大腸癌浸潤・転移におけるHCGβの機能解析とその臨床応用

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25462044
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 本間 重紀 北海道大学, 大学病院, 助教 (30533674)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高橋 典彦 北海道大学, 大学病院, 准教授 (30399894) ; 西原 広史 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任准教授 (50322805) [Withdrawn] ; 蒲池 浩文 北海道大学, 大学病院, 講師 (60374237)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 大腸癌 / EMT / 浸潤・転移 / hCGβ

Outline of Annual Research Achievements

背景：癌細胞の転移能獲得には上皮間葉転換（EMT）が重要であり、EMTを誘導する代表的な分子にTGFβがある。我々はTGFβと発生学的に共通の塩基配列を有するChorionic gonadotropinβ（HCGβ）に注目した。HCGβは本来絨毛性組織で産生されるが、低分化の消化器癌における産生も報告され、その発現は予後不良とされている。
目的：大腸癌におけるHCGβ発現の生物学的意義およびEMTへの関与につき検討する。
方法：臨床病理学的解析として、大腸癌91切除症例を対象とした。抗HCGβ抗体にて免疫組織化学染色を行い、臨床病理学的因子、予後との関与を検討した。また分子病理学的解析として、作成したHCGβ過剰発現大腸癌細胞株とコンロトール大腸癌細胞株の増殖能、浸潤能を比較検討し、EMT PCR Arrayを用いた網羅的解析にて、HCGβ過剰発現により誘導された遺伝子の解析を行った。さらに、動物実験として、ヌードマウスにHCGβ過剰発現大腸癌細胞株を腹腔内注射（腹膜播種モデル）し、コントロール大腸癌細胞株との腫瘍形成能の比較を行った。
結果：切除標本における検討では、大腸癌組織でのHCGβ高発現は21例（23.1 %）に認め、HCGβ高発現群は、組織学的分化度（P = 0.041）、肝転移（P = 0.016）と相関を認めた。HCGβ過剰発現細胞株における検討では、 HCGβ過剰発現大腸癌細胞株はコントロール群と比較し、有意に浸潤能が高かった(P＜0.05)。また、EMT PCR Arrayを用いた網羅的解析にて、HCGβ過剰発現大腸癌細胞株は、Twist 1 (3.6倍)、Snail 2 (2.1倍)が過剰発現していた。また、マウスの腹膜播腫モデルにおいて、HCGβ過剰発現大腸癌細胞株は、コントロール大腸癌細胞株と比較し、有意に腫瘍形成能が高かった（P＜0.005）。