炎症性腸疾患における腸管内分泌L細胞の役割の解明と新規治療法の開発

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25460949
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 安藤 貴文 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (80378041)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 後藤 秀実 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10215501) ; 前田 修 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20378053) ; 渡辺 修 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (80378059) ; 尾崎 信暁 名古屋大学, 総合保険体育科学センター, 准教授 (70378082) ; 大宮 直木 藤田保健衛生大学, 医学部, 准教授 (00335035)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: Gcggfp/gfp （KO）マウス / 絨毛 / DSS腸炎の改善程度

Outline of Annual Research Achievements

内因性のGLP-2の役割を検討するために、GLP-2が欠損する状況での腸炎の回復過程を検討した。グルカゴン遺伝子にGfp遺伝子が挿入され、GLP1及び、GLP2が発現していないことを確認できたマウス（Gcggfp/gfp （KO）マウス）を使用した。１．通常の段階で、GLP-2欠損マウスの絨毛について、十二指腸、上部、中部、下部小腸でＷＴマウスと比較検討した（n=5　each)。絨毛の高さは、KOマウスは十二指腸、上部、中部、下部小腸ともに低い傾向がみられたが、有意ではなく、クリプト、陰窩の深さについては、差は認められなかった。２．DSS腸炎の改善程度を、Gcggfp/gfp （KO）マウスとGcggfp/gfp （WT）マウスで比較検討した。
DSS4日間投与した際の体重変化は、Day12-18までKOマウスの回復が遅延している傾向がみられたが有意差は無かった。DAIインデックス（便の性状、血便の程度、体重変化を総合した臨牀スコア）ではも、KOマウスの回復が遅延している傾向がみられたが有意差は無かった。十二指腸と回腸末端の病理学的スコアでは、Day21において、KOマウスでは21日目も炎症が残存している傾向がみられた。直腸の病理学的スコアでは、同様にDay21において、KOマウスには炎症が残存していた。以上より、GLP-2が欠損している状況において、腸炎の回復過程が完全に阻害されることはないが、治癒が遅延する傾向がみられた。このことから、GLP-2というインクレチンは、腸炎の回復に必須のものではない可能性が考えられた。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

DSS腸炎の作成が難しく時間を要した。
Gcggfp/gfp （KO）マウスとGcggfp/gfp （WT）マウスで同じ条件で観察する必要がある。腸炎が強すぎて、マウスが生存できなかったり、また、炎症が弱くて十分な腸炎ができないなど、実験に適したDSS腸炎の作成に時間を要した。

Strategy for Future Research Activity

１．Gcggfp/gfp （KO）マウスとGcggfp/gfp （WT）マウスでは、絨毛の高さは、KOマウスは十二指腸、上部、中部、下部小腸ともに低い傾向がみられたことについて、有意なものではないかさらに確認する。
２．DSS腸炎の改善程度を、Gcggfp/gfp （KO）マウスとGcggfp/gfp （WT）マウスで比較検討したところ、DSS4日間投与した際の体重変化は、Day12-18までKOマウスの回復が遅延している傾向がみられたことについて、有意なものではないかさらに確認する。
３．DSS腸炎の改善程度を、Gcggfp/gfp （KO）マウスとGcggfp/gfp （WT）マウスで比較検討する過程で、DPP-4阻害薬投与が及ぼす影響を比較検討する。

Causes of Carryover

動物実験で、DSS腸炎作成の過程で、適当なDSS濃度の調整が間に合わず、十分な実験ができなかった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

適当なDSS濃度によるDSS腸炎を起こしたマウスに対し、多くの実験を続けていくため、動物実験試薬、分子生物学試薬の消耗品、ならびにマウス購入、繁殖飼糧に使用する。