクロファージのIL-1beta, TNF-alfaのmRNAの発現を増強した。
(3)患者から末梢血を採取し、Lymphoprepを用いて単球を単離した。単球をM-CSFあるいはGM-CSFで培養し、マクロファージに分化させることを確認した。CKD患者由来末梢血マクロファージは非CKD患者由来末梢血マクロファージと比較してLPSで刺激した際のIL-1beta, TNF-alfaのmRNAの発現を増強した。
(4)非CKD患者由来末梢血マクロファージに尿毒素分子のひとつであるインドキシル硫酸を反応さえると(3)と同様に炎症反応の増強を認めた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究の先行した研究として血液透析患者由来HDLのマクロファージに対する機能異常を学会、論文で報告できた (Yamamoto S. J Am Coll Cardiol, 2012)。
患者は治療薬介入期間もあり今後も血漿の採取、HDLの精製の継続が必要である。
反応条件の設定は当該年度に達成されたので、検体の採取、精製が終了したのち直ちに調査を開始できる。
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| Strategy for Future Research Activity |
計画されたとおり、CKD患者でAST-120あるいはアンギオテンシンII受容体拮抗薬の使用前後のHDLの精製を継続する。
精製したHDLを用いて当該年度に確立した反応系を用いて、HDLのマクロファージに対する機能異常における治療介入の影響を評価する。
治療介入の影響と機序を明らかにしたうえ、国際学会での発表、論文化を進める。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
HDLのマクロファージに対する機能異常を測定するため、細胞培養、脂質測定、mRNAの発現測定のために研究費を使用する。
国際学会発表のため旅費を要する。
論文化を進めた際、英文校正を行う。
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[Journal Article] Dysfunctional high-density lipoprotein in patients on chronic hemodialysis.2012
Author(s)
Yamamoto S, Yancey PG, Ikizler TA, Jerome WG, Kaseda R, Cox B, Bian A, Shintani A, Fogo AB, Linton MF, Fazio S, Kon V.
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Journal Title
J Am Coll Cardiol
Volume: 60
Pages: 2372-2379
Peer Reviewed
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