ヒト小型肝幹細胞移植の臨床応用に向けた基盤的臨床前研究

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25293289
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 平田 公一 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (50136959)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 三高 俊広 札幌医科大学, 医学部, 教授 (50231618) ; 水口 徹 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (30347174) ; 谷水 直樹 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (00333386) ; 石井 雅之 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (50643201)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 肝臓 / 幹細胞 / 再生 / 骨髄 / リモデリング

Outline of Annual Research Achievements

前年度に引き続き、ヒト肝幹細胞を臨床応用するための基礎的研究を行った。（1）分化誘導後の肝幹細胞の移植効率の検討：正常成熟マウス肝臓から樹立した肝前駆細胞株にOncostatinMを投与して成熟誘導した細胞をRetrorsine/PHモデルNOGマウス肝臓に移植すると、誘導していない細胞に比べて生着効率が著明に高まった（論文投稿中）。これまで長期培養ができなかったラット肝細胞において、CD44陽性小型肝細胞(CD44-SHs)の一部に継代培養可能な細胞群が存在することを見出し、その特性について解析を行った。継代可能な肝細胞は、Matrigel依存性で4ヵ月以上増殖可能であり、理論上50回以上分裂する細胞が相当数存在することを見出した。CD44-SHsは、3代の継代により生着した細胞は3.17倍増殖した。増殖した細胞は、albumin, HNF4alpha等の肝細胞マーカーを発現していた。またMatrigelの重層によりCD44-SHsは成熟化し、CYP3A活性を持ち毛細胆管網を形成した。正常ヒト肝臓から分離したヒト小型肝細胞も同手法を用いてSubculture可能な事は確認した。（2）肝臓内在性肝前駆細胞の活性化機序：骨髄間葉系細胞を移植することにより内在性肝前駆細胞が増殖することを見出し、骨髄間葉系細胞の分泌するExosomesが前駆細胞にIL17RBを誘導し、類洞内皮細胞とクッパ－細胞には、それぞれIL17RBのリガンドであるIL17B, IL25発現を誘導することにより前駆細胞の増殖が促進されることを見出した。（3）ヒト化肝臓ハイブリットマウスの肝再生とリモデリング：ヒト正常肝細胞をNOD/SCIDマウスに移植を試み、ヒト化肝臓マウスの作成を検討した。小動物においては継代培養可能な肝細胞の樹立方法を確立できた。今後、ヒト肝幹細胞に応用することを目指したい。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Int'l Joint Research] UCSF(米国)
  • Country Name: U.S.A.
  • Counterpart Institution: UCSF
• [Journal Article] Practice Guidelines for Primary Care of Acute Abdomen 2015. (2016)
  • Author(s): Mayumi T, Yoshida M, Tazuma S, Furukawa A, Nishii O, Shigematsu K, Azuhata T, Itakura A, Kamei S, Kondo H, Maeda S, Mihara H, Mizooka M, Nishidate T, Obara H, Sato N, Takayama Y, Tsujikawa T, Fujii T, Miyata T, Maruyama I, Honda H, Hirata K.
  • Journal Title: J Hepatobiliary Pancreat Sci Volume: 23 Pages: 3-36
  • DOI: 10.1002/jhbp.303.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinical comparison of laparoscopic and open liver resection after propensity matching selection. (2015)
  • Author(s): Meguro M, Mizuguchi T, Kawamoto M, Ota S, Ishii M, Nishidate T, Okita K, Kimura Y, Hirata K.
  • Journal Title: Surgery Volume: 158 Pages: 573-587
  • DOI: 10.1016/j.surg.2015.02.031
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Long-term and perioperative outcomes of laparoscopic versus open liver resection for hepatocellular carcinoma with propensity score matching: a multi-institutional Japanese study. (2015)
  • Author(s): Takahara T, Wakabayashi G, Beppu T, Aihara A, Hasegawa K, Gotohda N, Hatano E, Tanahashi Y, Mizuguchi T, Kamiyama T, Ikeda T, Tanaka S, Taniai N, Baba H, Tanabe M, Kokudo N, Konishi M, Uemoto S, Sugioka A, Hirata K, Taketomi A, Maehara Y, Kubo S, Uchida E, Miyata H, Nakamura M, Kaneko H, Yamaue H, Miyazaki M, Takada T.
  • Journal Title: J Hepatobiliary Pancreat Sci Volume: 22 Pages: 721-727
  • DOI: 10.1002/jhbp.276
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prognostic roles of preoperative α-fetoprotein and des-γ-carboxy prothrombin in hepatocellular carcinoma patients. (2015)
  • Author(s): Meguro M, Mizuguchi T, Nishidate T, Okita K, Ishii M, Ota S, Ueki T, Akizuki E, Hirata K.
  • Journal Title: World J Gastroenterol Volume: 21 Pages: 493-495
  • DOI: 10.3748/wjg.v21.i16.4933.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Long-term and perioperative outcomes of laparoscopic versus open liver resection for colorectal liver metastases with propensity score matching: a multi-institutional Japanese study. (2015)
  • Author(s): Beppu T, Wakabayashi G, Hasegawa K, Gotohda N, Mizuguchi T,et al.
  • Journal Title: J Hepatobiliary Pancreat Sci Volume: 22 Pages: 711-720
  • DOI: 10.1002/jhbp.261.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] An immunohistochemical marker panel including claudin-18, maspin, and p53 improves diagnostic accuracy of bile duct neoplasms in surgical and presurgical biopsy specimens. (2015)
  • Author(s): Keira Y, Takasawa A, Murata M, Nojima M, Takasawa K, Ogino J, Higashiura Y, Sasaki A, Kimura Y, Mizuguchi T, Tanaka S, Hirata K, Sawada N, Hasegawa T.
  • Journal Title: Virchows Arch Volume: 466 Pages: 265-277
  • DOI: 10.1007/s00428-014-1705-4.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Reconstruction of hepatic stellate cell-incorporated liver capillary structures in small hepatocyte tri-culture using microporous membranes. (2015)
  • Author(s): Kasuya J, Sudo R, Masuda G, Mitaka T, Ikeda M, Tanishita K.
  • Journal Title: J Tissue Eng Regen Med Volume: 9 Pages: 247-256
  • DOI: 10.1002/term.1630
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Impact of aging on morbidity and mortality after liver resection: a systematic review and meta-analysis. (2015)
  • Author(s): Mizuguchi T, Kawamoto M, Meguro M, Okita K, Ota S, Ishii M, Ueki T, Nishidate T, Kimura Y, Furuhata T, Hirata K.
  • Journal Title: Surg Today. Volume: 45 Pages: 259-270
  • DOI: 10.1007/s00595-014-0863-y.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] New technique of extracorporeal hepatic inflow control for pure laparoscopic liver resection. (2015)
  • Author(s): Mizuguchi T, Kawamoto M, Nakamura Y, Meguro M, Hui TT, Hirata K.
  • Journal Title: Surg Laparosc Endosc Percutan Tech Volume: 25 Pages: e16-20
  • DOI: 10.1097/SLE.0b013e3182a4c0f4
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cancer-Associated Oxidase ERO1-α Regulates the Expression of MHC Class I Molecule via Oxidative Folding. (2015)
  • Author(s): Kukita K, Tamura Y, Tanaka T, Kajiwara T, Kutomi G, Saito K, Okuya K, Takaya A, Kanaseki T, Tsukahara T, Hirohashi Y, Torigoe T, Furuhata T, Hirata K, Sato N.
  • Journal Title: J Immunol Volume: 194 Pages: 4988-4996
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1303228
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Testing the effectiveness of antiemetic guidelines: results of a prospective registry by the CINV Study Group of Japan. (2015)
  • Author(s): Tamura K, Aiba K, Saeki T, Nakanishi Y, Kamura T, Baba H, Yoshida K, Yamamoto N, Kitagawa Y, Maehara Y, Shimokawa M, Hirata K, Kitajima M; CINV Study Group of Japan.
  • Journal Title: Int J Clin Oncol Volume: 20 Pages: 855-865
  • DOI: 10.1007/s10147-015-0786-7.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinicopathological and molecular characteristics of serrated lesions in Japanese elderly patients. (2015)
  • Author(s): Nosho K, Igarashi H, Ito M, Mitsuhashi K, Kurihara H, Kanno S, Yoshii S, Mikami M, Takahashi H, Kusumi T, Hosokawa M, Sukawa Y, Adachi Y, Hasegawa T, Okita K, Hirata K, Maruyama R, Suzuki H, Imai K, Yamamoto H, Shinomura Y.
  • Journal Title: Digestion Volume: 91 Pages: 57-63
  • DOI: 10.1159/000368820
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Heat shock protein 90 targets a chaperoned peptide to the static early endosome for efficient cross-presentation by human dendritic cells. (2015)
  • Author(s): Tanaka T, Okuya K, Kutomi G, Takaya A, Kajiwara T, Kanaseki T, Tsukahara T, Hirohashi Y, Torigoe T, Hirata K, Okamoto Y, Sato N, Tamura Y.
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: 106 Pages: 18-24
  • DOI: 10.1111/cas.12570.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] CpG-A stimulates Hsp72 secretion from plasmacytoid dendritic cells, facilitating cross-presentation. (2015)
  • Author(s): Tanaka T, Kajiwara T, Kutomi G, Kurotaki T, Saito K, Kanaseki T, Tsukahara T, Hirohashi Y, Torigoe T, Hirata K, Okamoto Y, Sato N, Tamura Y.
  • Journal Title: Immunol Lett Volume: 167 Pages: 34-40
  • DOI: 10.1016/j.imlet.2015.06.014.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Evaluation of the validity of chemotherapy-induced nausea and vomiting assessment in outpatients using the Japanese version of the MASCC antiemesis tool. (2015)
  • Author(s): Matsuda Y, Okita K, Furuhata T, Kutomi G, Yamashita K, Sato Y, Takimoto R, Hirata K.
  • Journal Title: Support Care Cancer Volume: 23 Pages: 3331-3339
  • DOI: 10.1007/s00520-015-2780-z
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Heat shock protein 90 associates with Toll-like receptors 7/9 and mediates self-nucleic acid recognition in SLE. (2015)
  • Author(s): Saito K, Kukita K, Kutomi G, Okuya K, Asanuma H, Tabeya T, Naishiro Y, Yamamoto M, Takahashi H, Torigoe T, Nakai A, Shinomura Y, Hirata K, Sato N, Tamura Y.
  • Journal Title: Eur J Immunol Volume: 45 Pages: 2028-2041
  • DOI: 10.1002/eji.201445293
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 腹腔鏡下肝部分切除を究める経過中の報告 (2015)
  • Author(s): 水口徹,目黒 誠, 沖田 憲司, 西舘 敏彦, 植木 知身, 久能 大助, 信岡 隆幸, 伊東 竜哉, 木村 康利, 太田 盛道, 平田 公一, 古畑 智久
  • Organizer: 第２８回日本内視鏡外科学会総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（大阪）
  • Year and Date: 2015-12-10 – 2015-12-12
• [Presentation] 血液から酵母様真菌が出たとき、まず何が必要か、抗菌薬はどう使うか (2015)
  • Author(s): 水口徹,目黒 誠, 川本 雅樹, 沖田 憲司, 信岡 隆幸, 西舘 敏彦, 今村 将史, 伊東 竜哉, 木村 康利, 平田 公一
  • Organizer: 第２８回日本外科感染症学会総会学術集会
  • Place of Presentation: 名古屋東急ホテル（名古屋市）
  • Year and Date: 2015-12-02 – 2015-12-03
  • Invited
• [Presentation] 1T17p-08(1P0962)] Notch とTGFbetaシグナルによる肝細胞の分化可塑性の制御 (2015)
  • Author(s): 谷水 直樹, 西川 祐司, 三高 俊広
  • Organizer: 第８８回生化学学会大会
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド（神戸市）
  • Year and Date: 2015-12-01 – 2015-12-04
• [Presentation] 肝臓外科領域における10年間の工夫と進歩 (2015)
  • Author(s): 水口徹 目黒 誠, 太田 盛道, 西舘 敏彦, 沖田 憲司, 植木 知身, 石井 雅之, 信岡 隆幸, 木村 康利, 平田 公一
  • Organizer: 第７０回消化器外科学会総会
  • Place of Presentation: アクトシティ浜松（浜松市）
  • Year and Date: 2015-07-15 – 2015-07-17
• [Presentation] 開腹肝切除と腹腔鏡肝切除の最前線－戦略と技術の観点から (2015)
  • Author(s): 水口徹
  • Organizer: 第２７回日本肝胆膵外科学会・学術集会
  • Place of Presentation: ホテルグランパシフィックLE DAIBA(東京都港区)
  • Year and Date: 2015-06-11 – 2015-06-13
• [Presentation] 肝上皮細胞が示す分化可塑性の制御機構の解明 (2015)
  • Author(s): 谷水直樹、西川祐司、三高俊広
  • Organizer: 第２２回肝細胞研究会
  • Place of Presentation: 米子コンベンションセンター（米子市）
  • Year and Date: 2015-06-04 – 2015-06-05
• [Presentation] 新生肝細胞による治療を目指した研究の現状 (2015)
  • Author(s): 三高俊広
  • Organizer: 第５１回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: ホテル日航熊本（熊本市）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-22
• [Presentation] 骨髄間葉系幹細胞移植によるRetrorsine/;部分肝切除モデルラット肝再生促進機序の解析 (2015)
  • Author(s): 石井 雅之, 市戸 義久, 谷水 直樹, 水口 徹, 平田 公一, 三高 俊広
  • Organizer: 第５１回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: ホテル日航熊本（熊本市）
  • Year and Date: 2015-05-21 – 2015-05-22
• [Presentation] 巨大腫瘍に対する右葉切除時のアクアハンギング法 (2015)
  • Author(s): 水口徹 目黒 誠, 沖田 憲司, 西舘 敏彦, 植木 知身, 太田 盛道, 今村 将史, 木村 康利, 信岡 隆幸, 伊東 竜哉, 石井 雅之, 平田 公一.
  • Organizer: 第１１５回日本外科学会定期学術集会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（名古屋市）
  • Year and Date: 2015-04-16 – 2015-04-18
• [Patent(Industrial Property Rights)] 小型肝細胞の継代培養法 (2016)
  • Inventor(s): 三高俊広、石井雅之、市戸義久、谷水直樹、水口徹、平田公一
  • Industrial Property Rights Holder: 三高俊広、石井雅之、市戸義久、谷水直樹、水口徹、平田公一
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Industrial Property Number: 2016-16210号
  • Filing Date: 2016-01-28