スクリーニングで同定した抗ヘルペスウイルス化合物を用いたウイルス増殖機序の解析

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25460578
• Research Institution: Gifu Pharmaceutical University
• Principal Investigator: 井上 直樹 岐阜薬科大学, 薬学部, 教授 (90183186)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: サイトメガロウイルス / 水痘帯状疱疹ウイルス / 抗ウイルス薬

Outline of Annual Research Achievements

レポーター細胞株を用いて同定した抗サイトメガロウイルス(CMV)、抗水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)化合物各数種の作用機序を解析し、新規薬剤開発を進めるとともに、同時に、ウイルス増殖の各過程に関与するウイルス及び宿主因子を解析することが本研究の目的である。本年度得られた成果は以下の通り。
1) 抗CMV化合物35C10は、選択指標（SI）が10以上の特異性があること、ウイルス粒子の細胞への吸着は阻害せず、一方で前初期蛋白の発現を阻害することから、ウイルスの侵入から前初期蛋白発現までの間のステップを阻害する新規作用点を有する化合物であることを明らかにした。また、ヒトCMVにのみならず、マウスCMVに対しても抗ウイルス活性を示した。また、35C10の側鎖のひとつメトキシ基をクロル基やフッ素基に置換した化合物では抗ウイルス活性が低下したため、この側鎖が活性に関与することが示された。一方、別の側鎖のアミノ基が失われた35C10-3では、抗ウイルス活性は低下しなかったが細胞毒性のため、SIが8程度になった。
2) 抗CMV化合物131G4はヘルペスウイルス前初期蛋白の転写活性化を阻害することを昨年度明らかにしたが、この阻害はヒト及びアカゲザルの線維芽細胞及び上皮細胞株では見られるがモルモットやマウスなどげっ歯類由来の細胞株では見られないことから、宿主依存性があることを明らかにした。
3) 抗VZV化合物45B5及び上記35C10に対する耐性株候補の作出に成功した。現在、変異の同定を進めている。
4) VZVと同じVaricellovirus属のウマヘルペスウイルス1型に同定した10種類の抗VZV化合物が効果を有するか検討した結果、41E2がヒト、ウマ、マウスの細胞株でウマヘルペスウイルス1型の増殖を阻害することを明らかにした。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

複数のプロジェクトを同時進行させており、大半が順調に進行しているが、化合物ごとの解析になりがちであるため、一部に進展が遅れているプロジェクトがある。

Strategy for Future Research Activity

26年度の継続を含め、当初の計画通り研究を行う。特に、耐性株のゲノム配列解析から作用機序を明らかにすることに重点を置く。

Causes of Carryover

残額が少額で実際に必要で購入できる物品に制約があるため、次年度予算とあわせて使用することとした

Expenditure Plan for Carryover Budget

物品費の一部とする

Research Products

• [Journal Article] Low total IgM values and high cytomegalovirus loads in the blood of newborns with symptomatic congenital cytomegalovirus infection. (2015)
  • Author(s): Kobayashi Y, Morioka I, Koda T, Nakamachi Y, Okazaki Y, Noguchi Y, Ogi M, Chikahira M, Tanimura K, Ebina Y, Funakoshi T, Ohashi M, Iijima K, Inoue N, Kawano S, Yamada H
  • Journal Title: J Perinatal Med Volume: 43 Pages: 239-243
  • DOI: 10.1515/jpm-2014-0071
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Evidence for human herpesvirus-6B infection of regulatory T-cells in acute systemic lymphadenitis in an immunocompetent adult with the drug reaction with eosinophilia and systemic symptoms syndrome: A case report. (2014)
  • Author(s): Mine S, Suzuki K, Sato Y, Fukumoto H, Kataoka M, Inoue N, Ohbayashi C, Hasegawa H, Sata T, Fukayama M,Katano H
  • Journal Title: J Clin Virol Volume: 61 Pages: 448-452
  • DOI: 10.1016/j.jcv.2014.08.025
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Aberrant fetal macrophage/microglial reactions to cytomegalovirus infection (2014)
  • Author(s): Sakao-Suzuki M, Kawasaki H, Akamatsu T, Meguro S, Miyajima H, Iwashita T, Tsutsui Y, Inoue N, Kosughi I
  • Journal Title: Ann Clin Transl Neurol Volume: 1 Pages: 570-588
  • DOI: 10.1002/acn3.88
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Quantitative evaluation of ventricular dilatation using computed tomography in infants with congenital cytomegalovirus infection. (2014)
  • Author(s): Matsuo K, Morioka I, Oda M, Kobayashi Y, Nakamachi Y, Kawano S, Nagasaka M, Koda T, Yokota T, Morikawa S, Miwa A, Shibata A, Minematsu T, Inoue N, Sugimura K, Yamada H, Iijima K
  • Journal Title: Brain & Dev Volume: 36 Pages: 10-15
  • DOI: 10.1016/j.braindev.2012.12.009
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The presence of antibodies against the AD2 epitope of cytomegalovirus glycoprotein B is associated with acute rejection after renal transplantation. (2014)
  • Author(s): Ishibashi K, Tokumoto T, Shirakawa H, Oguro T, Yanagida T, Takahashi N, Nomiya M, Haga N, Aikawa K, Tanabe K, Inoue N, Kojima Y, Suzutani T
  • Journal Title: Microbiol Immunol Volume: 58 Pages: 72-75
  • DOI: 10.1111/1348-0421.12112
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Guinea pig cytomegalovirus GP129/131/133, homologs of human cytomegalovirus UL128/130/131A, are required for infection of monocytes and macrophages (2014)
  • Author(s): Yamada S, Fukuchi S, Hashimoto K, Fukui Y, Tsuda M, Kataoka M, Katano H, Inoue N
  • Journal Title: J Gen Virol Volume: 95 Pages: 1376-1382
  • DOI: 10.1099/vir.0.064527-0
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Idiopathic intrauterine growth restriction caused by cytomegalovirus infection and associated placental pathology. (2014)
  • Author(s): Pereira L, Petitt M, Fong A, Tsuge M, Tabata T, Fang-Hoover J, Maidji E, Zydek M, Zhou Y, Inoue N, Logahvi S, Pepkowitz S, Ogunyemi D
  • Journal Title: J Infec Dis Volume: 209 Pages: 1573-1584
  • DOI: 10.1093/infdis/jiu019
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The IgG avidity value for the prediction of congenital cytomegalovirus infection in a prospective cohort study. (2014)
  • Author(s): Ebina Y, Minematsu T, Sonoyama A, Morioka I, Inoue N, Tairaku S, Nagamata S, Tanimura K, Morizane M, Deguchi M, Yamada H
  • Journal Title: J Perinatal Med Volume: 42 Pages: 755-759
  • DOI: 10.1515/jpm-2013-0333
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Molecular and virological evidence of viral activation from chromosomally integrated human herpesvirus 6A in a patient with X-linked severe combined immunodeficiency. (2014)
  • Author(s): Endo A, Watanabe K, Ohye T, Suzuki K, Matsubara T, Shimizu N, Kurahashi H, Yoshikawa T, Katano H, Inoue N, Imai K, Takagi M, Morio T, Mizutani S
  • Journal Title: Clin Infec Dis Volume: 59 Pages: 545-548
  • DOI: 10.1093/cid/ciu323
  • Peer Reviewed
• [Presentation] HHV6B の制御性 T 細胞への感染が証明された DRESS 症候群の一剖検例 (2014)
  • Author(s): 峰宗太郎、鈴木高祐、佐藤由子、福本瞳、井上直樹、片岡紀代、大林千穂、長谷川秀樹、佐多徹太郎、深山正久、片野晴隆
  • Organizer: 第62回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜会議センター（横浜市）
  • Year and Date: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [Presentation] 新規作用メカニズムによるEHV-1感染症治療薬候補化合物の探索 (2014)
  • Author(s): 岡田彩加、安井瑠香、井上直樹、大屋賢司、福士秀人
  • Organizer: 第157回日本獣医学会学術集会
  • Place of Presentation: 北海道大学（札幌市）
  • Year and Date: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [Presentation] The two wheels for infection control of VZV diseases: quality control of vaccine products and development of anti-VZV compounds (2014)
  • Author(s): Inoue N
  • Organizer: The 39th International Herpesvirus Workshop
  • Place of Presentation: 神戸国際展示場（神戸市）
  • Year and Date: 2014-07-23
  • Invited
• [Presentation] A single nucleotide polymorphism in the NKG2D gene is associated with clinical outcome of congenital cytomegalovirus infection at birth. (2014)
  • Author(s): Taniguchi R, Koyano S, Suzutani T, Goishi K, Ito Y, Morioka I, Nakamura H, Yamada H, Oka A, Inoue N
  • Organizer: The 39th International Herpesvirus Workshop
  • Place of Presentation: 神戸国際展示場（神戸市）
  • Year and Date: 2014-07-19 – 2014-07-23