2013 Fiscal Year Annual Research Report
腫瘍幹細胞由来エクソソーム解析による脳腫瘍形成機序解明と新規診断・治療法の開発
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25293311
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Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
溝口 昌弘 九州大学, 大学病院, 講師 (50380621)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉本 幸司 九州大学, 大学病院, 講師 (70444784)
中溝 玲 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80529800)
天野 敏之 九州大学, 大学病院, 助教 (70448413)
秦 暢宏 独立行政法人国立病院機構九州医療センター(臨床研究センター), その他部局等, その他 (10596034)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 脳腫瘍 / グリオーマ / microRNA / エクソソーム |
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| Research Abstract |
新たな解析法high resolution melting (HRM)法導入と新規神経膠腫の遺伝子解析：HRM法を用いてIDH1/2、BRAF、H3F3A遺伝子変異を簡便、高精度な解析法を確立した。本年度に新規登録された46例の神経膠腫（GBM23, AA2, AO2, DA6, OD2, GS1, others10）に対し、LOH解析、IDH1/2遺伝子変異解析を施行した。
Mesenchymal, Proneural marker遺伝子発現解析：さらにproneural (BCAN, DLL3, OLIG2, NCAM1, NKX2-2, ASCL1)、mesenchymal (YKL40, VIM, CD44, TRADD, RELB, PDPN)の12遺伝子発現解析に基づきproneural type、mesenchymal type、その他に分類した。
腫瘍幹細胞分離と異種動物移植モデルの作成：膠芽腫に対しては、幹細胞培養を継続した。さらに１例の長期継代幹細胞を樹立した。本年度18匹のマウス移植モデル作成に着手した。U87では腫瘍形成がみられたが、樹立した幹細胞では腫瘍形成がみられなかった。
新たなmicroRNA発現解析：新規脳腫瘍関連microRNA (miR-9, 10b, 22)の発現解析をおこない、mi-9, 10b発現はmesenchymal typeで有意に低下していた。microRNAが形質転換に関与する可能性が示唆され、遺伝子型とmicroRNA発現の関連が示唆された。
分泌型miRNAの分離、解析：培養細胞、動物モデル、臨床症例より、分泌型miRNAの解析を開始した。動物モデルでは、心房穿刺による全血採取後、全血清またはエクソソーム分離後にmiRNAを分離した。分泌型miRNAを含有する血液標本を蓄積し、分泌型miR21高発現を同定した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
遺伝子解析に基づく腫瘍の再分類は可能となり、microRNA発現と遺伝子型の相関が明らかとなりつつある。本年度は、動物移植モデルの作成に時間と費用を要した。そのため、摘出標本において脳腫瘍形成に関わる新たなmicroRNAが同定できたが、その動物モデルでの証明は困難であった。
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| Strategy for Future Research Activity |
培養細胞、動物モデル、臨床症例から分泌型microRNA採取を継続する。microRNAの機能解明の為、in vitro、in vivoの実験系を確立する。特にマウス移植モデルの作成を確立させることに重きをおき、研究を進める。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
脳腫瘍（膠芽腫）手術症例より適宜、摘出標本より幹細胞培養をおこない、腫瘍幹細胞分離を試みている。さらに幹細胞が確立できたものに対して、動物移植モデルの作成に取りかかっており、本年度は次年度使用額が生じた。
実施計画に則り、適宜幹細胞分離、動物移植モデルを作成し、解析対象標本の蓄積、実験系の確立をすすめる。
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Research Products
(4 results)
