EML4-ALK、EGFR-TKI耐性の分子機構の解明と低侵襲診断技術の確立

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25462202
• Research Institution: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• Principal Investigator: 浦本 秀隆 産業医科大学, 医学部, 准教授 (90389445)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 宗 知子 産業医科大学, 医学部, 助教 (00341529) ; 田中 文啓 産業医科大学, 医学部, 教授 (10283673)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: EML4-ALK / EGFR-TKI / 耐性 / 診断 / 循環腫瘍細胞

Research Abstract

肺癌の死亡数が増加し、悪性腫瘍の中で死亡率を第１位である理由はその治療抵抗性にある。近年、分子標的治療薬が開発され、ある特定の母集団に投与すれば、一定の効果があることが証明された。しかし、当初奏効してもほぼ全症例で病態はいずれ進行し、完全に治癒することはない。したがって本研究は臨床検体を利用して分子生物学的手法を駆使し、薬剤耐性の分子機構を解明し、特に低侵襲診断技術の確立さらにその臨床応用を目的とする。最近我々はオランダのNational cancer instituteと共同研究によりMED12 がTGF signaling の上流にあり、EGFR-TKI 及びEML4-ALK-TKI のみならず、MEK やB-rafの阻害薬に対しても寄与することを世界で初めて見出した (Cell 2012;151:937-50.)。現在、臨床検体を用いてin vitroの事象を検証している。
また低侵襲診断技術の確立のために、循環腫瘍細胞 (CTC)に着目した。CTC chipを用いた検出感度はPBSの場合は99%の検出率であるが、全血では85%に低下する。CellSearch systemにおいてもEpCAM陽性のCTCしか検出できず、上皮間葉系移行を来した細胞は検出されない。現在、磁気ビーズと抗EpCAM抗体を始めとする二次抗体を組み合わせるさらなる高感度検査法の確立を目指す。さらに本研究の一部として進行、再発非小細胞肺癌 （主に腺癌）に対するEGFR-TKI耐性症例のS-1+EGFR-TKI療法の第II相試験を計画し (UMIN登録000006433)、既に症例登録が蓄積されている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

上述のとおりであるが、micro arrayに関する研究が若干遅滞ぎみである。今後倫理委員会に研究内容を提出し、実施予定である（東レ株式会社　医薬・医療事業本部　バイオツール事業推進室とは具体的な手法に関して打ち合わせ済み）

Strategy for Future Research Activity

Tissue micro arrayを利用し、EM4-ALK 及びEGFR獲得耐性症例の群間のcandidate耐性関連遺伝子の比較を行う。これにより包括的な薬剤耐性関連分子のピックアップが可能となる。次にreliable moleculesにつきendogenous な発現を生検の検体を使用してPCR-RFLP,RT-PCR, Western blottingなどにて検討する。本研究の一部として進行、再発非小細胞肺癌 （主に腺癌）に対するEGFR-TKI耐性症例のS-1+EGFR-TKI療法の第II相試験を計画し (UMIN登録000006433)、すでに症例をenrollしている。症例の蓄積と解析を行いたい

Research Products

• [Journal Article] Postoperative bleeding after surgery in patients with lung cancer (2013)
  • Author(s): Uramoto H, Shimokawa H, Tanaka F
  • Journal Title: Anticancer Res Volume: 34 Pages: 981-984
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Erlotinib resistance in lung cancer cells mediated by integrinβ1/Src/Akt-driven bypass signaling (2013)
  • Author(s): Kanda R, Kawahara A, Watari K, Murakami Y, Sonoda K, Maeda M, Fujita H, Kage M, Uramoto H, Costa C, Kuwano M, Ono M(12人中9番目）
  • Journal Title: Cancer Res Volume: 73 Pages: 6243-53
  • DOI: 10.1158/0008-5472
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Angiogenesis of Lung Cancer Utilizes Existing Blood Vessels Rather than Developing New Vessels Using Signals from Carcinogenesis (2013)
  • Author(s): Uramoto H, Yamada S, Tanaka F
  • Journal Title: Anticancer Res Volume: 33 Pages: 1913-6
  • DOI: 10.1158/1078-0432
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinical Significance of Expression of Cancer/testis Antigen and Down-regulation of HLA Class-I in Patients with Stage I Non-small Cell Lung Cancer (2013)
  • Author(s): Hanagiri T, Shigematsu Y, Shinohara S, Takenaka M, Oka S, Chikaishi Y, Nagata Y, Baba T, Uramoto H, So T, Yamada S（11人中9番目）
  • Journal Title: Anticancer Res Volume: 33 Pages: 2123-8
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Comment on “Association of EGFR mutation or ALK rearrangement with expression of DNA repair and synthesis genes in never-smoker women with pulmonary adenocarcinoma (2013)
  • Author(s): Uramoto H, Tanaka F
  • Journal Title: Cancer Volume: 119 Pages: 2660
  • DOI: 10.1002/cncr.28095
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prognostic factors before and after recurrence of resected non-small cell lung cancer (2013)
  • Author(s): Baba T, Uramoto H, Takenaka M, Chikaishi Y, Oka S, Shigematsu Y, Hanagiri T,Tanaka F（8人中2番目）
  • Journal Title: Respir Investig Volume: 50 Pages: 151-6
  • DOI: 10.1378/chest.12-1717
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cancer/testis antigen expression as a predictor for epidermal growth factor receptor mutation and prognosis in lung adenocarcinoma (2013)
  • Author(s): Baba T, Shiota H, Kuroda K, Shigematsu Y, Ichiki Y, Uramoto H, Hanagiri T, Tanaka F（8人中6番目）
  • Journal Title: Eur J Cardiothorac Surg Volume: 43 Pages: 759-64
  • DOI: 10.1093/ejcts/ezs426
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Intrapleural chemotherapy improves the survival of non-small cell lung cancer patients with positive pleural lavage cytology (2013)
  • Author(s): Baba T, Uramoto H, Kuwata T, Takenaka M, Chikaishi Y, Oka S, Nagata Y, Shigematsu Y, Shimokawa H, Nakagawa M, So T, Hanagiri T, Tanaka F（13人中2番目）
  • Journal Title: Surg Today Volume: 43 Pages: 648-53
  • DOI: 10.1007/s00595-012-0281-y
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Serum Level of Osteopontin as a Prognostic Factor in Patients Who Underwent Surgical Resection for Non-Small-Cell Lung Cancer (2013)
  • Author(s): Takenaka M, Hanagiri T, Shinohara S, Yasuda M, Chikaishi Y, Oka S, Shimokawa H, Nagata Y, Nakagawa M, Uramoto H, So T, Yamada S, Tanaka F（13人中9番目）
  • Journal Title: Clin Lung Cancer Volume: 14 Pages: 288-94
  • DOI: 10.1016/j.cllc.2012.09.005
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Discriminative features of thin-slice CT for peripheral intrapulmonary lymph nodes (2013)
  • Author(s): Takenaka M, Uramoto H, Shimokawa H, So T, Hanagiri T, Aoki T, Tanaka F（7人中2番目）
  • Journal Title: Asian J Surg Volume: 36 Pages: 69-73
  • DOI: 10.1016/j.asjsur.2012.11.005
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prognostic implications of human leukocyte antigen class I expression in patients who underwent surgical resection for non-small-cell lung cancer (2013)
  • Author(s): Hanagiri T, Shigematsu Y, Kuroda K, Baba T, Shiota H, Ichiki Y, Nagata Y, Yasuda M, Uramoto H, So T, Takenoyama M, Tanaka F（12人中9番目）
  • Journal Title: J Surg Res Volume: 181 Pages: 57-63
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Preoperative embolization followed by palliative therapy for patients unable to undergo the complete removal of a chronic expanding hematomaatoma: A report of a case (2013)
  • Author(s): Kuwata T, Uramoto H, Oka S, Hidehiko Shimokawa H, Shigematsu Y, Baba T, Hanagiri T, Tanaka F
  • Journal Title: Asian J Surg Volume: 36 Pages: 40-2
  • DOI: 10.1016/j.asjsur.2012.06.006
  • Peer Reviewed
• [Presentation] EML4-ALK、及びEGFR-TKIに対する耐性関連分子MED12に基づく新しい肺癌治療の戦略 (2013)
  • Author(s): 浦本秀隆、平良彰浩、竹中 賢、近石泰弘、岡壮一、下川秀彦、宗知子、花桐武志、田中文啓
  • Organizer: 第52回日本肺癌学会総会
  • Place of Presentation: ホテルニューオータニ東京
  • Year and Date: 20131121-20131122
• [Presentation] 融合遺伝子がもたらす新しいがん治療 TGFβ経路によるALK阻害剤耐性 (2013)
  • Author(s): 浦本秀隆
  • Organizer: 第72回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜
  • Year and Date: 20131003-20131005
• [Presentation] Novel malignant-mesothelioma-associated antigens (Gene-X and THBS-2) in the diagnosis of malignant pleural mesothelioma (MPM) (2013)
  • Author(s): Tanaka F, Shigematsu Y, Hanagiri T， Uramoto H, So T, Yoneda K, Takuwa T, Hashimoto M, Matsumoto S, Okumura Y, Kondo N, Hasegawa S
  • Organizer: 49ｔｈ American Society of clinical oncology
  • Place of Presentation: Chicago,USA
  • Year and Date: 20130530-20130603
• [Presentation] Development of detecting systems for circulating tumor cells in malignant pleural mesothelioma patients (2013)
  • Author(s): Chikaishi Y, So T, Oka S, Takenaka M, Nakagawa M, Shimokawa H, Iwata T, Nagata Y, Uramoto H, Hanagiri T, Ohnaga T, Uramoto H, Tanaka F
  • Organizer: AACR (The American Association for Cancer Research) Meeting
  • Place of Presentation: Washington,USA
  • Year and Date: 20130406-20130410