2013 Fiscal Year Research-status Report
ヒト心臓幹細胞からの心筋分化誘導法の樹立～心疾患テーラーメイド医療へのシナリオ～
| Project/Area Number |
25461118
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
細田 徹 東海大学, 創造科学技術研究機構, 准教授 (50608601)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 心臓幹細胞 / 体性幹細胞 / 心筋分化誘導 / 再生医学 |
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| Research Abstract |
開心手術症例から得られる心臓組織片を用いて、c-kit陽性心臓幹細胞を単離・培養した。細胞選別の特異性については、c-kit受容体に対する免疫細胞染色によって確かめた。
この細胞を、マトリゲルによりコーティングした24ウェル（ないし96ウェル）皿に播種し、アスコルビン酸、Wnt阻害薬、BMP阻害薬、Nodal阻害薬、レチノイン酸阻害薬、及びトリヨードサイロニンを、種々の組み合わせで、またタイミングを変えつつ作用させ、それぞれ１ヶ月以上ずつ刺激を続けて拍動性の変化が見られるかどうかを日々観察した。また、いくつかのサンプルを選んでRNAを回収し、qRT-PCR法によって心筋への分化傾向の見られる条件を見出そうと試みた。
残念ながら、有意に分化の進んでいると思われる細胞が見られず、更に追加の条件として、デキサメサゾン、オキシトシン、シクロスポリン、DMSOを、それぞれ個別に作用させてみたが、これらの条件でも心筋への分化傾向は見出せなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
ヒト心臓幹細胞の培養と、分化誘導を試行するシステムの確立には成功しているが、これまでに試した条件では明らかな心筋分化誘導を達成出来ておらず、更なる工夫が必要となる。
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| Strategy for Future Research Activity |
心筋への分化誘導研究が盛んに行われているiPS細胞ないしES細胞の研究者と、学会や研究会等で意見交換したり、研究室を訪れて実験の様子を見学したりして、継続的にヒントを得ている。具体的には、細胞の培養密度や、浮遊培養系の模索、培養皿の形状やコーティングの材質等について検討し、工夫して行く予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
消耗品購入のタイミングの前後により、次年度に僅かに繰越金が生じました。
細胞の分化誘導に用いる試薬等に使う予定です。研究計画や、予算の使用計画自体に変更はありません。
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[Journal Article] c-Kit-positive cardiac stem cells nested in hypoxic niches are activated by stem cell factor reversing the aging myopathy.2014
Author(s)
Sanada F, Kim J, Czarna A, Chan NY, Signore S, Ogorek B, Isobe K, Wybieralska E, Borghetti G, Pesapane A, Sorrentino A, Mangano E, Cappetta D, Mangiaracina C, Ricciardi M, Cimini M, Ifedigbo E, Perrella MA, Goichberg P, Choi AM, Kajstura J, Hosoda T, Rota M, Anversa P, Leri A.
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Journal Title
Circulation Research
Volume: 114
Pages: 41-55
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Inositol 1, 4, 5-trisphosphate receptors and human left ventricular myocytes.2013
Author(s)
Signore S, Sorrentino A, Ferreira-Martins J, Kannappan R, Shafaie M, Del Ben F, Isobe K, Arranto C, Wybieralska E, Webster A, Sanada F, Ogorek B, Zheng H, Liu X, Del Monte F, D'Alessandro DA, Wunimenghe O, Michler RE, Hosoda T, Goichberg P, Leri A, Kajstura J, Anversa P, Rota M.
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Journal Title
Circulation
Volume: 128
Pages: 1286-1297
DOI
Peer Reviewed
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