2013 Fiscal Year Research-status Report
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25462755
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
井上 幸次 鳥取大学, 医学部, 教授 (10213183)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
池田 欣史 鳥取大学, 医学部, 助教 (10444639)
宮崎 大 鳥取大学, 医学部附属病院, 講師 (30346358)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | サイトメガロウイルス / 角膜内皮細胞 / マイクロアレイ / サイトカイン |
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| Research Abstract |
【目的】近年サイトメガロウイルス（CMV）角膜内皮炎の報告が多数なされている。しかし、CMVの増殖はきわめて緩慢であり、CMVが実際に角膜内皮に感染できるのかについては十分な証拠がない。今回我々はin vitroでCMVが角膜内皮に感染できるのか、もし感染できるならどのような炎症応答を惹起するのかをマイクロアレイにて検討した。
【方法】CMV Towne株、AD169株、臨床分離株を精製後、不死化ヒト角膜内皮細胞（hCEn）に吸着させ、hCEnへの感染性を検討した。CMVは、MOI0, 0.01, 0.1で吸着させ、6 、12 、24 時間後に上清、mRNA, DNAを抽出し、ELISA、プロテインアレイ、およびreal time-PCRを用いて、CMV遺伝子の転写、hCEnの炎症性サイトカイン応答プロファイルを検討した。【結果】Towne株、AD169株ではhCEnに感染が成立しなかったが、臨床分離株はhCEnへの吸着後、代表的CMV遺伝子IE-1、UL-83、Glycoprotein Bの、経時的転写誘導を認めた。吸着後のhCEnにおいては、IL-6, IDO1 (indoleamine 2,3-dioxygenase 1)を含め多数の炎症性あるいは制御性因子の転写が誘導された。プロテインアレイにおいては、BDNF、BLC、GDNF、PIGF、MCP-1、EGF、TGF-β1、PDGF-BB、IL-16、Leptin、MCSF、MCP-4、IP-10、IL-6、IL-13、IL-5、IL-15、GCP-2、FGF-9、IFN-γ、RANTES、Ckβ8-1、Eotaxin、MIP-3α、VEGFなどのサイトカインの誘導を認めた。
【結論】CMVはhCEnに感染可能であり、角膜内皮に特徴的な感染免疫応答を誘導する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
サイトメガロウイルスの角膜内皮細胞に対する感染力が弱く、１クールの実験をおこなうのに時間がかかる。また、十分な力価のサイトメガロウイルス精製株が大量にないとうまく感染が成立しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
サイトメガロウイルスの角膜内皮感染においては、細かい分子のメカニズムを検討することに時間を要する、あるいはうまく施行できないことも考えられる。サイトメガロウイルスと同様の分子が単純ヘルペスウイルス感染で上昇することがわかっているので、単純ヘルペスウイルスを用いて、そういう分子(IDO1など）について検索することも検討する。
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[Journal Article] Multicenter clinical study of the herpes simplex virus immunochromatographic assay kit for the diagnosis of herpetic epithelial keratitis.2013
Author(s)
Inoue Y, Shimomura Y, Fukuda M, Miyazaki D, Ohashi Y, Sasaki H, Tagawa,Y, Shiota H, Inada N, Okamoto S, Araki-Sasaki K, Kimura T, Hatano H, Nakagawa,H, Nakamura S, Hirahara A, Tanaka K, and Sakuma H
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Journal Title
Br J Ophthalmol
Volume: 97
Pages: 1108-1112
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Human Cytomegalovirus-mediated inflammatory responses2013
Author(s)
Michiko Kandori. Dai Miyazaki, Keiko Yakura, Yumiko Noguchi, Yukimi Yamamoto,Yoshitsugu Inoue,Tatsuo Suzutani
Organizer
Annual Meeting of the Association for Research in Vision and Ophthalmology
Place of Presentation
Washington State Convention Center
Year and Date
20130505-20130509
