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2013 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト骨髄ニッチにおける造血幹細胞支持機構の解明と造血幹細胞体外増幅法の開発

Research Project

Project/Area Number 24790984
Research InstitutionKansai Medical University

Principal Investigator

松岡 由和  関西医科大学, 医学部, 助教 (70533420)

Keywords造血幹細胞 / 間葉系幹細胞 / ニッチ
Research Abstract

1) ヒト造血幹細胞(HSC)支持因子受容体を同定するため、HSC支持因子受容体に対する阻害抗体の作製を試みた。具体的には、ヒトHSCが高度に濃縮されたヒト臍帯血由来18Lin-CD34+/-分画細胞あるいはヒト白血病細胞株であるKG-1細胞をBalb/cマウスに免疫することにより、18Lin-CD34+/-分画細胞の一部あるいは全部に反応性を示す抗体産生ハイブリドーマを約500クローン作製した。
2) 次いで、これらのハイブリドーマを自作の無血清培地に移し、その培養上清より抗体を精製した。その後、精製抗体をヒトHSC支持能を有するヒト骨髄Lin-CD271+SSEA-4+分画由来間葉系幹細胞(DP MSCと18Lin-CD34+/-細胞との共培養系に添加することにより、CD34+細胞維持・産生能を阻害する抗体のスクリーニングを行った。このスクリーニングは現在、50クローン分程度終えており、今後、残りのクローンにおいても同様のスクリーニングを行う予定である。
3) In vivoにおけるDP MSCのHSC支持能の検討を行った。具体的には、NOGマウス左脛骨に2 x 10^5/mouseのDP MSCと8,000/mouseの18Lin-CD34-細胞を骨髄内直接移植(IBMI)法にて同時に移植した。対照群には、18Lin-CD34-細胞単独で移植を行った。移植後20週目にマウスを犠牲死させ、移植部位におけるヒトCD45陽性細胞の生着率を解析した。その結果、18Lin-CD34-細胞単独で移植を行っても80%以上の非常に高いヒトCD45陽性細胞の生着を示すマウスが認められた。そのため、この系では、DP MSCによるSRC支持能を正確に評価することは困難であると考えられた。今後、新たなin vivoにおけるHSC支持能の評価系が必要である。

  • Research Products

    (4 results)

All 2013

All Presentation (3 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Presentation] ヒト造血幹細胞支持能を有するヒト骨髄由来間葉系幹細胞の予期的分離とその機能解析2013

    • Author(s)
      松岡 由和、 薗田 精昭
    • Organizer
      第23回日本サイトメトリー学会学術集会
    • Place of Presentation
      日本医科大学 橘桜会館 (東京)
    • Year and Date
      20130622-20130623
  • [Presentation] Functional Significance of MPL Expression in the Human Primitive Hematopoietic Stem Cell Compartment2013

    • Author(s)
      松岡 由和、高橋 雅也、中塚 隆介、岩城 隆二、河野 比良夫、藤岡 龍哉、佐々木 豊、薗田 精昭
    • Organizer
      第11回幹細胞シンポジウム
    • Place of Presentation
      東京大学 伊藤国際学術研究センター (東京)
    • Year and Date
      20130517-20130518
  • [Presentation] ヒト臍帯血由来CD34抗原陽性および陰性造血幹/前駆細胞は異なる分化能を有する2013

    • Author(s)
      松岡 由和、高橋 雅也、岩城 隆二、角出 啓輔、中塚 隆介、藤岡 龍哉、佐々木 豊、薗田 精昭
    • Organizer
      第21回近畿臍帯血幹細胞研究会
    • Place of Presentation
      ホテルグランヴィア大阪 (大阪)
    • Year and Date
      20130511-20130511
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 間葉系幹細胞の分離法2013

    • Inventor(s)
      薗田 精昭、松岡 由和、中塚 隆介、飯田 寛和
    • Industrial Property Rights Holder
      学校法人 関西医科大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許特願2013-170480
    • Industrial Property Number
      特願2013-170480
    • Filing Date
      2013-08-20

URL: 

Published: 2015-05-28  

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