2014 Fiscal Year Research-status Report
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25430044
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
森 徹自 鳥取大学, 医学部, 教授 (30285043)
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2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 神経幹細胞 / 細胞増殖 / 神経回路 / ニューロンの興奮 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
単一ニューロンの微細形態変化の検討については、研究環境の変更があったために、遺伝子銃を用いたDiI標識法から、より簡便な方法であるゴルジ染色法に変更した。本年度はゴルジ染色の条件設定をおこなった。ゴルジ染色法は、任意のニューロンを可視化することは困難で、本研究計画で標的とするSVZ(脳室下帯）直近ニューロンの可視化には、多くの個体を解析する必要がある。そのため、当初の研究計画よりも多数のマウスに対して重積てんかん誘発処理を行い、解析を行った。これまでのところ、コントロール群と比較して、重積てんかんモデル群におけるSVZ直近ニューロンの微細形態に違いが表れている印象を持っている。
SVZ直近ニューロンに投射する、線条体以外のニューロンについて、さらに詳細に検討を行った。昨年度は、終脳皮質からの投射経路に絞って検討したが、本年度は逆行性トレーサーをSVZ直近の線条体に注入することで、この部位に投射する終脳皮質以外のニューロンを網羅的に捉える実験をおこなった。これらの部位に対してニューロンの興奮性を人為的に壊変させるレンチウイルスベクターを注入し、SVZの神経幹/前駆細胞の反応を検討する予定である。
一連の実験の過程で、SVZに存在する神経幹/前駆細胞にも遺伝子発現変化と形態変化を誘発している可能性を示唆するデータを得ている。SVZ直近の微細環境の変化が起きていることを裏付けるデータとして注目している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
昨年度は所属研究機関の異動があったために、研究環境に大きな変化があった。そのため一部の実験手技・条件を再度検討する必要に迫られた。例えば、遺伝子銃を用いた単一ニューロンの可視化については、新所属機関では実施困難なため、ニューロンの微細構造の検討はゴルジ染色に変更する点などである。
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| Strategy for Future Research Activity |
重積てんかんモデルマウスを使用し、ゴルジ染色を施して、SVZ直近ニューロンの微細形態の変化を検討してゆく。特に、薬剤による発作誘発後の微細形態の経時的変化に注目する。樹状突起の数、棘突起の数などについて、コントロールマウス群と比較して統計学的処理を行う必要があるので、解析個体数を増やしてゆく方針である。
SVZ直近の線条体ニューロンへの複数の投射経路について、個別に解析をおこなう予定である。
これまでに得られた結果の裏付けデータの取得をすることで、科学的に信頼のおける成果を目指す。
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| Causes of Carryover |
研究手技の見直し・変更により、研究経費を削減することができた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
繰越金を使用することによって、実験動物数を増やし、統計学的に信頼性の高いデータを取得する。また、より多くの種類の一次抗体を購入することで、詳細な細胞マーカー発現を検討して、これまで取得したデータの裏付けデータを取得する。また、連携研究者が異動したことに伴い、打ち合わせのための旅費にも使用する。研究代表者の旧所属に設置済みの機器を使用するための旅費にも使用する。
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Research Products
(8 results)
