2014 Fiscal Year Annual Research Report
インフルエンザRNAポリメラーゼのウイルス増殖における分子制御
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25291016
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
朴 三用 横浜市立大学, 生命医科学研究科, 教授 (20291932)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉山 佳奈子 公益財団法人神奈川科学技術アカデミー, 革新的インフルエンザウイルス創薬プロジェクト, 研究員 (20623226)
浦野 健 島根大学, 医学部, 教授 (70293701)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | インフルエンザ / RNAポリメラーゼ / 抗体 / 構造解析 / 創薬 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ンフルエンザRNAポリメラーゼはウイルス増殖の中心的な役割を担っており、他のウイルスタンパク質と比べ変異が起こることが少ないため新規薬剤ターゲットとして注目されている。本申請者は、RNAポリメラーゼが持つ3つのサブユニット(PA, PB1, PB2)のうち、どれか１つのサブユニットでも欠けるとウイルスの増殖機構が失われる事に注目し、PA/PB1とPB1/PB2サブユニット複合体の構造解析に世界で初めて成功した（Nature, 2008; EMBO J, 2009）。その知見を基に本研究では、これらのRNAポリメラーゼの断片に結合するモノクローナル抗体を作製し、ウイルス増殖の阻害抗体の開発を行う。さらに、抗体を用いたヒト細胞内におけるウイルス増殖メカニズムの解明、および抗体とのタンパク質複合体の構造解明による抗体から医薬への創薬基盤の構築を目指す。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
RNAポリメラーゼのドメイン部分を抗原として合計７０個のモノクローナル抗体を作製しており、得られた精製モノクローナル抗体と抗原タンパク質との複合体を得ている。今後、ウイルス増殖を確認して阻害する抗体を開発して行く予定である。また、昨年度にはこれらの抗体を特許を出願しており、研究は順調に進んでいると考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
抗原タンパク質と特異的に結合する抗体用いて、ウイルス増殖を阻害出来る抗体である事を確認して行く予定である。また、抗原タンパク質と抗体の複合体での結晶化を行い、構造解明をする。
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| Causes of Carryover |
H27年度にタンパク質の発現、精製、結晶化などに使用する消耗品を購入したいため次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
タンパク質発現・精製に関する経費（遺伝子工学用酵素、タンパク質精製用試薬、ガラス器具、プラスチック消耗品等）とその結晶化条件検索用の結晶化キット（Hampton社、JB社など約1,000条件）などを計上している。
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