2015 Fiscal Year Annual Research Report
下垂体で機能する甲状腺ホルモントランスポーターの同定と機能解析
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25461547
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
難波 範行 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 招へい教員 (10379076)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 甲状腺ホルモントランスポーター / 下垂体前葉 / TSH産生細胞 / TαT1細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
甲状腺ホルモン（TH）トランスポーターMct8欠損マウスでは、視床下部の甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（TRH）は過剰発現しており、THを大量投与しなければ抑制されない。一方、MCT8異常症患児に生理量のTHを投与すると甲状腺刺激ホルモン（TSH）値は低下する。したがって、下垂体では生理量のTHによるnegative feedbackが機能していると考えられる。しかし、下垂体のTHトランスポーターの詳細は未だに不明である。そこで本研究では、下垂体におけるTHのnegative feedbackを担うTHトランスポーターの同定を目指した。
1) マウス下垂体前葉におけるTHトランスポーターの発現解析：57BL/6マウス下垂体前葉よりcDNAを作成し、RT-PCR法で既知のTHトランスポーターを網羅的にスクリーニング後、検出されたトランスポーターを定量的 RT-PCR 法により定量したところ、Lat1, Lat2, Oatp3a1の発現が最も高かった。さらにin situ hybridizationと免疫染色を併用し、TSH産生細胞と各THトランスポーターの共局在を証明しようと試みたが、切片へのダメージが大きく、組織レベルでは十分な証明はできなかった。
2) TSH産生細胞におけるTHトランスポーターの発現解析：下垂体TSH産生細胞不死化株TαT1（Mellon PL, University of California, San Diegoより供与）を用い、RT-PCR法でTHトランスポーターを網羅的にスクリーニング後、定量的RT-PCR法を用いて定量したところ、下垂体前葉と同様にLat1, Lat2, Oatp3a1の発現が最も高かった。
3) TSH産生細胞におけるTHトランスポーターの機能解析：TαT1においてTH細胞内取り込みを測定するためのnon-RIの系を立ち上げた。
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