非アルコール性脂肪性肝炎進展におけるストレスおよび交感神経系の関与

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25461014
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Aichi Medical University
• Principal Investigator: 中出 幸臣 愛知医科大学, 医学部, 講師 (70431400)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 伊藤 清顕 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (50551420)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: ストレス / ＣＲＦ / 非アルコール性脂肪性肝炎 / ノルアドレナリン

Research Abstract

肥満糖尿病マウスであるob/obマウスに高脂肪食を投与し、拘束ストレスを連日負荷し、脂肪肝からNASHへの進展があるか確認を試みた。拘束ストレスを連日負荷し4週後に犠死させた。ストレス負荷により実験開始1週目には血清コルチコステロンが拘束ストレス群で高い傾向にあったが、その後徐々に対照群と有意な違いがみられなくなった。実験開始後4週目マウスを犠死させた際の血清TNF-alpha,IL-6,AST,ALTは有意な差を認めず、肝脂肪沈着に関しても有意な違いを確認できなかった。次にob/obマウスの脳室内に定位脳手術固定装置を用いてストレスホルモンであるCRFを持続注入する群を設定し、高脂肪食による影響を検討した。高脂肪食投与下で中枢性CRFを注入する群では実験開始1週目には血清コルチコステロンが高い傾向にあったが、その後徐々に対照群と有意な違いがみられなくなった。実験開始後4週目マウスを犠死させた際の血清TNF-alpha,IL-6,AST,ALTは有意な差を認めず、肝脂肪沈着に関しても有意な違いを確認できなかった。次にストレス負荷の際に交感神経およびノルアドレナリン作動性神経が活性化されるが、マウスの背側皮下より交感神経賦活薬であるノルアドレナリンを持続注入する群を設定した。ノルアドレナリンを持続注入する群をにおいては実験開始1週目には血清コルチコステロンがノルアドレナリン群で高い傾向にあった。実験開始後4週目マウスを犠死させた際の血清TNF-alpha,IL-6,AST,ALTはノルアドレナリン群で高い傾向を呈したが、肝脂肪沈着に関しては減少傾向を認めた。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

当初、拘束ストレスは安定して負荷が得られるストレスと考えられたが、本実験においてストレス馴化と考えられる問題があり、このため血清コルチコステロン濃度に有意な違いを得られなかった。同様に中枢性にＣＲＦを投与する群においても拘束ストレス負荷時と同様な結果が得られたため、こちらも馴化が問題となるものと考えられた。急性実験においては有用な方法かと考えれたが、本実験のように慢性実験においては難しい側面があるものと考えれられた。

Strategy for Future Research Activity

拘束ストレスおよび中枢性ＣＲＦによるストレス負荷実験は馴化のため、実験系が不安定である可能性が考えれたため、ノルアドレナリンの持続投与系では高脂肪食負荷により脂肪肝へ影響を及ぼす可能性が考えられたため、今後は交感神経アルファ受容体刺激剤または交感神経ベータ受容体刺激剤の持続皮下投与モデルを作成し、高脂肪食による脂肪肝に及ぼす影響に関して検討を行っていく予定である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

拘束ストレスおよび中枢性ＣＲＦ投与により高脂肪食による脂肪肝形成に有意な違いを生じなかったため、平成25年度に施行する予定であった、マッソントリクローム染色による肝線維化評価を施行できておらず、このため本染色用の誌薬を購入する時期を延期したため。
ノルアドレナリンの持続投与系では高脂肪食負荷による影響に違いをしょうじさせる可能性が考えられたため、今後は交感神経a受容体刺激剤または交感神経b受容体刺激剤の持続皮下投与モデルに高脂肪食投与する実験を遂行し、マッソントリクロム染色を行う予定で使用予定である。

Research Products

• [Journal Article] Ex vivo induction of IFN-λ3 by a TLR7 agonist determines response to Peg-IFN/ribavirin therapy in chronic hepatitis C patients. (2014)
  • Author(s): Murata K, Sugiyama M, Kimura T, Yoshio S, Kanto T, Kirikae I, Saito H, Aoki Y, Hiramine S, Matsui T, Ito K, Korenaga M, Imamura M, Masaki N, Mizokami M.
  • Journal Title: J Gastroenterology Volume: 49 Pages: 126-137
  • DOI: 10.1007
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Angiotensin II type 1 receptor antagonist prevents hepatic carcinoma in rats with nonalcoholic steatohepatitis. (2013)
  • Author(s): Tamaki, Y., Y. Nakade, T. Yamauchi, Y. Makino, S. Yokohama, M. Okada, K. Aso, H. Kanamori, T. Ohashi, K. Sato, H. Nakao, M. Haneda and M. Yoneda
  • Journal Title: J Gastroenterology Volume: 48 Pages: 491-503
  • DOI: 10.1007
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] High levels of hepatitis B virus after the onset of disease lead to chronic infection in patients with acute hepatitis B. (2013)
  • Author(s): Yotsuyanagi H, Ito K, Yamada N, Takahashi H, Okuse C, Yasuda K, Suzuki M, Moriya K, Mizokami M, Miyakawa Y, Koike K.
  • Journal Title: Clin Infect Dis. Volume: 57 Pages: 935-942
  • DOI: 10.1093
  • Peer Reviewed