キメラ抗原レセプターを遺伝子導入したリンパ球細胞の作成方法の至適化

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24790969
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 寺倉 精太郎 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (40625141)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: キメラ抗原レセプター / 遺伝子導入T細胞療法 / CD8陽性Tリンパ球 / Tリンパ球

Outline of Annual Research Achievements

1.同種の細胞を用いた系における改良 CMV pp65/IE-1抗原に対するoverlapping peptideを用いて検討を行ったが、ひとつひとつのpeptideに対する反応は弱かった。良好な反応を得るため、あらかじめdominantな反応を惹起するようなpeptideを選択して実験を行った。培養系の検討としてIL-2/IL-15/IL-21などのサイトカインの至適組み合わせについて検討した。その結果IL-2/IL-21の組み合わせが良好であった。
2.自家の細胞を用いた系における改良 手持ちのCD19-CARの細胞内ドメインの至適化とその評価: 評価にあたって刺激後のCAR-T細胞の分泌するInterferon-gamma/Interleukin-2などを測定した。細胞内シグナルを細胞レベルで見るにあたって細胞内リン酸化タンパクの染色を行った。
3．CD19CAR発現の薬剤によるコントロール　薬剤を用いて自由にCD19CARの発現をコントロールするため、tet-on systemを用いて検討を行った。ドキシサイクリンを投与することによってCD19CARの発現をコントロールすることが出来た。発現のkineticsについて、SUPT1に遺伝子導入して検討した。また、発現したCD19CARが機能的な分子であるのかどうか、細胞傷害活性・サイトカイン産生能・刺激後の分裂能などについてさらにこのシステムの検討を進める必要があると考えられた。

Research Products

• [Journal Article] Target antigen density governs the efficacy of anti-CD20-CD28-CD3 ζ chimeric antigen receptor-modified effector CD8+ T cells. (2015)
  • Author(s): Watanabe K, Terakura S, Martens AC, van Meerten T, Uchiyama S, Imai M, Sakemura R, Goto T, Hanajiri R, Imahashi N, Shimada K, Tomita A, Kiyoi H, Nishida T, Naoe T, Murata M.
  • Journal Title: Journal of Immunology Volume: 194 Pages: 911-920
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1402346.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Simple and efficient generation of virus-specific T cells for adoptive therapy using anti-4-1BB antibody. (2015)
  • Author(s): Imahashi N, Nishida T, Goto T, Terakura S, Watanabe K, Hanajiri R, Sakemura R, Imai M, Kiyoi H, Naoe T, Murata M.
  • Journal Title: Journal of Immunotherapy Volume: 38 Pages: 62-70
  • DOI: 10.1097/CJI.0000000000000069.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Chimerism status after unrelated donor bone marrow transplantation with fludarabine-melphalan conditioning is affected by the melphalan dose and is predictive of relapse. (2015)
  • Author(s): Imahashi N, Ohashi H, Terakura S, Miyao K, Sakemura R, Kato T, Sawa M, Yokohata E, Kurahashi S, Ozawa Y, Nishida T, Kiyoi H, Watamoto K, Kohno A, Kasai M, Kato C, Iida H, Naoe T, Miyamura K, Murata M
  • Journal Title: Annals of Hematology Volume: - Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Successful unrelated cord blood transplantation for adult acquired aplastic anemia using reduced intensity conditioning without ATG. (2014)
  • Author(s): Terakura S, Nishida T, Inamoto Y, Ohashi H, Naoe T, Murata M.
  • Journal Title: Immunology Letters Volume: 60 Pages: 99-101
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2014.01.013.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dexamethasone palmitate ameliorates macrophages-rich graft-versus-host disease by inhibiting macrophage functions. (2014)
  • Author(s): Nishiwaki S, Nakayama T, Murata M, Nishida T, Terakura S, Saito S, Kato T, Mizuno H, Imahashi N, Seto A, Ozawa Y, Miyamura K, Ito M, Takeshita K, Kato H, Toyokuni S, Nagao K, Ueda R, Naoe T.
  • Journal Title: Plos One Volume: 9 Pages: e96252
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0096252. eCollection 2014.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Comparison of cord blood transplantation with unrelated bone marrow transplantation in patients older than fifty years. (2014)
  • Author(s): Tanaka M, Miyamura K, Terakura S, Imai K, Uchida N, Ago H, Sakura T, Eto T, Ohashi K, Fukuda T, Taniguchi S, Mori S, Nagamura-Inoue T, Atsuta Y, Okamoto S.
  • Journal Title: Biol Blood Marrow Transplant. Volume: 21 Pages: 517-525
  • DOI: 10.1016/j.bbmt.2014.11.685.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 40-55歳に対するリン酸フルダラビンとメルファランを前処置とした非血縁間骨髄移植の有用性 (2015)
  • Author(s): 渡邊慶介、澤正史、河野彰夫、飯田浩充、内田俊樹、大西康、大橋春彦、熱田由子、鈴木律朗、寺倉精太郎、西田徹也、村田誠、宮村耕一、森下 剛久
  • Organizer: 第37回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
  • Year and Date: 2015-03-05 – 2015-03-07
• [Presentation] 非血縁骨髄移植後のキメリズム状態は前治療強度に影響され、再発の予測因子となりうる (2015)
  • Author(s): 寺倉精太郎、今橋伸彦、大橋春彦、宮尾康太郎、酒村玲央奈、澤正史、横畠恵美、倉橋信悟、小澤幸泰、西田徹也、清井仁、綿本浩一、河野彰夫、笠井雅信、加藤千明、飯田浩充、宮村耕一、村田誠
  • Organizer: 第37回日本造血細胞移植学会総会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
  • Year and Date: 2015-03-05 – 2015-03-07
• [Presentation] Excessively High-Affinity Single-Chain Fragment Variable Region in a Chimeric Antigen Receptor Can Counteract T-Cell Proliferation (2014)
  • Author(s): Watanabe K, Terakura S, Uchiyama S, Martens AC, van Meerten T, Nishida T, Naoe T, Kiyoi H, Murata M
  • Organizer: 第56回米国血液学会
  • Place of Presentation: サンフランシスコ、米国
  • Year and Date: 2014-12-06 – 2014-12-09
• [Presentation] Comparison of outcomes of unrelated BM and CB transplants in young adult leukemia patients. An Updated Results of Japanese Registration Data (2014)
  • Author(s): Terakura S, Atsuta Y, Tsukada N, Kobayashi T, Tanaka M, Kanda J, Ohashi K, Fukuda T, Uchida N, Takahashi S, Nagamura-Inoue T, Morishima Y, Miyamura K
  • Organizer: 第56回米国血液学会
  • Place of Presentation: サンフランシスコ、米国
  • Year and Date: 2014-12-06 – 2014-12-09
• [Presentation] Comparison of unrelated bone marrow and umbilical cord blood transplants in young adult leukemia (2014)
  • Author(s): 寺倉精太郎、熱田由子、塚田信弘、小林武、田中正嗣、諫田淳也、大橋一輝、福田隆浩、内田直之、高橋聡、長村登紀子、森島泰雄、宮村耕一
  • Organizer: 第76回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪府大阪市）
  • Year and Date: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [Presentation] Anti-CD20 chimeric antigen receptor+ T cells can recognize remarkably low target antigen expression (2014)
  • Author(s): 渡邊慶介、寺倉精太郎、内山進、今井美沙、酒村玲央奈、後藤辰徳、葉名尻良、島田和之、西田徹也、直江知樹、冨田章裕、清井仁、村田誠
  • Organizer: 第76回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪府大阪市）
  • Year and Date: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [Presentation] キメラ抗原レセプター遺伝子導入T細胞を用いた細胞治療の今後 (2014)
  • Author(s): 寺倉精太郎
  • Organizer: 第63回日本輸血・細胞治療学会東海支部例会
  • Place of Presentation: 名古屋第一赤十字病院（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2014-09-20
  • Invited
• [Presentation] キメラ抗原受容体単鎖抗体部分の強すぎる親和性は抗原刺激後のT細胞増殖を阻害する (2014)
  • Author(s): 渡邊慶介、寺倉精太郎、今井美沙、酒村玲央奈、後藤辰徳、葉名尻良、今橋伸彦、島田和之、冨田章裕、西田徹也、村田誠、清井仁
  • Organizer: 第6回血液疾患免疫療法研究会学術集会
  • Place of Presentation: 京都国際会議場（京都府京都市）
  • Year and Date: 2014-09-06